На основе положений ст. 10 Закона о ветеринарной деятельности № 1538-ХII от 23.06.93 г. и в целях гармонизации ветеринарного законодательства Республики Молдова с ветеринарным законодательством Европейского Союза ПРИКАЗЫВАЮ:

1. Утвердить Ветеринарно-санитарные правила по применению некоторых методов исследования и оценки термически обработанного молока, предназначенного для прямого общественного потребления, разработанные в соответствии с требованиями Директивы ЕС 92/608/ЕЕС (прилагается).

2. Управлению ветеринарной медицины, Государственной ветеринарной инспекции, Республиканскому ветеринарно-диагностическому центру, районным и муниципальным ветеринарно-санитарным службам руководствоваться в своей деятельности положениями указанных ветеринарно-санитарных правил.

4. Считать утратившим силу приказ Министерства сельского хозяйства и пищевой промышленности № 140 от 31.05.2005 г. об утверждении Ветеринарно-санитарных правил по применению некоторых методов исследования и оценки термически обработанного молока, предназначенного для прямого общественного потребления.

2. Применение основных методов исследования и оценки, установление критериев достоверности, а также отбор проб должны быть осуществлены согласно правилам, установленным в приложении № 1.

В настоящем приложении даны общие положения в отношении реактивов, оборудования, выражения результатов, точности и отчета об анализе. Компетентные ветеринарные органы и утвержденные лаборатории, ответственные за забор образцов и проверку молока, должны принимать к сведению общие положения.

2.1.1. В случаях, когда упоминается вода для раствора, разведения или ополаскивания, должна быть использована дистиллированная вода, деионизованная вода либо деминерализованная вода эквивалентной степени очистки.

3.1.1. Список оборудования, представленный для различных справочных процедур, включает только предметы специального назначения и предметы особой спецификации.

Если не указано иное, результаты, которые заносятся в аналитический отчет (см. пункт 6), должны представлять собой среднее арифметическое значение, полученное в результате 2 анализов, проведенных с учетом критерия повторяемости (5.1.1), определенного для данного метода. В случае если не выполняется критерий повторяемости, анализ должен быть проведен повторно либо результат должен быть признан недействительным.

5.1.1. Повторяемость (r) - значение, ниже которого находится абсолютная разница результатов 2 отдельных анализов, полученных по одной и той же процедуре на идентичном материале, при одних и тех же условиях (один и тот же оператор, одно и то же оборудование в одной и той же лаборатории с минимальным промежутком времени).

5.1.2. Репродуктивность (R) - значение, ниже которого находится абсолютная разница результатов 2 отдельных анализов, полученных по одной и той же процедуре на идентичном материале, при разных условиях (разные операторы, разное оборудование в различных лабораториях в различное время).

5.1.3. Если не указано иное, значения критериев повторяемости и репродуктивности, данные в соответствующих статьях каждой процедуры, представляют с точностью 95% интервалы по определению международного стандарта ISO 5725-2, издание 1986 г.

В отчете об анализе должны быть указаны метод анализа и полученные результаты. Кроме того, должны быть указаны подробности, не указанные при описании метода анализа, либо необязательные, а также любые другие обстоятельства, которые могли повлиять на полученный результат. Отчет об анализе должен включать все сведения, необходимые для полной идентификации образца.

2.1. Выборочная проверка молока, прошедшего тепловую обработку, должна производиться оператором, прошедшим предварительную подготовку и обладающим достаточными навыками для отбора образцов молока.

2.2. В случае необходимости компетентный ветеринарный орган либо проверяющая лаборатория должны провести инструктаж по технологии выборочных проверок для обслуживающего персонала, осуществляющего отбор образцов с тем, чтобы взятый образец представлял и соответствовал качеству всей партии.

2.3. Если необходимо, компетентный ветеринарный орган или проверяющая лаборатория должны провести инструктаж по маркировке образцов для обслуживающего персонала, осуществляющего отбор образцов, с целью обеспечения тождественности образцов.

3.1. Оборудование для отбора образцов должно быть изготовлено из нержавеющей стали либо другого подходящего материала соответствующей прочности и сконструировано для определенной цели (смешивание, отбор образца т. п.). Плунжеры и мешалки для перемешивания жидкости в контейнерах должны иметь достаточное пространство для обеспечения тщательного перемешивания продукта, что, однако, не должно способствовать появлению прогорклого привкуса молока. Черпак должен иметь сплошную ручку достаточной длины для того, чтобы осуществлять отбор образцов с любой глубины в контейнере. Вместимость ковша должна быть не менее 50 мл.

3.3. Материалы, из которых изготовлено оборудование для отбора образцов, включая контейнеры и емкости, не должны служить причиной каких-либо изменений в образцах, которые могут повлиять на результаты анализов. Все поверхности оборудования для отбора образцов и контейнеров для хранения образцов должны быть чистыми и сухими, гладкими и без щелей, с закругленными углами.

4.1.3. Вместимость используемых контейнеров для хранения образцов должна быть такой, чтобы контейнеры были практически полностью заполнены веществом, взятым на анализ, таким образом, чтобы обеспечивалась необходимая степень перемешивания содержимого перед анализом, но не допускалось сбивание масла при транспортировке.

В случае если необходимо провести проверку качества молока из более чем 1 контейнера, необходимо взять показательное количество из каждого контейнера с указанием объема продукта в каждом контейнере. Если нет необходимости в проверке каждого контейнера отдельно, нужно смешать порции образцов в количествах, пропорциональных количеству молока в контейнерах, из которых был взят каждый образец. Отбор образца (образцов) в пропорциональных количествах из контейнеров должен осуществляться после перемешивания.

Перемешивание содержимого больших емкостей, автомобильных и железнодорожных цистерн, цистерн-хранилищ рекомендуется проводить при помощи механических устройств (4.2.5.2).

Степень перемешивания зависит от периода времени, в течение которого молоко находилось в состоянии покоя. Эффективность способа перемешивания, примененного в каждом конкретном случае, определяется соответствием целям предписанного анализа; критерий эффективности перемешивания влияет, в частности, на идентичность результатов анализов образцов, взятых из различных частей партии продукта либо из сливного отверстия емкости при разгрузке с некоторыми промежутками. Перемешивание молока можно считать эффективным, если разность содержания жира в двух образцах, взятых при этих условиях, не превышает 0,1%.

В большой емкости с выпускным отверстием, расположенным на дне, во время разгрузки может оставаться небольшое количество молока, которое не должно считаться показательным для всей партии, даже после перемешивания. В этой связи желательно осуществлять отбор молока через люки; если отбор образцов осуществляется из выпускного отверстия, необходимо дать молоку стечь.

c) для железнодорожных или автомобильных цистерн путем рециркуляции молока через трансфертный шланг, присоединенный к разгрузочным насосам и введенный через люк,

d) чистым фильтрованным сжатым воздухом. В этом случае должен быть использован минимальный объем воздуха при минимальном давлении во избежание развития прогорклого вкуса.

Отбор образцов молока, прошедшего тепловую обработку, предназначенного для непосредственного употребления в розничной упаковке, должен осуществляться из запечатанных полных упаковок. Если возможно, отбор образцов должен производиться из упаковочного устройства либо в холодильном помещении на обрабатывающем предприятии в кратчайшие сроки после переработки. Забор образцов пастеризованного молока должен производиться в день переработки. Отбор образцов молока, прошедшего различные виды тепловой обработки (пастеризованного, стерилизованного и прошедшего обработку при УВТ), должен осуществляться в количествах, необходимых для исследований, которые должны проводиться в соответствии с требованиями, установленными проверяющей лабораторией или иным компетентным органом.

Образец должен маркироваться при помощи идентификационного кода с тем, чтобы его легко было идентифицировать, опираясь на инструкцию, представленную проверяющей лабораторией или иным компетентным органом.

5.1. В соответствии с требованиями компетентного национального органа инструкции по условиям консервации (химической, температурной), транспортировки, хранения, а также интервалов времени между отбором и анализом молока должны разрабатываться проверяющей лабораторией в зависимости от вида молока и используемой аналитической процедуры.

5.2. Эти инструкции должны предусматривать, что во время транспортировки и хранения должны быть приняты меры по предотвращению загрязнения/заражения содержимого контейнеров, а также воздействия на содержимое прямых солнечных лучей. Если для хранения образцов используется прозрачная емкость, образцы должны храниться в темном месте.

5.1. Проба молока доводится до температуры 20-25⁰С. Осторожно смешивается для достижения равномерного распределения жировых частиц внутри пробы. Сильно не взбалтывать, чтобы предотвратить образование пены или плохой сметаны.

Если слой сметаны удаляется с трудом, молоко постепенно доводится до температуры 35-40⁰С, осторожно помешивается для образования единого сгустка, который прилипает к стенкам сосудов. После этого проба быстро охлаждается до температуры 20-25⁰С.

Можно использовать сепаратор для медленного отделения жирных веществ из молока. Результаты считаются некачественными, если проба содержит видимые жидкие жирные вещества или появляются неравномерные белые частицы, которые прилипают к стенкам сосуда.

Бюксы (4.4) с открытой крышкой нагреваются в сушильном шкафу (4.3) при температуре 102 ± 2⁰С не менее 30 минут. Закрываются крышкой и сразу же помещаются в эксикатор (4.2). Охлаждаются до комнатной температуры (не менее 30 минут), потом взвешиваются с точностью до 0,1 мг.

6.3.4. Бюксы вновь помещаются в сушильный шкаф с открытыми крышками на один час. Потом закрываются крышками и вынимаются из сушильного шкафа и оставляются для охлаждения на 30 минут в эксикаторе. Затем взвешиваются с точностью до 0,1 мг.

6.3.5. Процедура повторяется согласно пункту 6.3.4 до тех пор, пока разница массы после двух последующих взвешиваний не превысит 0,5 мг. Записывается меньшая масса.

"Содержание жирных веществ в молоке" - представляет собой все вещества, определяемые методом, который описывается далее, выраженные в процентном соотношении от общей массы.

Вытяжка аммонийно-этиловой смеси из пробы с помощью диэтилового спирта и петролейного эфира с последующим удалением растворителей путем выпаривания или дистиллирования и определением массы экстрагируемых растворимых веществ в петролейном эфире (метод, известный под общим названием Roese-Gotlieb).

Все реактивы должны быть пригодными для анализа и не должны оставлять существенных следов в контрольной пробе. Их качество проверяется согласно пункту 6.3. Для взвешивания требуется колба, лабораторный стакан или пустой металлический бюкс (5.8), приготовленные заранее как тара согласно пункту 1.4 (чтобы избежать влияния факторов внешней среды на результаты взвешивания). Если общий остаток влияет на объем массы тары больше чем на 2,5 мг, выявляется остаточное вещество растворителя выпариванием 100 мл диэтилового спирта (4.4) и 100 мл петролейного эфира (4.5). Используется также тара для взвешивания. Если остаток больше 2,5 мг, растворитель очищается дистиллированием или заменяется.

4.1. Гидроокись аммония представляет собой приблизительно 25%-ый раствор аммиака. Можно использовать и раствор гидроокиси аммония большей концентрации (пункты 6.5.1 и А 1.5.1).

4.2. Этиловый спирт не менее 94%. Можно использовать денатурированный метанолом этиловый спирт, если есть уверенность, что это не повлияет на окончательный результат.

Использование этих растворов, позволяющих лучше видеть границу между контактирующими поверхностями растворителя с водной поверхностью, является дополнительным (6.5.2). Можно использовать и другие водные растворы красителей, если они не влияют на результаты исследований.

Учитывая, что при исследованиях используются легко воспламеняющиеся и испаряющиеся реактивы, электрическое оборудование должно соответствовать требованиям законодательства при использовании таких растворителей.

5.2. Центрифуга для колб или пробирок для экстракции (5.6) со скоростью вращения 500-600 оборотов в минуту, позволяющая образовать гравитационное поле 80-90 г на их наружной поверхности.

Примечание. Можно использовать трубочки для экстракции жирных веществ, оснащенные сифоном или устройством для промывки. Инструкция по использованию приведена в приложении.

Колбы (или трубки) должны быть снабжены пробками из матового стекла или пробками из материала высшего качества, который не портится при контакте с реактивами. Пробки из пробкового дерева нужно ополоснуть в диэтиловом эфире (4.4), выдержать в воде при температуре 60⁰С или больше не менее 15 минут и охлаждать в воде так, чтобы при использовании они были пропитаны водой.

5.9. Приемник для улавливания жирных веществ, например, колбы для кипячения (колбы с плоским дном) или колбы Erlenmeyer с объемом 125-250 мл или металлические бюксы. Если используются металлические бюксы, они должны быть изготовлены из нержавеющей стали с плоским дном с клювом диаметром 80-100 мм и высотой приблизительно 50 мм.

Другой метод исследования с помощью трубок для экстракции жирного вещества, снабженных сифоном или устройством для мытья, описан в приложении (смотри примечание, пункт 5.6).

Пробы для исследования готовятся при температуре приблизительно 35-45⁰С около 15 минут, при необходимости используется водяная баня (5.5). Проба осторожно взбалтывается до получения однородной массы, переворачивается несколько раз, не допуская при этом образования пены или сметаны, и быстро охлаждается до 20⁰С.

Проба осторожно взбалтывается (6.1) 3-4-кратным переворачиванием, сразу взвешивается с точностью до 1 мг, затем отбирается 11 г и переносится в экстракционную колбу (5.6). Для проведения исследования отобранная проба переносится в узкую часть колбы для экстракции.

Приемник высушивается (5.9), помещается в него несколько регуляторов кипения (кипелки) (5.10) для того, чтобы обеспечить равномерное испарение растворителей в сушильном шкафу в течение одного часа (5.4). Приемник ставится для охлаждения (не в эксикатор, избегая попадания в него пыли) при комнатной температуре, где проводится взвешивание в течение одного часа, если приемник стеклянный, и не менее 30 минут - если металлический бюкс. С помощью щипцов (чтобы избежать разницы температур) приемник ставится на весы и взвешивается с точностью до 0,1 мг.

6.5.1. Добавляется 2 мл раствора гидроокиси аммония (4.1) или эквивалентный объем большей концентрации и тщательно смешивается с пробой, которая находится в узкой части колбы. Затем проводят подсчет.

6.5.2. Добавляется 10 мл этилового спирта (4.2) и осторожно смешивается, обеспечивая перемещение содержимого колбы из одного конца в другой, избегая попадания его в горло колбы. Можно добавить две капли Красного-Конго или Крезола-Красного (4.3).

6.5.3. Добавляется 25 мл диэтилового эфира (4.4). Колба закрывается пробкой из пробкового дерева или пропитанной в воде (5.6), сильно встряхивается, без образования эмульсии, в течение 1 минуты, в горизонтальном положении узкой частью вверх. Временно оставляют жидкость, чтобы она перешла из широкой в узкую часть колбы. При необходимости колба охлаждается проточной водой, затем осторожно снимается пробка или закрывающее приспособление и промывается, в том числе и горлышко колбы небольшим количеством смеси растворителей (4.6), используя емкость для мытья (5.8) таким образом, чтобы промывающий раствор жидкости попал в моющую емкость.

6.5.4. Добавляется 25 мл петролейного эфира (4.5), закрывается пробковой крышкой, пропитанной водой, или другим приспособлением и осторожно встряхивается в течение 30 секунд (6.5.3).

6.5.5. Закрытая колба помещается в центрифугу на 15 минут при вращении 500-600 об/минуту (5.2). Если не используется центрифуга (смотри приложение 5.2), то оставляется в штативе (5.7) не меньше чем на 30 минут до осветления надосадочного слоя и видимого отделения от водного слоя. При необходимости колбу можно охладить проточной водой.

6.5.7. Аккуратно сливают большую часть растворителя декантацией в приемник для рекуперации жирных веществ (п.6.4), в который добавлено несколько кипятильников (п.5.10). Во время декантации нужно избегать попадания водного слоя в органический экстракт.

6.5.8. Вымывают снаружи горлышко колбы для экстракции небольшим количеством смеси растворителя, добавляя его в приемник для экстрагирования жирных веществ, избегая стекания смеси растворителей по стенкам колбы для экстракции.

6.5.10. Второе экстрагирование проводят в соответствии с п. 6.5.3 и 6.5.8, используя 15 мл диэтилового эфира (п. 4.5); диэтиловый эфир используют для ополаскивания горлышка колбы для экстракции.

6.5.11. Третье экстрагирование проводят по п. 6.5.3 и 6.5.8, используя 15 мл диэтилового эфира (п. 4.4) и 15 мл петролейного эфира (п. 4.5). Диэтиловый эфир используют для ополаскивания горлышка колбы для экстракции. При анализе обезжиренного молока третье экстрагирование не проводят.

6.5.12. При помощи перегонки или выпаривания удаляются полностью растворители и этанол (п. 5.3). Перед перегонкой горлышко колбы ополаскивается смесью растворителей (п. 4.6)

6.5.14. Последующие взвешивания колбы производят после высушивания при тех же режимах до тех пор, пока разница в массе между последовательными взвешиваниями не будет более 0,5 мг.

6.5.15. Для установления, что все экстрагированное вещество является жиром, в колбу для перегонки добавляют 25 мл петролейного эфира. Осторожно нагревают и взбалтывают до полного растворения всех жирных веществ.

Если экстрагированные вещества полностью растворяются в петролейном эфире, массой растворяемых веществ будет разница между конечной (финальной) массой с экстрагирующими веществами (п. 6.5.14) и первоначальной массой (п. 6.4.).

6.5.16. При неполном растворении экстрагированного вещества или в сомнительных случаях полностью экстрагируют жир путем нескольких промываний подогретым петролейным эфиром.

Нерастворимые вещества осаждают и осторожно декантируют петролейный эфир, не трогая нерастворимые вещества. Эту операцию повторяют три раза, используя петролейный эфир для промывки (ополаскивания) внутренней стороны горлышка колбы.

В конце ополаскивают внешнюю сторону приемника смесью растворителей так, чтобы растворитель не стекал на внешнюю поверхность колбы. Удаляют пары петролейного эфира, нагревая колбу (приемника) в сушильном шкафу в течение 1 часа, охлаждают и взвешивают (п. 6.5.13 и 6.5.14). Массой жирных веществ будет разница между массой, определенной п. 6.5.14, и конечной массой.

М₂ - масса приемника, подготовленного для жирных веществ или, в случае нерастворимых веществ, приемника для получения жирных веществ и нерастворимого остатка, определенного по п. 6.5.16 в г,

М₄ - масса (г) приемника для жирного вещества (п. 6.4), используемого для контрольной пробы (п. 6.4.3) или, в случае нерастворимости вещества, приемника для получения жирного вещества и нерастворимого остатка, определяемого п. 5.6.16. Результаты определяются с точностью до 1%.

Общее количество сухих обезжиренных веществ выражается в % массы и представляет разницу между общим содержанием сухих веществ (разд. I ) и содержанием жиров (разд. II ).

Часть взвешенного образца (пробы) молока минерализуется концентрированной H2 S04 и сульфатом калия в присутствии медного купороса в качестве катализатора таким образом, чтобы азот органических веществ конвертировался в сульфат аммония. Выделенный аммиак в результате добавления едкого натрия связывается с борной кислотой. Затем этот раствор титруется с кислым раствором.

4.6 Индикатор: растворяется 0,01 г метилового красного, 0,02 г бромэтилового синего и 0,06 г бромкрезалового зеленого в 100 мл этилового спирта. Хранят в посуде из темного стекла в прохладном, а затем темном месте.

Примечание. Степень чистоты реактивов, указанных в п. 4.9 и 4.10, должна быть осч (особой чистоты). Для п. 4.9 желательно использовать проверенные растворы солей аммония.

5.5. Минерализатор (п. 5.1) в наклонном положении (около 45⁰), оборудованный электрическим устройством для обогрева или регулируемой газовой лампой, таким образом, чтобы содержимое колбы не превышало 1/3 горловины, и устройством для отвода сожженных газов.

5.6. Перегонное устройство из боросиликатного стекла, к которому можно подсоединить колбу Кельдаля (п. 5.1), которое состоит из эффективного устройства для выведения полученной жидкости при первой перегонке, связанное эффективным холодильником с внутренним прямым цилиндром и с отводкой в нижней части: соединяющие части должны быть из неопрена и герметичны.

6.1. В колбу Кельдаля вносят поочередно (п. 5.1) шарики кипячения (п. 5.2) (например три стеклянных шарика), 15 г сульфата калия (п. 4.1), 1.0 мл раствора сульфата меди (п. 4.2), 5 г молока (взвешенного с точностью 0,001 г) и 25 мл серной кислоты (п. 4.3). Кислота используется для промывки остатков растворов сульфата меди, сульфата калия или молока с горлышка колб, после чего ее содержимое смешивается.

Примечание: так как органические вещества абсорбируют серную кислоту во время кипячения, желательно при сжигании взять 30 мл, а не 25 мл серной кислоты (п. 4.3), если содержание жиров в молоке выше 5%. Это относится и к контрольной пробе.

6.2. Каждая колба Кельдаля нагревается на приборе для минерализации (п. 5.5), сначала на маленьком огне так, чтобы вся черная пена оставалась в колбе. Если первоначальная пена исчезает, чтобы пропустить сжигаемый избыточный белый газ, смесь доводится до интенсивного кипения (пары кислот будут конденсироваться на половине пути в горле колбы) пока исчезнут совсем черные частицы, а содержимое колбы становится прозрачным, со слабым сине-зеленым оттенком. Кипячение продолжают в течение 1,5 часа.

а) период просветления не должен превышать 1 час, а весь период минерализации не должен быть меньше чем 2,5 часа. Если необходимо больше часа для того, чтобы получить просветление, надо увеличить время минерализации вообще;

b) сульфат калия ускоряет минерализацию, потому что поднимает температуру кипения. Если остаточный объем серной кислоты в конце минерализации меньше чем 15 мл, существует вероятность потери азота из-за сильного нагрева. В случае использования газа для нагревания берут пластинку из изоляционного материала, которая имеет отверстие определенных размеров, позволяющее пламени нагревать только ту часть колбы, которая покрыта жидкостью в колбе (п. 5.5);

с) если во время интенсивного кипячения не все черные частицы вымыты кислотой с горлышка колбы (вымыванию можно способствовать поворачиванием колбы), тогда охлаждается колба и оставшиеся черные частицы вымывают небольшим количеством воды. После этого продолжают минерализацию, как описано выше.

6.3. В охлажденные колбы Кельдаля добавляется по 300 мл воды, так чтобы вымыть все частицы, оставшиеся на стенках колбы. Медленно перемешивают содержимое колбы до полного растворения отделившихся кристаллов. Добавляется несколько кипелок (регуляторы кипения) для равномерного кипения. После этого добавляют в каждую колбу по 70 мл едкого натра (п. 4.4), держа колбу наклонно так, чтобы раствор едкого натра образовал нижний слой в колбе и не протекал по наружной стенке.

Примечание. Общий объем воды и едкого натра должен быть 370 мл, чтобы могли собрать около 150 мл дистиллята до поднятия кипелок на поверхности (п. 6.4). Если объем едкого натра с концентрацией менее 47%, то объем воды пропорционально уменьшается. Пример: если добавляется 85 мл раствора 40%-ной или 125 мл раствора 30%-ной концентрации, то объем добавленной воды должен быть соответственно 282 мл и 245 мл.

6.4 Содержимое колбы Кельдаля количественно переносят в отгонную колбу вместимостью 500-1000 мл (п. 5.6). В приемную колбу аппарата для перегонки вместимостью 250 мл доливают 50 мл борной кислоты (4.5) и 0,20 мл (5-6 капель) индикатора (п. 4.6) и опускают конец охладительной трубки так, чтобы он был погружен в кислотный раствор. Перед нагреванием на малом огне во избежание образования избытка пены содержимое колбы осторожно взбалтывают и отгонку продолжают до тех пор, пока стекающий в приемную колбу дистиллят не достигнет объема 100 и 125 мл и не будет иметь нейтральную реакцию на лакмусовую бумажку. По окончании перегонки конец промывают в приемной колбе дистиллированной водой.

6.5. Каждый дистиллят титруется титрованным раствором (п. 4.7) до рН 4,6\xf10,1, для этого используется рН метр и автоматическая бюретка. Для точности титрования добавляется индикатор. Во избежание ошибок в определении объема, используемого для титрования, с точностью до 0,01 мл, пользуются лупой (п. 5.10).

6.7.1. При перегонке нужно избежать перегрева для того, чтобы предотвратить потери азота, для этого используют пробу из: 0,15 г (оксалата аммония или сульфата аммония (п. 4.9) с точностью в 0,001 г и 0,1 г сахарозы (п. 4.8). Процент полученного азота должен быть в пределах 99-100%. Если результаты не соответствуют, это свидетельствует о допущении ошибок в процессе анализа.

6.7.2. Проверяется, если при минерализации выведено все количество белкового азота с помощью реактивов: 0,20 г лизин хлоргидрат, 0,5 г фенацетина или 0,2 г соленого лизина. Все вещества должны быть взвешены с точностью до 0,001 г (4.10). Процент полученного азота должен быть больше 98-99%

Во время работы с концентрированной серной кислотой и едким натром и с колбами Кельдаля нужно носить фартук лабораторный, защитные очки и перчатки, устойчивые к кислотам.

В процессе перегонки колбы Кельдаля должны быть под постоянным присмотром. Во избежание рисков, если кипячение бурное перегонка прекращается. В случае поломок перегоночного устройства более 2-3 минут опускается накопительная колба таким образом, чтобы конец охладителя вышел из жидкости.

9.1. Вместо минерализации в колбах Кельдаля можно использовать печи для сжигания проб (п. 5.5 и 5.1). В этом случае во избежание возможных неполадок отдельно проверяется каждая точка (п. 6.7).

9.2. Вместо прямой перегонки (п. 6.4) можно использовать перегонку с помощью водяного пара. Если эта система не позволяет использовать дистиллированную воду, то эта вода не должна содержать летучие, кислые и щелочные вещества.

Примечание: эти изменения могут быть приняты при условии, что воспроизводимость (п. 8.2.1) и точность результатов двух контрольных проб должны соответствовать нормам.

В данной главе описывается основной метод определения массовой доли белковых веществ в термически обработанном молоке (арт. 3. лит (А) п. 3 из директивы 85/397/СЕЕ).

Массовая доля белковых веществ в молоке определяется умножением полученного результата на коэффициент пересчета азота на белковые соединения (в %), определенный по методу, описанному в IV главе (п. 3).

5.1. Колба с пробой гомогенизируется, поворачивая ее для дисперсии жирных веществ. Пробу помещают в водяную баню (п. 4.4) при 40^oС и выдерживают ее еще 5 мин при этой температуре.

5.2. Проба опять осторожно перемешивается, чтобы избежать проникновения воздуха. Молоко сливают в цилиндр (п. 4.2) в наклонном виде, чтобы избежать образования пены или пузырей.

Чистый ареометр опускают медленно в достаточное количество молока, погружая его до тех пор, пока до предполагаемой отметки ареометрической шкалы не останется 3-4 мм, затем оставляют его в свободно плавающем состоянии. Ареометр не должен касаться стенок цилиндра. Цилиндр с ареометром должен быть в вертикальном положении.

Смотри п. 6.2 раздела II приложения 2 к настоящим правилам, но применяются трубки для экстракции жирных веществ (п. 5.6 раздела II приложения 2 к настоящим правилам). Пробу нужно помещать на дно трубки для экстракции.

1.5.1. В трубку с пробой добавляется 2 мл раствора гидроксида аммония (п 4.1 раздела II приложения 2 к настоящим правилам) или такой же объем гидроксида аммония более концентрированный и хорошо перемешивается. Сразу после добавления NH4OH проводятся измерения.

1.5.2. Добавляется 10 мл этилового спирта (п. 4.2) и медленно перемешивается. Можно добавить две капли Красного-Конго или Крезола-Красного (р. 4.3. раздела II приложения 2 к настоящим правилам).

1.5.3. Наливаем 25 мл диэтиловой окиси (п. 4.4. раздела II приложения к 2 настоящим правилам), накрываем трубку пробкой, насыщенной водой (п. 5.6 раздела II приложения 2 к настоящим правилам) и хорошо перемешиваем, но не сильно (чтобы избежать образования стойких эмульсий) повторными вращениями в течение минуты.

Если есть необходимость, трубка охлаждается под проточной водой, снимается пробка, ополаскивается горлышко трубки небольшим количеством смеси органического растворителя (п. 4.6 раздела II приложения 2 к настоящим правилам) так, чтобы растворы попали внутрь трубки.

1.5.4. Добавляем 25 мл петролейного эфира (п. 4.5 раздела II приложения 2 к настоящим правилам), закрываем пробкой, насыщенной водой, и осторожно перемешиваем в течение 30 сек (п. 1.5.3.).

1.5.5. Трубку центрифугируют в течение 1-5 мин со скоростью 500-600 об/мин. (п. 5.2 раздела II приложения 2 к настоящим правилам). Если нет центрифуги, закрытая трубка держится в штативе в течение 30 мин до расслоения жидкости. Если есть необходимость, трубка охлаждается под проточной водой.

1.5.7. В трубку вставляется сифон или приспособление для промывки, и длинное отверстие погружается внутрь пока конец трубки не будет на 3 мм выше раздела слоев. Перемывается верхний слой из трубки в емкость для улавливания жирных веществ (п. 6.4 раздела II приложения 2 к настоящим правилам), избегая попадания воды в предварительно добавленные кипятильники (п. 5.10 раздела II приложения 2 к настоящим правилам).

Конец трубки ополаскивается небольшим количеством смеси органических растворителей так, чтобы ополаскивающая жидкость попала внутрь колбы для улавливания жирных веществ.

1.5.9. Приспособление опять разбирается, поднимается и добавляется 5 мл этанола в трубку, этанол применяется для промывки длинного отверстия изнутри, потом перемешивается (п. 1.5.2 данного добавления).

1.5.10. Экстракция повторяется по п. А.1.5.3-А.1.5.8, но используется только 15 мл диэтиловой окиси (п. 4.4 раздела II приложения 2 к настоящим правилам) и 15 мл петролейного эфира (п. 4.5 раздела II приложения 2 к настоящим правилам).

1.5.11. Экстракция проводится 3 раза по пунктам 1.5.3-1.5.8, используется 15 мл диэтилокиси и 15 мл петролейного эфира и промывается внутреннее отверстие приспособления по указаниям на обезжиренном молоке.

OMAIAC174/2006 Внутренний номер: 323463 Varianta în limba de stat	Карточка документа
Республика Молдова
МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПИЩЕВОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ
ПРИКАЗ Nr. 174 от 14.07.2006
об утверждении Ветеринарно-санитарных правил по применению некоторых методов исследования и оценки термически обработанного молока, предназначенного для прямого общественного потребления
Опубликован : 27.04.2007 в Monitorul Oficial Nr. 57-59 статья № : 229
На основе положений ст. 10 Закона о ветеринарной деятельности № 1538-ХII от 23.06.93 г. и в целях гармонизации ветеринарного законодательства Республики Молдова с ветеринарным законодательством Европейского Союза ПРИКАЗЫВАЮ: 1. Утвердить Ветеринарно-санитарные правила по применению некоторых методов исследования и оценки термически обработанного молока, предназначенного для прямого общественного потребления, разработанные в соответствии с требованиями Директивы ЕС 92/608/ЕЕС (прилагается). 2. Управлению ветеринарной медицины, Государственной ветеринарной инспекции, Республиканскому ветеринарно-диагностическому центру, районным и муниципальным ветеринарно-санитарным службам руководствоваться в своей деятельности положениями указанных ветеринарно-санитарных правил. 3. Настоящий приказ вступает в действие со дня опубликования в Официальном мониторе Республики Молдова. 4. Считать утратившим силу приказ Министерства сельского хозяйства и пищевой промышленности № 140 от 31.05.2005 г. об утверждении Ветеринарно-санитарных правил по применению некоторых методов исследования и оценки термически обработанного молока, предназначенного для прямого общественного потребления. 5. Контроль за исполнением настоящего приказа возложить на управление ветеринарной медицины, Государственную ветеринарную инспекцию. Министр сельского хозяйства и пищевой промышленности Анатолие ГОРОДЕНКО № 174. Кишинэу, 14 июля 2006 г. Приложение к приказу Министерства сельского хозяйства и пищевой промышленности № 174 от 14.07.2006 г. Ветеринарно-санитарные ПРАВИЛА по применению некоторых методов исследования и оценки термически обработанного молока, предназначенного для прямого общественного потребления (Директива Совета Европы 92/608 СЕЕ) 1. Основные процедуры для исследования и оценки молока как первичного сырья: - определение сухого вещества; - определение содержания жиров (жирных веществ); - определение содержания сухих обезжиренных веществ; - определение содержания общего азота; - определение содержания белков; - определение объемной массы. 2. Применение основных методов исследования и оценки, установление критериев достоверности, а также отбор проб должны быть осуществлены согласно правилам, установленным в приложении № 1. 3. Методы, указанные в п. 1, описаны в приложении 2. 4. Приложения 1 и 2 являются неотъемлемой частью ветеринарных санитарных правил. Приложение 1 к Ветеринарно-санитарным правилам по применению некоторых методов исследования и оценки термически обработанного молока, предназначенного для прямого общественного потребления РАЗДЕЛ I Общие положения 1. Введение В настоящем приложении даны общие положения в отношении реактивов, оборудования, выражения результатов, точности и отчета об анализе. Компетентные ветеринарные органы и утвержденные лаборатории, ответственные за забор образцов и проверку молока, должны принимать к сведению общие положения. 2. Реактивы 2.1. Вода 2.1.1. В случаях, когда упоминается вода для раствора, разведения или ополаскивания, должна быть использована дистиллированная вода, деионизованная вода либо деминерализованная вода эквивалентной степени очистки. 2.1.2. В случаях, когда сделана ссылка на "раствор" либо "разведение" без дальнейших пояснений, имеется в виду "водный раствор" либо "разведение водой". 2.2. Химикалии Все используемые химикалии должны иметь качество утвержденных аналитических реактивов, если не указано иное. 3. Оборудование 3.1. Список оборудования 3.1.1. Список оборудования, представленный для различных справочных процедур, включает только предметы специального назначения и предметы особой спецификации. 3.2. Аналитические весы Определение "аналитические весы" обозначает весы с делением 0,1 мг. 4. Выражение результатов 4.1. Результаты Если не указано иное, результаты, которые заносятся в аналитический отчет (см. пункт 6), должны представлять собой среднее арифметическое значение, полученное в результате 2 анализов, проведенных с учетом критерия повторяемости (5.1.1), определенного для данного метода. В случае если не выполняется критерий повторяемости, анализ должен быть проведен повторно либо результат должен быть признан недействительным. 4.2. Вычисление процентного содержания Если не указано иное, результат должен вычисляться как процент содержания от общей массы образца. 5. Критерии точности: повторяемость и репродуктивность 5.1. Критерии точности для каждой процедуры определяются следующим образом: 5.1.1. Повторяемость (r) - значение, ниже которого находится абсолютная разница результатов 2 отдельных анализов, полученных по одной и той же процедуре на идентичном материале, при одних и тех же условиях (один и тот же оператор, одно и то же оборудование в одной и той же лаборатории с минимальным промежутком времени). 5.1.2. Репродуктивность (R) - значение, ниже которого находится абсолютная разница результатов 2 отдельных анализов, полученных по одной и той же процедуре на идентичном материале, при разных условиях (разные операторы, разное оборудование в различных лабораториях в различное время). 5.1.3. Если не указано иное, значения критериев повторяемости и репродуктивности, данные в соответствующих статьях каждой процедуры, представляют с точностью 95% интервалы по определению международного стандарта ISO 5725-2, издание 1986 г. 5.1.4. Все необходимые совместные испытания и исследования должны быть спланированы и проведены в соответствии с международным руководством. 6. Отчет об анализе В отчете об анализе должны быть указаны метод анализа и полученные результаты. Кроме того, должны быть указаны подробности, не указанные при описании метода анализа, либо необязательные, а также любые другие обстоятельства, которые могли повлиять на полученный результат. Отчет об анализе должен включать все сведения, необходимые для полной идентификации образца. Раздел II Отбор образцов молока, прошедшего тепловую обработку 1. Цель и область применения Данная процедура определяет базовую процедуру для отбора, транспортировки и хранения образцов молока, прошедшего тепловую обработку. 2. Общее 2.1. Выборочная проверка молока, прошедшего тепловую обработку, должна производиться оператором, прошедшим предварительную подготовку и обладающим достаточными навыками для отбора образцов молока. 2.2. В случае необходимости компетентный ветеринарный орган либо проверяющая лаборатория должны провести инструктаж по технологии выборочных проверок для обслуживающего персонала, осуществляющего отбор образцов с тем, чтобы взятый образец представлял и соответствовал качеству всей партии. 2.3. Если необходимо, компетентный ветеринарный орган или проверяющая лаборатория должны провести инструктаж по маркировке образцов для обслуживающего персонала, осуществляющего отбор образцов, с целью обеспечения тождественности образцов. 3. Оборудование для отбора образцов 3.1. Оборудование для отбора образцов должно быть изготовлено из нержавеющей стали либо другого подходящего материала соответствующей прочности и сконструировано для определенной цели (смешивание, отбор образца т. п.). Плунжеры и мешалки для перемешивания жидкости в контейнерах должны иметь достаточное пространство для обеспечения тщательного перемешивания продукта, что, однако, не должно способствовать появлению прогорклого привкуса молока. Черпак должен иметь сплошную ручку достаточной длины для того, чтобы осуществлять отбор образцов с любой глубины в контейнере. Вместимость ковша должна быть не менее 50 мл. 3.2. Контейнеры и емкости для образцов должны быть изготовлены из стекла, подходящего металла или пластмассы. 3.3. Материалы, из которых изготовлено оборудование для отбора образцов, включая контейнеры и емкости, не должны служить причиной каких-либо изменений в образцах, которые могут повлиять на результаты анализов. Все поверхности оборудования для отбора образцов и контейнеров для хранения образцов должны быть чистыми и сухими, гладкими и без щелей, с закругленными углами. 4. Технология отбора образцов 4.1. Общие правила 4.1.1. Независимо от вида анализов молоко должно быть тщательно перемешано до отбора образцов вручную либо с помощью механических средств. 4.1.2. Отбор образцов должен осуществляться немедленно после перемешивания молока пока молоко еще движется по инерции. 4.1.3. Вместимость используемых контейнеров для хранения образцов должна быть такой, чтобы контейнеры были практически полностью заполнены веществом, взятым на анализ, таким образом, чтобы обеспечивалась необходимая степень перемешивания содержимого перед анализом, но не допускалось сбивание масла при транспортировке. 4.2. Отбор образцов вручную 4.2.1. Отбор образцов из нескольких емкостей (контейнеров) В случае если необходимо провести проверку качества молока из более чем 1 контейнера, необходимо взять показательное количество из каждого контейнера с указанием объема продукта в каждом контейнере. Если нет необходимости в проверке каждого контейнера отдельно, нужно смешать порции образцов в количествах, пропорциональных количеству молока в контейнерах, из которых был взят каждый образец. Отбор образца (образцов) в пропорциональных количествах из контейнеров должен осуществляться после перемешивания. 4.2.2. Отбор образцов из больших емкостей - автомобильных и железнодорожных цистерн, цистерн-хранилищ 4.2.2.1. Перед отбором образцов перемешать молоко соответствующим способом. Перемешивание содержимого больших емкостей, автомобильных и железнодорожных цистерн, цистерн-хранилищ рекомендуется проводить при помощи механических устройств (4.2.5.2). Степень перемешивания зависит от периода времени, в течение которого молоко находилось в состоянии покоя. Эффективность способа перемешивания, примененного в каждом конкретном случае, определяется соответствием целям предписанного анализа; критерий эффективности перемешивания влияет, в частности, на идентичность результатов анализов образцов, взятых из различных частей партии продукта либо из сливного отверстия емкости при разгрузке с некоторыми промежутками. Перемешивание молока можно считать эффективным, если разность содержания жира в двух образцах, взятых при этих условиях, не превышает 0,1%. В большой емкости с выпускным отверстием, расположенным на дне, во время разгрузки может оставаться небольшое количество молока, которое не должно считаться показательным для всей партии, даже после перемешивания. В этой связи желательно осуществлять отбор молока через люки; если отбор образцов осуществляется из выпускного отверстия, необходимо дать молоку стечь. 4.2.2.2. Перемешивание содержимого больших емкостей, автомобильных и железнодорожных цистерн, цистерн-хранилищ должно производиться: a) при помощи механического устройства, встроенного в емкость и приводимого в движение электрическим мотором, b) при помощи мешалки либо гребного винта, приводимого в движение электрическим мотором и размещаемого на люке, с погружением мешалки в молоко, c) для железнодорожных или автомобильных цистерн путем рециркуляции молока через трансфертный шланг, присоединенный к разгрузочным насосам и введенный через люк, d) чистым фильтрованным сжатым воздухом. В этом случае должен быть использован минимальный объем воздуха при минимальном давлении во избежание развития прогорклого вкуса. 4.3. Отбор образцов молока, прошедшего тепловую обработку, предназначенного для непосредственного употребления в розничной упаковке Отбор образцов молока, прошедшего тепловую обработку, предназначенного для непосредственного употребления в розничной упаковке, должен осуществляться из запечатанных полных упаковок. Если возможно, отбор образцов должен производиться из упаковочного устройства либо в холодильном помещении на обрабатывающем предприятии в кратчайшие сроки после переработки. Забор образцов пастеризованного молока должен производиться в день переработки. Отбор образцов молока, прошедшего различные виды тепловой обработки (пастеризованного, стерилизованного и прошедшего обработку при УВТ), должен осуществляться в количествах, необходимых для исследований, которые должны проводиться в соответствии с требованиями, установленными проверяющей лабораторией или иным компетентным органом. 4.4. Идентификация образцов Образец должен маркироваться при помощи идентификационного кода с тем, чтобы его легко было идентифицировать, опираясь на инструкцию, представленную проверяющей лабораторией или иным компетентным органом. 5. Транспортировка и хранение образцов 5.1. В соответствии с требованиями компетентного национального органа инструкции по условиям консервации (химической, температурной), транспортировки, хранения, а также интервалов времени между отбором и анализом молока должны разрабатываться проверяющей лабораторией в зависимости от вида молока и используемой аналитической процедуры. 5.2. Эти инструкции должны предусматривать, что во время транспортировки и хранения должны быть приняты меры по предотвращению загрязнения/заражения содержимого контейнеров, а также воздействия на содержимое прямых солнечных лучей. Если для хранения образцов используется прозрачная емкость, образцы должны храниться в темном месте. Приложение 2 к Ветеринарно-санитарным правилам по применению некоторых методов исследования и оценки термически обработанного молока, предназначенного для прямого общественного потребления РАЗДЕЛ I ОПРЕДЕЛЕНИЕ СУХОГО ВЕЩЕСТВА 1. Метод и его назначение В данной главе описывается методика для обнаружения сухого вещества в молоке. 2. Определение Сухое вещество показывает процентное соотношение массы, которая остается после сушки от общей массы. Описание следует. 3. Принцип Выпаривание воды из пробы происходит в сушильном шкафу при температуре 102 ± 2⁰С. 4. Оборудование и лабораторное стекло Обыкновенный лабораторный материал, в частности: 4.1. Аналитические весы 4.2. Эксикатор, снабженный эффективным дегидратантом (например, гель силиконовый сухой, с гидрометрическим индикатором.) 4.3. Вентилируемый сушильный шкаф с регулируемым термостатом температуры на 102 ± 2⁰С. 4.4. Бюксы с плоским дном высотой 20-25 мм, диаметром 50-75 мм, изготовленные из специального материала, снабженные легко открывающимися крышками. 4.5. Водяная баня. 4.6. Гомогенизатор 5. ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРОБ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ 5.1. Проба молока доводится до температуры 20-25⁰С. Осторожно смешивается для достижения равномерного распределения жировых частиц внутри пробы. Сильно не взбалтывать, чтобы предотвратить образование пены или плохой сметаны. Если слой сметаны удаляется с трудом, молоко постепенно доводится до температуры 35-40⁰С, осторожно помешивается для образования единого сгустка, который прилипает к стенкам сосудов. После этого проба быстро охлаждается до температуры 20-25⁰С. Можно использовать сепаратор для медленного отделения жирных веществ из молока. Результаты считаются некачественными, если проба содержит видимые жидкие жирные вещества или появляются неравномерные белые частицы, которые прилипают к стенкам сосуда. 6. ХОД РАБОТЫ 6.1. Приготовление бюксов Бюксы (4.4) с открытой крышкой нагреваются в сушильном шкафу (4.3) при температуре 102 ± 2⁰С не менее 30 минут. Закрываются крышкой и сразу же помещаются в эксикатор (4.2). Охлаждаются до комнатной температуры (не менее 30 минут), потом взвешиваются с точностью до 0,1 мг. 6.2. Отбор пробы В приготовленный бюкс (6.1) быстро взвешивается 3,5 мг молока из отобранной пробы (5), с точностью до 0,1 мг. 6.3. Определение сухого вещества 6.3.1. Бюксы предварительно высушиваются на водяной бане, выдержав их 30 минут (4.5). 6.3.3. Затем помещаются для охлаждения в эксикатор (4.2) при комнатной температуре (не менее 30 минут) (4.2), потом взвешиваются с точностью до 0,1 мг. 6.3.4. Бюксы вновь помещаются в сушильный шкаф с открытыми крышками на один час. Потом закрываются крышками и вынимаются из сушильного шкафа и оставляются для охлаждения на 30 минут в эксикаторе. Затем взвешиваются с точностью до 0,1 мг. 6.3.5. Процедура повторяется согласно пункту 6.3.4 до тех пор, пока разница массы после двух последующих взвешиваний не превысит 0,5 мг. Записывается меньшая масса. 7. ПОДСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ. 7.1. Подсчет и формула Сухое вещество в процентах от массы вычисляется по следующей формуле: m ₂ - m₀ W_T= _______________ x 100 m ₁ - m₀ W_T- количество сухого вещества в 100 г продукта (в г) m₀- масса бюкса с крышкой, в г (6.1) m₁- масса бюкса с крышкой и сырой пробой, в г (6.2) m₂- масса бюкса с крышкой и высушенной пробой, в г (6.3.5). Значение округляется до 0,01% (процент от массы). 7.2. Точность 7.2.1. Абсолютное расхождение между параллельными определениями (р): 0,10 г от сухого вещества на 100 г продукта. 7.2.2. Воспроизводимость (Р): 0,20 г от сухого вещества на 100 г продукта. РАЗДЕЛ II ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ЖИРОВ 1. Метод и его назначение В данной главе отписывается основной метод определения жировых веществ в цельном, частично обезжиренном и обезжиренном молоке. 2. Определение "Содержание жирных веществ в молоке" - представляет собой все вещества, определяемые методом, который описывается далее, выраженные в процентном соотношении от общей массы. 3. Принцип Вытяжка аммонийно-этиловой смеси из пробы с помощью диэтилового спирта и петролейного эфира с последующим удалением растворителей путем выпаривания или дистиллирования и определением массы экстрагируемых растворимых веществ в петролейном эфире (метод, известный под общим названием Roese-Gotlieb). 4. Реактивы Все реактивы должны быть пригодными для анализа и не должны оставлять существенных следов в контрольной пробе. Их качество проверяется согласно пункту 6.3. Для взвешивания требуется колба, лабораторный стакан или пустой металлический бюкс (5.8), приготовленные заранее как тара согласно пункту 1.4 (чтобы избежать влияния факторов внешней среды на результаты взвешивания). Если общий остаток влияет на объем массы тары больше чем на 2,5 мг, выявляется остаточное вещество растворителя выпариванием 100 мл диэтилового спирта (4.4) и 100 мл петролейного эфира (4.5). Используется также тара для взвешивания. Если остаток больше 2,5 мг, растворитель очищается дистиллированием или заменяется. 4.1. Гидроокись аммония представляет собой приблизительно 25%-ый раствор аммиака. Можно использовать и раствор гидроокиси аммония большей концентрации (пункты 6.5.1 и А 1.5.1). 4.2. Этиловый спирт не менее 94%. Можно использовать денатурированный метанолом этиловый спирт, если есть уверенность, что это не повлияет на окончательный результат. 4.3. Красный-Конго или Красный-Крезол Один грамм Красного-Конго или Красного-Крезола растворяется в 100 мл воды. Примечание. Использование этих растворов, позволяющих лучше видеть границу между контактирующими поверхностями растворителя с водной поверхностью, является дополнительным (6.5.2). Можно использовать и другие водные растворы красителей, если они не влияют на результаты исследований. 4.4. Диэтиловый эфир, не содержащий перекиси с содержанием окислителей менее чем 2 мг/кг, согласно требованиям контрольной пробы (6.3). 4.5. Петролейный эфир с точкой кипения в интервале 30-60⁰С. 4.6. Смесь разбавителей, приготовленная перед применением, состоит из равных объемов диэтилового эфира (4.4) и петролейного эфира (4.5). 5. ОБОРУДОВАНИЕ И ЛАБОРАТОРНАЯ ПОСУДА Учитывая, что при исследованиях используются легко воспламеняющиеся и испаряющиеся реактивы, электрическое оборудование должно соответствовать требованиям законодательства при использовании таких растворителей. Обычный материал, в частности: 5.1. Аналитические весы. 5.2. Центрифуга для колб или пробирок для экстракции (5.6) со скоростью вращения 500-600 оборотов в минуту, позволяющая образовать гравитационное поле 80-90 г на их наружной поверхности. Примечание. Использование центрифуги является дополнительным. 5.3. Прибор для перегонки и испарения растворителей и спиртов из колб и лабораторных стаканчиков и бюксов (6.5.12, 6.5.15) при температуре не более 100⁰С. 5.4. Вентилируемый электрический сушильный шкаф с рабочим режимом температуры 102 ± 2⁰С. Сушильный шкаф должен быть оснащен соответствующим термометром. 5.5. Водяная баня с терморегулятором в режиме 35-40⁰С. 5.6. Колбы для экстракции жирных веществ типа Molonnier. Примечание. Можно использовать трубочки для экстракции жирных веществ, оснащенные сифоном или устройством для промывки. Инструкция по использованию приведена в приложении. Колбы (или трубки) должны быть снабжены пробками из матового стекла или пробками из материала высшего качества, который не портится при контакте с реактивами. Пробки из пробкового дерева нужно ополоснуть в диэтиловом эфире (4.4), выдержать в воде при температуре 60⁰С или больше не менее 15 минут и охлаждать в воде так, чтобы при использовании они были пропитаны водой. 5.7. Штатив для фиксирования колб (или трубочек) для экстракции жирных веществ (5.6). 5.8. Емкость для мытья посуды, соответствующая используемым разбавителям (4.6). Не используются емкости для мытья, изготовленные из пластика. 5.9. Приемник для улавливания жирных веществ, например, колбы для кипячения (колбы с плоским дном) или колбы Erlenmeyer с объемом 125-250 мл или металлические бюксы. Если используются металлические бюксы, они должны быть изготовлены из нержавеющей стали с плоским дном с клювом диаметром 80-100 мм и высотой приблизительно 50 мм. 5.10. Регуляторы кипения (кипелки) обезжиренные из непористого фарфора, кремнистого углерода или стеклянные шарики (металлические бюксы - дополнительно). 5.11. Градуированные цилиндры емкостью на 5 и 25 мл. 5.12. Градуированные пипетки емкостью на 10 мл. 5.13. Металлические щипцы для работы с колбами, лабораторными стаканчиками и бюксами. 6. ХОД РАБОТЫ Другой метод исследования с помощью трубок для экстракции жирного вещества, снабженных сифоном или устройством для мытья, описан в приложении (смотри примечание, пункт 5.6). 6.1. Подготовка пробы к исследованию Пробы для исследования готовятся при температуре приблизительно 35-45⁰С около 15 минут, при необходимости используется водяная баня (5.5). Проба осторожно взбалтывается до получения однородной массы, переворачивается несколько раз, не допуская при этом образования пены или сметаны, и быстро охлаждается до 20⁰С. 6.2. Отбор пробы Проба осторожно взбалтывается (6.1) 3-4-кратным переворачиванием, сразу взвешивается с точностью до 1 мг, затем отбирается 11 г и переносится в экстракционную колбу (5.6). Для проведения исследования отобранная проба переносится в узкую часть колбы для экстракции. 6.3 Контрольная проба Изменение массы приемника для улавливания жирных веществ, контролируемое изменением массы контрольного приемника, не должно превышать 2,5 г. 6.4. Подготовка приемника для улавливания жирных веществ Приемник высушивается (5.9), помещается в него несколько регуляторов кипения (кипелки) (5.10) для того, чтобы обеспечить равномерное испарение растворителей в сушильном шкафу в течение одного часа (5.4). Приемник ставится для охлаждения (не в эксикатор, избегая попадания в него пыли) при комнатной температуре, где проводится взвешивание в течение одного часа, если приемник стеклянный, и не менее 30 минут - если металлический бюкс. С помощью щипцов (чтобы избежать разницы температур) приемник ставится на весы и взвешивается с точностью до 0,1 мг. 6.5. Определение 6.5.1. Добавляется 2 мл раствора гидроокиси аммония (4.1) или эквивалентный объем большей концентрации и тщательно смешивается с пробой, которая находится в узкой части колбы. Затем проводят подсчет. 6.5.2. Добавляется 10 мл этилового спирта (4.2) и осторожно смешивается, обеспечивая перемещение содержимого колбы из одного конца в другой, избегая попадания его в горло колбы. Можно добавить две капли Красного-Конго или Крезола-Красного (4.3). 6.5.3. Добавляется 25 мл диэтилового эфира (4.4). Колба закрывается пробкой из пробкового дерева или пропитанной в воде (5.6), сильно встряхивается, без образования эмульсии, в течение 1 минуты, в горизонтальном положении узкой частью вверх. Временно оставляют жидкость, чтобы она перешла из широкой в узкую часть колбы. При необходимости колба охлаждается проточной водой, затем осторожно снимается пробка или закрывающее приспособление и промывается, в том числе и горлышко колбы небольшим количеством смеси растворителей (4.6), используя емкость для мытья (5.8) таким образом, чтобы промывающий раствор жидкости попал в моющую емкость. 6.5.4. Добавляется 25 мл петролейного эфира (4.5), закрывается пробковой крышкой, пропитанной водой, или другим приспособлением и осторожно встряхивается в течение 30 секунд (6.5.3). 6.5.5. Закрытая колба помещается в центрифугу на 15 минут при вращении 500-600 об/минуту (5.2). Если не используется центрифуга (смотри приложение 5.2), то оставляется в штативе (5.7) не меньше чем на 30 минут до осветления надосадочного слоя и видимого отделения от водного слоя. При необходимости колбу можно охладить проточной водой. 6.5.6. Осторожно снять пробку и ополоснуть пробку и горлышко колбы небольшим количеством растворителя (п.4.8), сливая его вовнутрь колбы. 6.5.7. Аккуратно сливают большую часть растворителя декантацией в приемник для рекуперации жирных веществ (п.6.4), в который добавлено несколько кипятильников (п.5.10). Во время декантации нужно избегать попадания водного слоя в органический экстракт. 6.5.8. Вымывают снаружи горлышко колбы для экстракции небольшим количеством смеси растворителя, добавляя его в приемник для экстрагирования жирных веществ, избегая стекания смеси растворителей по стенкам колбы для экстракции. Растворитель удаляют полностью или частично из приемника перегонкой или испарением согласно описанию п. 6.5.12. 6.5.9. Добавляют 5 мл этанола (п. 4.2) в сосуд для экстракции, ополаскивая внутреннюю поверхность и перемешивая содержимое. 6.5.10. Второе экстрагирование проводят в соответствии с п. 6.5.3 и 6.5.8, используя 15 мл диэтилового эфира (п. 4.5); диэтиловый эфир используют для ополаскивания горлышка колбы для экстракции. 6.5.11. Третье экстрагирование проводят по п. 6.5.3 и 6.5.8, используя 15 мл диэтилового эфира (п. 4.4) и 15 мл петролейного эфира (п. 4.5). Диэтиловый эфир используют для ополаскивания горлышка колбы для экстракции. При анализе обезжиренного молока третье экстрагирование не проводят. 6.5.12. При помощи перегонки или выпаривания удаляются полностью растворители и этанол (п. 5.3). Перед перегонкой горлышко колбы ополаскивается смесью растворителей (п. 4.6) 6.5.13. После исчезновения запаха растворителей нагревают колбу в горизонтальном положении в сушильном шкафу (п. 5.4) в течение 1 ч. Колбу помещают в эксикатор для охлаждения на 30 мин. и взвешивают с точностью до 0,1 мг. 6.5.14. Последующие взвешивания колбы производят после высушивания при тех же режимах до тех пор, пока разница в массе между последовательными взвешиваниями не будет более 0,5 мг. Если при одном из взвешиваний после высушивания обнаружится увеличение массы, для расчетов принимают результаты предыдущего взвешивания. 6.5.15. Для установления, что все экстрагированное вещество является жиром, в колбу для перегонки добавляют 25 мл петролейного эфира. Осторожно нагревают и взбалтывают до полного растворения всех жирных веществ. Если экстрагированные вещества полностью растворяются в петролейном эфире, массой растворяемых веществ будет разница между конечной (финальной) массой с экстрагирующими веществами (п. 6.5.14) и первоначальной массой (п. 6.4.). 6.5.16. При неполном растворении экстрагированного вещества или в сомнительных случаях полностью экстрагируют жир путем нескольких промываний подогретым петролейным эфиром. Нерастворимые вещества осаждают и осторожно декантируют петролейный эфир, не трогая нерастворимые вещества. Эту операцию повторяют три раза, используя петролейный эфир для промывки (ополаскивания) внутренней стороны горлышка колбы. В конце ополаскивают внешнюю сторону приемника смесью растворителей так, чтобы растворитель не стекал на внешнюю поверхность колбы. Удаляют пары петролейного эфира, нагревая колбу (приемника) в сушильном шкафу в течение 1 часа, охлаждают и взвешивают (п. 6.5.13 и 6.5.14). Массой жирных веществ будет разница между массой, определенной п. 6.5.14, и конечной массой. 7. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ 7.1. Расчет и формула Массовую долю в процентах вычисляют (m₁ - m₂)- (m₃ - m₄) F = ______________________ x 100, m ₀ где F - содержание жирных веществ, М_o - масса пробы в граммах (п. 6.2), М₁ - масса приемника для получения жирных веществ в г, определенная согласно п. 6.5.14, М₂ - масса приемника, подготовленного для жирных веществ или, в случае нерастворимых веществ, приемника для получения жирных веществ и нерастворимого остатка, определенного по п. 6.5.16 в г, М₃ - масса (в г) приемника для получения жирного вещества, используемого для контрольной пробы (п.6.3) и экстрагируемого вещества, определяемого в п. 6.5.14, М₄ - масса (г) приемника для жирного вещества (п. 6.4), используемого для контрольной пробы (п. 6.4.3) или, в случае нерастворимости вещества, приемника для получения жирного вещества и нерастворимого остатка, определяемого п. 5.6.16. Результаты определяются с точностью до 1%. 7.2. Точность 7.2.1 Достоверность: - в случае цельного молока и частично обезжиренного (0,02 г) на продукт (пробу); - в случае обезжиренного молока: 0,1 гр. жира на 100 г продукта. 7.2.2 Воспроизводимость: - в случае цельного молока: 0,04 г жира на 100 г продукта; - частично обезжиренного молока: 0,03 г жира на 100 г продукта; - в случае обезжиренного молока: 0,025 г на 100 г продукта. РАЗДЕЛ III ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО КОЛИЧЕСТВА СУХИХ ОБЕЗЖИРЕННЫХ ВЕЩЕСТВ 1. Предмет и область применения В этой главе описывается основной метод определения общего содержания сухих обезжиренных веществ в термически обработанном молоке. 2. Определение и расчет Общее количество сухих обезжиренных веществ выражается в % массы и представляет разницу между общим содержанием сухих веществ (разд. I ) и содержанием жиров (разд. II ). РАЗДЕЛ IV ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО АЗОТА В МОЛОКЕ 1. Предмет и область применения В данной главе описывается основной метод определения количества общего азота в цельном, частично обезжиренном и обезжиренном молоке. 2. Определение Под содержанием общего азота в молоке подразумевается количество азотных веществ, выраженное в процентах массы, определенном по методу "Keildahl" 3. Принцип Часть взвешенного образца (пробы) молока минерализуется концентрированной H2 S04 и сульфатом калия в присутствии медного купороса в качестве катализатора таким образом, чтобы азот органических веществ конвертировался в сульфат аммония. Выделенный аммиак в результате добавления едкого натрия связывается с борной кислотой. Затем этот раствор титруется с кислым раствором. 4. Реактивы 4.1. Сульфат калия (К2S04) 4.2. Раствор сульфатамид. Растворяется 5 г сульфата меди пятиводного (CuSO4 SH 20) в воде и доводится до 100 мл водой (при 20oС) в мерной колбе. 4.3 Серная кислота концентрацией не менее 98% (м/м) Н2S04) 4.4. Раствор гидроокиси натрия 47% (м/м) Na0H/1л (при 30oС). Примечание. Допускается использование гидроокиси натрия меньшей концентрации. Например: 40% (м/м) 572 г на 1 л 20oС или 30% (м/м) 399г на 1 л 20oС 4.5. Раствор борной кислоты. Растворяется 40 г борной кислоты (Н3ВО3) в 1 л теплой воды, охлаждается и хранится в сосудах из боросиликатного стекла. 4.6 Индикатор: растворяется 0,01 г метилового красного, 0,02 г бромэтилового синего и 0,06 г бромкрезалового зеленого в 100 мл этилового спирта. Хранят в посуде из темного стекла в прохладном, а затем темном месте. 4.7. Титрованный раствор С (1/2 Н₂SO₄) или (HCl)=0,05 моль/л титрованный с точностью до 0,0001 моль/л. 4.8. Сахароза, не содержащая азотистых веществ 4.9. Соль аммония химически чистая. Например (NH₄)2C₂SO₄H₂O или сульфат аммония (NH₄)SO₄. 4.10. Триплофан (C₁₁H₁₂N₂O₂), фенацитин (C₁₀H₇CH₂CONH₂) или моно или дихлоргидрат лизина (C₆H₁₄N₂O₂)HCl соответственно (C₆H₁₄N₂O₂)2HCl. Примечание. Степень чистоты реактивов, указанных в п. 4.9 и 4.10, должна быть осч (особой чистоты). Для п. 4.9 желательно использовать проверенные растворы солей аммония. 5. Оборудование и лабораторное стекло Обыкновенные материалы, в частности: 5.1. Колба Кельдаля объемом 500 мл 5.2. Регуляторы кипячения, например стеклянные шарики d=5 мм, гранулы Генгара или фарфоровые кусочки. 5.3. Бюретки или автоматические фарфоровые пипетки на 1 мл 5.4. Градуированные стеклянные цилиндры объемом 50, 100 и 250 мл 5.5. Минерализатор (п. 5.1) в наклонном положении (около 45⁰), оборудованный электрическим устройством для обогрева или регулируемой газовой лампой, таким образом, чтобы содержимое колбы не превышало 1/3 горловины, и устройством для отвода сожженных газов. 5.6. Перегонное устройство из боросиликатного стекла, к которому можно подсоединить колбу Кельдаля (п. 5.1), которое состоит из эффективного устройства для выведения полученной жидкости при первой перегонке, связанное эффективным холодильником с внутренним прямым цилиндром и с отводкой в нижней части: соединяющие части должны быть из неопрена и герметичны. 5.7. Пипетки и автоматические пипетки на 0,1 мл. 5.8. Конические колбы объемом 500 мл с меткой на 200 мл. 5.9. Бюретка градуированная на 50 мл, цена деления 0,1 мл с максимальной погрешностью ± 0,05 мл. 5.10. Лупа для точной читки бюретки (п. 5.9). 5.11. рН - метр. 5.12. Автоматическая бюретка. 6. Ход работы 6.1. В колбу Кельдаля вносят поочередно (п. 5.1) шарики кипячения (п. 5.2) (например три стеклянных шарика), 15 г сульфата калия (п. 4.1), 1.0 мл раствора сульфата меди (п. 4.2), 5 г молока (взвешенного с точностью 0,001 г) и 25 мл серной кислоты (п. 4.3). Кислота используется для промывки остатков растворов сульфата меди, сульфата калия или молока с горлышка колб, после чего ее содержимое смешивается. Примечание: так как органические вещества абсорбируют серную кислоту во время кипячения, желательно при сжигании взять 30 мл, а не 25 мл серной кислоты (п. 4.3), если содержание жиров в молоке выше 5%. Это относится и к контрольной пробе. 6.2. Каждая колба Кельдаля нагревается на приборе для минерализации (п. 5.5), сначала на маленьком огне так, чтобы вся черная пена оставалась в колбе. Если первоначальная пена исчезает, чтобы пропустить сжигаемый избыточный белый газ, смесь доводится до интенсивного кипения (пары кислот будут конденсироваться на половине пути в горле колбы) пока исчезнут совсем черные частицы, а содержимое колбы становится прозрачным, со слабым сине-зеленым оттенком. Кипячение продолжают в течение 1,5 часа. Внимание на следующие замечания: а) период просветления не должен превышать 1 час, а весь период минерализации не должен быть меньше чем 2,5 часа. Если необходимо больше часа для того, чтобы получить просветление, надо увеличить время минерализации вообще; b) сульфат калия ускоряет минерализацию, потому что поднимает температуру кипения. Если остаточный объем серной кислоты в конце минерализации меньше чем 15 мл, существует вероятность потери азота из-за сильного нагрева. В случае использования газа для нагревания берут пластинку из изоляционного материала, которая имеет отверстие определенных размеров, позволяющее пламени нагревать только ту часть колбы, которая покрыта жидкостью в колбе (п. 5.5); с) если во время интенсивного кипячения не все черные частицы вымыты кислотой с горлышка колбы (вымыванию можно способствовать поворачиванием колбы), тогда охлаждается колба и оставшиеся черные частицы вымывают небольшим количеством воды. После этого продолжают минерализацию, как описано выше. 6.3. В охлажденные колбы Кельдаля добавляется по 300 мл воды, так чтобы вымыть все частицы, оставшиеся на стенках колбы. Медленно перемешивают содержимое колбы до полного растворения отделившихся кристаллов. Добавляется несколько кипелок (регуляторы кипения) для равномерного кипения. После этого добавляют в каждую колбу по 70 мл едкого натра (п. 4.4), держа колбу наклонно так, чтобы раствор едкого натра образовал нижний слой в колбе и не протекал по наружной стенке. Примечание. Общий объем воды и едкого натра должен быть 370 мл, чтобы могли собрать около 150 мл дистиллята до поднятия кипелок на поверхности (п. 6.4). Если объем едкого натра с концентрацией менее 47%, то объем воды пропорционально уменьшается. Пример: если добавляется 85 мл раствора 40%-ной или 125 мл раствора 30%-ной концентрации, то объем добавленной воды должен быть соответственно 282 мл и 245 мл. 6.4 Содержимое колбы Кельдаля количественно переносят в отгонную колбу вместимостью 500-1000 мл (п. 5.6). В приемную колбу аппарата для перегонки вместимостью 250 мл доливают 50 мл борной кислоты (4.5) и 0,20 мл (5-6 капель) индикатора (п. 4.6) и опускают конец охладительной трубки так, чтобы он был погружен в кислотный раствор. Перед нагреванием на малом огне во избежание образования избытка пены содержимое колбы осторожно взбалтывают и отгонку продолжают до тех пор, пока стекающий в приемную колбу дистиллят не достигнет объема 100 и 125 мл и не будет иметь нейтральную реакцию на лакмусовую бумажку. По окончании перегонки конец промывают в приемной колбе дистиллированной водой. Внимание: а) скорость перегона должна позволить получить 150 мл дистиллята до появления кипелок, который соответствует общему объему в 200 мл в отгонной колбе. b) эффективность каждого охладителя должен обеспечить температуру в каждой колбе в 25^îС на протяжении перегонки. 6.5. Каждый дистиллят титруется титрованным раствором (п. 4.7) до рН 4,6\xf10,1, для этого используется рН метр и автоматическая бюретка. Для точности титрования добавляется индикатор. Во избежание ошибок в определении объема, используемого для титрования, с точностью до 0,01 мл, пользуются лупой (п. 5.10). 6.6. Ставится контрольная проба согласно пунктам 6.1 - 6.5, при этом вместо пробы молока берется дистиллированная вода с 0,1 г сахарозы (п. 4.8). Примечание: для титрования контрольной пробы используется маленький объем титрованного раствора (п. 4.7). 6.7. Для более точного результата делаются параллельные измерения, соблюдая указания п. 6.1 - 6.5. 6.7.1. При перегонке нужно избежать перегрева для того, чтобы предотвратить потери азота, для этого используют пробу из: 0,15 г (оксалата аммония или сульфата аммония (п. 4.9) с точностью в 0,001 г и 0,1 г сахарозы (п. 4.8). Процент полученного азота должен быть в пределах 99-100%. Если результаты не соответствуют, это свидетельствует о допущении ошибок в процессе анализа. 6.7.2. Проверяется, если при минерализации выведено все количество белкового азота с помощью реактивов: 0,20 г лизин хлоргидрат, 0,5 г фенацетина или 0,2 г соленого лизина. Все вещества должны быть взвешены с точностью до 0,001 г (4.10). Процент полученного азота должен быть больше 98-99% 7. Техника безопасности Во время работы с концентрированной серной кислотой и едким натром и с колбами Кельдаля нужно носить фартук лабораторный, защитные очки и перчатки, устойчивые к кислотам. В процессе перегонки колбы Кельдаля должны быть под постоянным присмотром. Во избежание рисков, если кипячение бурное перегонка прекращается. В случае поломок перегоночного устройства более 2-3 минут опускается накопительная колба таким образом, чтобы конец охладителя вышел из жидкости. 8. Обработка результатов 8.1 Расчет и формула Содержание азота определяется в граммах азота на 100 г продукта согласно формуле: 1,40 (V-V₀) x C N = ______________________, где m где N - количество азота в 100 г продукта (в г), V - объем (в мл) титрованного раствора, используемого на титрование, V₀- объем (в мл) титрованного раствора, используемого на титрование контрольной пробы, С - концентрация (в моль/л) титрованного раствора (п. 4.7), М - масса пробы (в г). Результат вычисления округляется до 0,001 г/100 г. 8.2. Точность 8.2.1. Абсолютное расхождение между параллельными определениями ( ) - 0,007 г на 100 г. 8.2.2. Воспроизводимость (R): 0,015 г на 100 г. 9. Модифицированная методика 9.1. Вместо минерализации в колбах Кельдаля можно использовать печи для сжигания проб (п. 5.5 и 5.1). В этом случае во избежание возможных неполадок отдельно проверяется каждая точка (п. 6.7). 9.2. Вместо прямой перегонки (п. 6.4) можно использовать перегонку с помощью водяного пара. Если эта система не позволяет использовать дистиллированную воду, то эта вода не должна содержать летучие, кислые и щелочные вещества. 9.3. Навеска пробы может быть 1 г молока (полу-макро Кельдаль), вместо 5 г (п. 6.1) при условиях, что: - количество используемых реактивов для минерализации (п. 6.1): серной кислоты, медного купороса, серного калия уменьшить пропорционально (до одной пятой); - длительность минерализации (п. 6.2) уменьшить до 75 минут; - количество едкого натра уменьшить пропорционально (до одной пятой); - уменьшить концентрацию титрованного раствора кислоты (0,02-0,03 моль/л). Примечание: эти изменения могут быть приняты при условии, что воспроизводимость (п. 8.2.1) и точность результатов двух контрольных проб должны соответствовать нормам. РАЗДЕЛ V. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАССОВОЙ ДОЛИ БЕЛКОВЫХ ВЕЩЕСТВ 1. Область применения В данной главе описывается основной метод определения массовой доли белковых веществ в термически обработанном молоке (арт. 3. лит (А) п. 3 из директивы 85/397/СЕЕ). 2. Определение Массовая доля белковых веществ в молоке определяется умножением полученного результата на коэффициент пересчета азота на белковые соединения (в %), определенный по методу, описанному в IV главе (п. 3). 3. Расчет Массовая доля белковых веществ в молоке 6,38 г на массовую долю азота в молоке (в %). РАЗДЕЛ VI. Определение объемной массы 1. Область применения В данной главе описывается основной метод определения объемной массы в сыром, цельном, частично обезжиренном и обезжиренном молоке при 20⁰С. 2. Определение Объемная масса молока - это вес определенного объема молока при 20⁰С относительно данного объема. 3. Принцип Объемный вес при 20⁰С определяется ариометрическим методом. 4. Аппаратура и материалы 4.1 Ареометры для определения плотности молока с градацией от 1,025 до 1, 035 д/мл. Поверку ареометров проводят пикнометрическим методом: используют пикнометр с объемом 100 мл, оснащенный термометром с большой точностью. 4.2. Цилиндры (стеклянные или нержавеющей стали) минимальными размерами: - диаметр цилиндра: ≈ 35 мм: - высота цилиндра: ≈ 225 мм. 4.3. Баня водяная с терморегулятором на 20 ± 0,1С. 4.4. Баня водяная с терморегулятором на 40 ± 2^oС. 4.5. Термометры стеклянные лабораторные с ценой деления 0,5^oС. 5. Проведение измерений 5.1. Колба с пробой гомогенизируется, поворачивая ее для дисперсии жирных веществ. Пробу помещают в водяную баню (п. 4.4) при 40^oС и выдерживают ее еще 5 мин при этой температуре. Содержимое колбы перемешивают для гомогенизации жирных веществ. Потом охлаждается на водяной бане до 20^oС (п. 4.3). 5.2. Проба опять осторожно перемешивается, чтобы избежать проникновения воздуха. Молоко сливают в цилиндр (п. 4.2) в наклонном виде, чтобы избежать образования пены или пузырей. Чистый ареометр опускают медленно в достаточное количество молока, погружая его до тех пор, пока до предполагаемой отметки ареометрической шкалы не останется 3-4 мм, затем оставляют его в свободно плавающем состоянии. Ареометр не должен касаться стенок цилиндра. Цилиндр с ареометром должен быть в вертикальном положении. 5.3. После установления его в неподвижном состоянии отсчет показаний проводят по верхнему краю мениска. 5.4. Сразу после снятия данных ареометра в пробу погружают термометр (п. 4.5) и измеряют температуру с точностью ± 0,5^oС. Температура должна быть 20^oС ± 2^oС. 6. Поправка температуры 6.1. Если проба во время определения плотности имела температуру выше или ниже 20^oС: - если температура выше 20oС прибавляется к полученному результату 0,0002 г каждого градуса Цельсия, - если ниже 20oС то снимается из полученного результата 0,0002 для каждого градуса Цельсия. Эта поправка применяется только тогда, когда температура ± 5^oС от 20^oС. 7. Обработка результатов Объемный вес пробы (в г/мл ) обезжиренного молока при 20^oС вычисляется по формуле: 1000 . mv - MG . mv 0,92 mv(1000-MG) ___________________________ = _____________________ MG . mv 92 mv - MG . mv 1000 - ____________ 0,92 где: mv- объемный вес пробы, определенный ареометром (п. 5.4) (г/л), MG- содержание жирных веществ в пробе (г/л), 0,92- плотность жирных веществ. 8. Точность 8.1. Абсолютное расхождение (р): 0,0003 г/мл. 8.2. Воспроизводимость (Р): 0,0015 г/мл. Добавление к Приложению 2 к Ветеринарно-санитарным правилам по применению некоторых методов исследования и оценки термически обработанного молока, предназначенного для прямого общественного потребления. ДРУГИЕ МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИРА С ПОМОЩЬЮ ТРУБКИ ДЛЯ ЭКСТРАКЦИИ ЖИРНЫХ ВЕЩЕСТВ, ОСНАЩЕННОЙ СИФОНОМ ИЛИ ПРИСПОСОБЛЕНИЕМ ДЛЯ ПРОМЫВКИ 1. Ход работы 1.1. Подготовка проб к анализу. Смотри п. 6.1 раздела II приложения 2 к настоящим правилам 1.2. Отбор проб Смотри п. 6.2 раздела II приложения 2 к настоящим правилам, но применяются трубки для экстракции жирных веществ (п. 5.6 раздела II приложения 2 к настоящим правилам). Пробу нужно помещать на дно трубки для экстракции. 1.3. Холостая проба Смотри п. 6.3 раздела II приложения 2 к настоящим правилам. 1.4. Подготовка колбы для улавливания жирных веществ Смотри п. 6.4. раздела II приложения 2 к настоящим правилам. 1.5. Определение 1.5.1. В трубку с пробой добавляется 2 мл раствора гидроксида аммония (п 4.1 раздела II приложения 2 к настоящим правилам) или такой же объем гидроксида аммония более концентрированный и хорошо перемешивается. Сразу после добавления NH4OH проводятся измерения. 1.5.2. Добавляется 10 мл этилового спирта (п. 4.2) и медленно перемешивается. Можно добавить две капли Красного-Конго или Крезола-Красного (р. 4.3. раздела II приложения 2 к настоящим правилам). 1.5.3. Наливаем 25 мл диэтиловой окиси (п. 4.4. раздела II приложения к 2 настоящим правилам), накрываем трубку пробкой, насыщенной водой (п. 5.6 раздела II приложения 2 к настоящим правилам) и хорошо перемешиваем, но не сильно (чтобы избежать образования стойких эмульсий) повторными вращениями в течение минуты. Если есть необходимость, трубка охлаждается под проточной водой, снимается пробка, ополаскивается горлышко трубки небольшим количеством смеси органического растворителя (п. 4.6 раздела II приложения 2 к настоящим правилам) так, чтобы растворы попали внутрь трубки. 1.5.4. Добавляем 25 мл петролейного эфира (п. 4.5 раздела II приложения 2 к настоящим правилам), закрываем пробкой, насыщенной водой, и осторожно перемешиваем в течение 30 сек (п. 1.5.3.). 1.5.5. Трубку центрифугируют в течение 1-5 мин со скоростью 500-600 об/мин. (п. 5.2 раздела II приложения 2 к настоящим правилам). Если нет центрифуги, закрытая трубка держится в штативе в течение 30 мин до расслоения жидкости. Если есть необходимость, трубка охлаждается под проточной водой. 1.5.6. Снимается пробка и ополаскивается небольшим количеством смеси органических растворителей так, чтобы ополаскивающая жидкость попала внутрь трубки. 1.5.7. В трубку вставляется сифон или приспособление для промывки, и длинное отверстие погружается внутрь пока конец трубки не будет на 3 мм выше раздела слоев. Перемывается верхний слой из трубки в емкость для улавливания жирных веществ (п. 6.4 раздела II приложения 2 к настоящим правилам), избегая попадания воды в предварительно добавленные кипятильники (п. 5.10 раздела II приложения 2 к настоящим правилам). Конец трубки ополаскивается небольшим количеством смеси органических растворителей так, чтобы ополаскивающая жидкость попала внутрь колбы для улавливания жирных веществ. 1.5.8. Приспособление для промывки разбирается и внутренняя длинная часть отверстия промывается маленьким количеством смеси растворителей. Опускается и помещается приспособление для переливания ополаскивающих жидкостей в колбу для улавливания жирных веществ. Растворители выводятся путем перегонки или испарения (п. 6.5.12 раздела II приложения 2 к настоящим правилам). 1.5.9. Приспособление опять разбирается, поднимается и добавляется 5 мл этанола в трубку, этанол применяется для промывки длинного отверстия изнутри, потом перемешивается (п. 1.5.2 данного добавления). 1.5.10. Экстракция повторяется по п. А.1.5.3-А.1.5.8, но используется только 15 мл диэтиловой окиси (п. 4.4 раздела II приложения 2 к настоящим правилам) и 15 мл петролейного эфира (п. 4.5 раздела II приложения 2 к настоящим правилам). Диэтиловая окись используется для промывки длинного отверстия изнутри после проведения первой экстракции во время удаления приспособления из трубки. 1.5.11. Экстракция проводится 3 раза по пунктам 1.5.3-1.5.8, используется 15 мл диэтилокиси и 15 мл петролейного эфира и промывается внутреннее отверстие приспособления по указаниям на обезжиренном молоке. От третьей экстракции можно отказаться. 1.5.12. Дальше необходимо следовать указаниям п. 6.5.12-6.5.16 раздела II приложения 2 к настоящим правилам.