Внутренний номер: 377814
Varianta în limba de stat
Республика Молдова
от 24.09.2018
oб утверждении Ветеринарно-санитарной нормы
о требованиях к здоровью и сертификации животных
при торговле (импорте и экспорте) крупным рогатым
скотом и свиньями
о требованиях к здоровью и сертификации животных
при торговле (импорте и экспорте) крупным рогатым
скотом и свиньями
На основании части (5) статьи 29 Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности (повторное опубликование: Официальный монитор Республики Молдова,
2013 г., № 125-129, ст. 396) Правительство ПОСТАНОВЛЯЕТ:
1. Утвердить Ветеринарно-санитарную норму о требованиях к здоровью и сертификации животных при торговле (импорте и экспорте) крупным рогатым скотом и свиньями согласно приложению.
2. Контроль за исполнением настоящего постановления возложить на Национальное агентство по безопасности пищевых продуктов.
3. Настоящее постановление вступает в силу со дня опубликования.
ПРЕМЬЕР-МИНИСТР Павел ФИЛИП
№ 913. Кишинэу, 24 сентября 2018 г.
2. Настоящая Норма не затрагивает норм, которые применяются постоянно к декоративным домашним животным, если они не влияют на устранение ветеринарно-санитарных проверок на границе.
3. Требования к здоровью животных, указанные в пункте 2 настоящей Нормы, подлежащие соблюдению, установлены в следующих нормативных актах:
1) Ветеринарно-санитарная норма о здоровье животных при импорте репродуктивного материала крупного рогатого скота, которая частично перелагает Директиву Совета № 88/407/ЕЕС от 14 июня 1988 г., устанавливающую требования, применяемые к торговле внутри Сообщества и импорту репродуктивного материала крупного рогатого скота (JO L194, 22 июля 1988 г., стр. 10), с последним изменением, внесенным Решением Комиссии о внедрении № 2011/629/ЕС от 20 сентября 2011 года (JO L 247, 24 сентября 2011 г., стр. 2), утвержденная Постановлением Правительства № 1297/2016 об утверждении Ветеринарно-санитарных норм о здоровье животных при импорте репродуктивного материала;
2) Ветеринарно-санитарная норма о здоровье животных при импорте репродуктивного материала свиней, которая частично излагает Директиву Совета от 26 июня
1990 года, устанавливающую требования о состоянии здоровья, применимые к торговле внутри Сообщества и импорту репродуктивного материала домашних свиней (90/429/EEC) (JO L 224, 18 августа 1990 г., стр. 62), с последними изменениями, внесенными Регламентом по применению (ЕС) № 176/2012 Комиссии от 1 марта
2012 г. (JO L 61, стр. 1 от 2 марта 2012 г.), утвержденная Постановлением Правительства № 1297/2016 об утверждении Ветеринарно-санитарных норм о здоровье животных при импорте репродуктивного материала;
3) Постановление Правительства № 189/2014 об утверждении Ветеринарно-санитарной нормы о состоянии здоровья животных при импорте и транзите определенных живых копытных животных, приведенное в соответствие с Директивой № 2004/68/ЕС Совета от 26 апреля 2004 г., устанавливающей нормы здоровья животных при импорте и транзите через Сообщество некоторых видов живых копытных животных, которая вносит изменения в Директивы 90/426/ЕЕС и 92/65/ЕЕС и отменяет
Директиву 72/462/ЕЕС.
4. В целях настоящей Нормы применяются следующие понятия:
поголовье – животное или группа животных, содержащихся на одном объекте, которая считается эпидемиологической единицей, а в случае если на одном объекте содержится несколько поголовий, они должны составлять отдельную единицу, с одинаковым статусом здоровья животных;
животное для убоя – животное вида крупного рогатого скота (включая виды Bison bison и Bubalus bubalus) или вида свиней, прямо или косвенно перевозимое через заготовительный центр или убойное предприятие;
животное для выращивания или для производства – животное вида крупного рогатого скота (включая виды Bison bison и Bubalus bubalus) и вида свиней, главным образом, предназначенные для выращивания, производства молока или мяса либо работы, для участия в конкурсах и выставках, за исключением животных, участвующих в культурных и спортивных мероприятиях;
болезни, подлежащие обязательному уведомлению – болезни, подлежащие обязательному уведомлению, указанные в настоящей Норме, перечисленные в подпункте 1) пункта 18 настоящей Нормы.
6. Животные вида крупного рогатого скота и свиней должны:
1) подвергаться официально проверке по идентификации и клиническому осмотру ветеринарным врачом за 24 часа до отправки, а осмотр должен показать отсутствие любого клинического признака болезни;
2) не приниматься на объект или территорию, на которую наложены запрет или ограничение в отношении данного вида;
3) идентифицироваться согласно положениям части 3 главы I Положения о процедурах и документах, касающихся Системы идентификации и прослеживаемости животных, утвержденного Постановлением Правительства № 507/2012 об утверждении норм по идентификации и прослеживаемости животных;
4) не быть животными для убоя и не подвергаться ограничениям на здоровье животных в рамках программы по искоренению заразных или инфекционных болезней;
5) после выбытия с объекта происхождения и до прибытия в место назначения на территории страны не вступать в контакт с другими парнокопытными животными, не имеющими такого же статуса здоровья животных;
6) отправляться транспортными средствами, которые соответствуют требованиям приложения № 1 к Ветеринарно-санитарной норме о защите и благополучии животных во время перевозки, утвержденной Постановлением Правительства № 793/2012;
7) отправляться с объектов с помещениями, где проводится уборка и дезинфекция;
8) сопровождаться во время перевозки к своему месту назначения ветеринарно-санитарным сертификатом – сертификатом о состоянии здоровья животных, оформленным в соответствии с образцами, приведенным в приложении № 5 к настоящей Норме.
7. Ветеринарно-санитарный сертификат, образец которого прилагается к настоящей Норме:
1) должен содержать один лист или, в случае когда необходимо несколько страниц, они должны размещаться таким образом, чтобы каждая пара или группа страниц входила в неделимое целое, и серийный номер;
2) должен составляться в день проведения ветеринарно-санитарной проверки, по меньшей мере на одном из официальных языков страны назначения, или иметь его удостоверенный перевод;
3) быть действительным в течение 10 дней со дня проверки здоровья животных.
8. Проверки здоровья животных для выдачи сертификата о состоянии здоровья (включая дополнительные гарантии) на партию животных могут проводиться на объекте происхождения или в заготовительном центре.
Ветеринарно-санитарный сертификат составляется официальным ветеринарным врачом в результате инспекций, визитов и проверок, предусмотренных настоящей Нормой.
9. Для животных, поступающих из заготовительных центров, авторизованных согласно статье 18 Закона 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности, с внесением разрешительного документа в перечень разрешительных документов, установленный Законом № 160/20011 о регулировании предпринимательской деятельности путем разрешения, ветеринарно-санитарный сертификат составляется согласно образцам, приведенным в настоящей Норме:
1) на основе необходимых сведений, предусмотренных образцом ветеринарно-санитарного сертификата, представленных официальным ветеринарным врачом, ответственным за объект происхождения; или
2) на основе ветеринарно-санитарного сертификата, заполненного официальным ветеринарным врачом, ответственным за объект происхождения.
10. В случае когда была введена система электронного сетевого контроля для животных, которые происходят с объекта, включенного в указанную систему, ветеринарно-санитарный сертификат составляется:
1) на основе информации из системы, заполняемой уполномоченным ветеринарным врачом, ответственным за объект происхождения, предусмотренной в части 4 главы II Положения о процедурах и документах, касающихся Системы идентификации и прослеживаемости животных, утвержденного Постановлением Правительства № 507/2012;
2) на основе типового ветеринарно-санитарного сертификата, заполненного, по необходимости, с соблюдением требований, касающихся здоровья и благополучия животных.
11. Официальный ветеринарный врач, ответственный за заготовительный центр:
1) проводит все необходимые проверки животных сразу же после их прибытия;
2) заполняет ветеринарно-санитарный сертификат согласно образцу, установленному в приложении № 5 к настоящей Норме;
3) обеспечивает регистрацию животных в системе ANIMO в день выдачи ветеринарно-санитарного сертификата.
12. Допускается прохождение через заготовительный центр, расположенный на территории другой страны, животных, сопровождаемых ветеринарно-санитарным сертификатом, заполненным официальным ответственным ветеринарным врачом страны происхождения животных, с предварительным уведомлением через информационную систему TRACES не менее чем за 24 часа до запланированной операции.
Официальный ветеринарный врач, ответственный за заготовительный центр, выдает второй сертификат или удостоверенную копию, аналогичную ветеринарно-санитарному сертификату, где указан серийный номер оригинала сертификата, и который прилагается им к оригиналу сертификата без изменения срока действия.
1) оставаться на одном объекте в течение 30 дней перед отправкой или после рождения, если они моложе 30 дней, на объекте происхождения. Официальный ветеринарный врач должен на основе идентификации и официальных документов быть уверен, что животные соответствовали этому условию и что, кроме этого, они происходят из одной страны или были ввезены из одной страны;
2) в случае животных, которые проходят через авторизованный заготовительный центр, расположенный в стране происхождения, срок заготовки соответствующих животных вне объекта происхождения не должен превышать шести дней:
a) животные, ввезенные из страны, которая не является их конечной страной назначения, должны быть отправлены на территорию страны назначения в кратчайший срок на основании ветеринарно-санитарного сертификата;
b) в случае импортных животных, при их прибытии в место назначения и перед любым другим перемещением, должны выполнятся требования настоящей Нормы и, в частности, обязанность пребывания, предусмотренная в подпункте 1) настоящего пункта, а животные не могут вводиться в поголовье до того, как ветеринарный врач, ответственный за данный объект, убедится, что данные животные не способны создать угрозу состоянию здоровья объекта;
3) в случае введения животного на объект ни одно животное с данного объекта нельзя продавать в течение 30 дней после его введения, за исключением случая, когда импортное животное полностью изолировано от остальных животных объекта.
14. Помимо общих требований, указанных в главе II настоящей Нормы, животные для выращивания и производства вида крупного рогатого скота должны:
1) происходить из поголовья крупного рогатого скота, официально свободного от туберкулеза, и, в случае животных старше 6 недель, показать отрицательные результаты на кожную туберкулиновую пробу, проведенную в течение 30 дней до выбытия из поголовья происхождения, за исключением внутрикожной туберкулиновой пробы в случае, когда животные происходят из страны или части территории страны, признанной официально свободной от туберкулеза, или из страны, которая входит в признанную сеть контроля;
2) в случае некастрированных животных, которые происходят из объекта крупного рогатого скота, официально свободного от бруцеллеза, и их возраст составляет более 12 месяцев, показать титр Brucella менее 30 международных агглютинирующих единиц на миллилитр при реакции сероагглютинации или на любую международно признанную пробу, проведенную в течение 30 дней, предшествующих выбытию из поголовья происхождения, и, согласно положениям, предусмотренным в приложении № 3 к настоящей Норме, за исключением сероагглютинации или любой пробы в случае, когда животные происходят из страны или из части территории этой страны, официально признанной свободной от бруцеллеза или входящей в признанную сеть контроля;
3) происходить из объекта, официально свободного от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, и, в случае животных старше 12 месяцев, давать отрицательную реакцию на индивидуальную пробу, проведенную в течение 30 дней, предшествующих выбытию из поголовья происхождения, согласно положениям, указанным в приложении № 4 к настоящей Норме, за исключением указанной в настоящем подпункте пробы в случае, когда животные происходят из страны или из части территории этой страны, официально признанной свободной от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота или входящей в признанную сеть контроля;
4) ни разу после их выбытия с объекта происхождения и до прибытия в место назначения на территории страны не вступать в контакт с животными, которые соответствуют только требованиям пункта 15 настоящей Нормы;
15. Помимо общих требований, указанных в главе II настоящей Нормы, животные для убоя вида крупного рогатого скота должны происходить из поголовья, официально свободного от туберкулеза или энзоотического лейкоза крупного рогатого скота и, в случае некастрированного крупного рогатого скота, происходить из поголовья, официально свободного от бруцеллеза.
16. Публичное учреждение «Республиканский ветеринарно-диагностический центр» в качестве национальной референтной лаборатории в области ветеринарии и безопасности пищевых продуктов, административно и технически подведомственной Национальному агентству по безопасности пищевых продуктов, назначенной в соответствии с положениями Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности, координирует стандарты и методы диагностики, указанные в настоящей Норме, внедряет и обновляет их перечни, обнародует их.
17. Животные для убоя, которые по прибытии в страну назначения между прибытием в заготовительный центр и прибытием на убойное предприятие не должны вступать в контакт с парнокопытными животными, кроме тех, которые отвечают условиям настоящей Нормы, и отправляются:
1) на убойное предприятие – должны быть подвергнуты убою в кратчайший срок или не более чем через 72 часа после прибытия;
2) в заготовительный центр – должны быть отправлены после покупки на убойное предприятие и подвергнуты убою в кратчайший срок, через три дня после их прибытия в заготовительный центр.
18. Компетентный ветеринарно-санитарный орган:
1) обеспечивает, чтобы любое подозрение на наличие болезни, указанной в настоящем подпункте, подлежало немедленному обязательному уведомлению в следующем порядке:
a) болезни крупного рогатого скота: ящур, бешенство, туберкулез, бруцеллез, контагиозная плевропневмония крупного рогатого скота, энзоотический лейкоз крупного рогатого скота, сибирская язва;
b) болезни свиней: бешенство, бруцеллез, классическая чума свиней, африканская чума свиней, ящур, везикулярная болезнь свиней, сибирская язва;
2) ежегодно передает международным организациям, в которые он входит, подробный итоговый отчет о случаях болезней, предусмотренных в пунктах а) и b) 18 настоящего пункта, или любой другой болезни, подлежащей дополнительным гарантиям, а также подробный итоговый отчет о проводимых программах контроля или искоренения.
19. В случае, когда Национальное агентство по безопасности пищевых продуктов располагает обязательной национальной Программой по борьбе с заразными болезнями (болезнь Ауески, ринотрахеит крупного рогатого скота, инфекция Brucella suis, трансмиссивный гастроэнтерит) для всей территории страны или для ее части и представляет ее в международные организации, в которые входит, с указыванием, в частности:
a) состояния болезни на своей территории;
b) обоснования программы, с учетом важности болезни и ожидаемых от программы преимуществ в соотношении с ее стоимостью;
c) географической территории, на которой будет применяться программа;
d) различных статусов, применяемых к объектам, и стандартов, которые должны соблюдаться в каждой категории, а также процедур исследования;
e) процедур контроля этой программы, результаты которых должны передаваться международным организациям, в которые оно входит, не реже одного раза в год;
f) последствия потери статуса объекта по причине здоровья животных;
g) мер, которые должны быть приняты в случае положительных результатов, установленных во время проверок, проведенных согласно положениям программы.
В случае внешней торговли программы, указанные в настоящем пункте, дополнительные гарантии, общие или ограниченные, должны быть эквивалентны тем, которые применяются на национальном уровне.
Компетентный ветеринарно-санитарный орган утверждает и сообщает международным организациям, в которые он входит (МЭБ), изменения и дополнения к ранее разработанным программам.
20. В случае, когда страна считается полностью или частично свободной от одной из болезней, перечисленных в пункте 19 настоящей Нормы, представляет доказательства международным организациям, в которые входят, в частности:
a) природа болезни и история ее возникновения на своей территории;
b) результаты контрольных проб, основанных на серологическом, микробиологическом, патологическом или эпидемиологическом исследовании, и на том, что речь идет о болезни, подлежащей обязательному уведомлению;
c) продолжительность проведенной проверки;
d) возможный период времени, в течение которого была запрещена вакцинация от болезни, и географическая территория, где применялся данный запрет;
e) правила, позволяющие контролировать отсутствие болезни.
Доказательства, указанные в настоящем пункте, дополнительные, общие или ограниченные гарантии применяются и в случае внешней торговли;
f) доказательства, касающиеся болезни, в частности любого нового возникновения болезни, и необходимые изменения и дополнения, в зависимости от ранее сообщенной информации.
22. Заготовительные центры должны:
1) находиться под контролем официального ветеринарного врача, который обеспечивает, в частности, соблюдение положений, указанных в подпунктах e)-f) пункта 6 настоящей Нормы;
2) находиться на территории, на которую не наложен запрет или ограничение по причине состояния здоровья и благополучия животных;
3) подвергаться предварительной уборке и дезинфекции перед каждым использованием согласно указаниям официального ветеринарного врача;
4) в зависимости от возможности размещения иметь:
a) оснащение, предназначенное исключительно для этой цели;
b) установки для погрузки и выгрузки животных, их соответствующего размещения, поения и кормления, для проведения любого необходимого лечения; эти установки должны легко чиститься и дезинфицироваться;
с) инфраструктуру для осмотра;
d) инфраструктуру для изоляции;
e) оборудование для чистки и дезинфекции помещений и грузовиков;
f) площадку для складирования кормов, подстилок и навоза;
g) систему сбора сточных вод;
h) кабинет или специальное помещение для официального ветеринарного врача;
5) допускать только идентифицированных животных, происходящих из поголовий, официально свободных от туберкулеза, бруцеллеза и лейкоза, животных для убоя, которые соответствуют условиям, установленным в настоящей Норме и, в частности, предусмотренным в пункте 13 настоящей Нормы, при условии, что владелец или ответственный работник центра проверяет или назначает проверку идентификационных марок животных и документов о состоянии здоровья или других сопроводительных документов, свойственных данным видам или категориям;
6) соблюдать положения Постановления Правительства № 793/2012 об утверждении Ветеринарно-санитарной нормы о защите и благополучии животных во время перевозки;
7) подвергаться регулярным проверкам для подтверждения дальнейшего соответствия условиям авторизации согласно положениям Закона 131/2012 о государственном контроле предпринимательской деятельности.
23. Владелец или ответственное лицо заготовительного центра на основании сопроводительного документа либо идентификационных номеров или марок животных вносит в журнал или на электронный носитель и хранит в течение не менее трех лет следующую информацию:
а) имя владельца, происхождение, дату завоза и вывоза, идентификационный номер крупного рогатого скота, регистрационный номер объекта происхождения или поголовья происхождения свиней, завезенных в центр, и предлагаемое назначение;
b) регистрационный номер перевозчика и номер ветеринарно-санитарного разрешения на деятельность грузового транспорта, которым осуществляется погрузка или разгрузка животных в центре, выданного компетентным ветеринарно-санитарным органом в соответствии с положениями Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности.
24. Компетентный ветеринарно-санитарный орган:
1) присваивает номер авторизации каждому заготовительному центру, который может быть ограничен определенным видом, животными для выращивания или производства, либо животными, предназначенными для убоя;
2) составляет и поддерживает в обновленном виде перечень заготовительных центров и номеров их авторизации и предоставляет его общественности;
3) приостанавливает или изымает авторизацию в случае несоблюдения настоящей Нормы, Постановления Правительства № 793/ 2012 об утверждении Ветеринарно-санитарной нормы о защите и благополучии животных во время перевозки, а также других правил, связанных с состоянием здоровья и благополучием животных при импорте крупного рогатого скота и свиней, на основании Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности, Закона № 113/2012 об установлении общих принципов и предписаний законодательства о безопасности пищевых продуктов, Закона № 50/2013 об официальном контроле с целью проверки соответствия кормовому и пищевому законодательству и правилам, касающимся здоровья и благополучия животных, Закона № 131/2012 о государственном контроле предпринимательской деятельности, Закона № 235/2006 об основных принципах регулирования предпринимательской деятельности;
4) повторно выдает авторизацию в случае полного соблюдения заготовительным центром всех положений, указанных в настоящей Норме;
5) проверяет наличие в заготовительных центрах официальных ветеринарных врачей для выполнения всех возложенных на них задач.
25. Перевозчики животных должны соблюдать следующие дополнительные условия:
1) использовать транспортные средства, которые:
a) построены таким образом, чтобы фекалии животных, подстилка или корм не вытекали или выпадали из транспортного средства; и
b) подвергались чистке и дезинфекции сразу же после каждой перевозки животных или любой продукции, способной отрицательно повлиять на здоровье животных, используя дезинфицирующие средства, зарегистрированные в соответствии с положениями статей 37-3712 Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности;
2) иметь установки по чистке и дезинфекции, в том числе условия для хранения подстилки или навоза;
3) предъявлять документы, подтверждающие проведение этих операций третьей стороной;
4) обеспечить наличие у каждого транспортного средства, используемого для перевозки животных, журнала, содержащего, по меньшей мере, следующие сведения, которые хранятся не менее трех лет:
a) место, дата и время загрузки, фамилия или наименование и адрес объекта или заготовительного центра, откуда загружаются животные;
b) место, дата и время отправки, фамилия или наименование и адрес получателя (получателей);
c) виды и количество перевозимых животных;
d) дата и место проведения дезинфекции;
e) подробности сопроводительных документов, включая номер;
f) прогнозируемая продолжительность перевозки;
5) обеспечивать, чтобы после вывоза с объектов или заготовительного центра происхождения и до прибытия в место назначения партия или животные ни разу не вступали в контакт с животными с более неблагополучным состоянием здоровья.
Компетентный орган проверяет соблюдение перевозчиками положений настоящего пункта по сопутствующей документации, которая должна сопровождать животных.
Положения настоящего пункта не применяются к лицам, которые перевозят животных на расстояние максимум 65 км от места вывоза до места назначения.
В случае несоблюдения настоящего пункта положения о нарушениях и уведомления о нарушениях, связанных с состоянием здоровья животных, применяются положения Ветеринарно-санитарной нормы о защите и благополучии животных во время перевозки, утвержденной Постановлением Правительства № 793/2012.
26. Все предприниматели продовольственного сектора должны регистрироваться и утверждаться, получить номер авторизации и вести торговлю только животными, идентифицированными как происходящие из поголовья, официально свободного от туберкулеза, бруцеллеза и лейкоза, или животными для убоя, которые соответствуют условиям, в частности, предусмотренным в пункте 15 настоящей Нормы, обеспечивая правильную идентификацию животных и их сопровождение документами о состоянии здоровья для данных видов.
27. Разрешаются операции с идентифицированными животными, которые не соответствуют условиям, предусмотренным в пункте 26 настоящей Нормы, при условии, что они сразу отправляются на убойное предприятие, без прохождения через их установки, для скорейшего убоя, во избежание любого распространения болезни, обеспечивая, чтобы эти животные не вступали в контакт с другими животными и подвергались убою отдельно от других животных под контролем официального ветеринарного врача.
28. Оператор продовольственного сектора:
1) должен, на основе сопроводительного документа животных или на основе идентификационных номеров или знаков животных, вносить в журнал или на электронный носитель и хранить в течение не менее трех лет следующую информацию:
a) фамилия владельца, происхождение, дата покупки, категории, количество и идентификация животных вида крупного рогатого скота или регистрационный номер объекта происхождения или поголовья свиней купленных свиней;
b) регистрационный номер перевозчика и/или номер ветеринарно-санитарного разрешения на право деятельности грузового транспорта, который привозит и загружает животных, выданного компетентным ветеринарно-санитарным органом в соответствии с положениями Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности;
c) номер и адрес покупателя и назначение животных;
d) серийный номер сертификатов о состоянии здоровья животных;
2) в случае содержания животных на своих установках должен убедиться, что:
a) персонал, который занимается животными, подготовлен к применению требований настоящей Нормы и обеспечению ухода за животными и их благополучия;
b) официальный ветеринарный врач регулярно проводит проверки и, при необходимости, пробы у животных, и обеспечивает принятие всех необходимых мер во избежание распространения болезни.
29. В соответствии с положениями Закона №221/2007 о ветеринарно- санитарной деятельности, каждая установка, используемая оператором продовольственного сектора, регистрируется и имеет номер ветеринарно-санитарного разрешения на право деятельности, выданного компетентным ветеринарно-санитарным органом при следующих условиях:
1) находится под контролем официального ветеринарного врача;
2) находится на территории, на которую не наложен запрет или ограничение из-за состояния здоровья и безопасности животных;
3) имеет возможность размещения количества животных данного вида согласно физиологическим потребностям, в частности, инфраструктуру по проверке и инфраструктуры по изоляции, способные изолировать всех животных в случае возникновения заразного заболевания;
4) имеет установки для разгрузки животных для соответствующих видов и для размещения, возможности для поения, кормления и проведения любого необходимого лечения; эти установки должны легко чиститься и дезинфицироваться;
5) имеет достаточную площадь для приема соломенных подстилок и навоза;
6) имеет систему сбора сточных вод;
7) подвергается предварительной уборке и дезинфекции перед каждым использованием согласно указаниям официального ветеринарного врача.
30. В случае несоблюдения положений настоящей Нормы на авторизованном объекте незамедлительно принимается решение о приостановлении импорта в соответствии с положениями Закона № 221/ 2007 о ветеринарно-санитарной деятельности, Закона № 113/2012 об установлении общих принципов и предписаний законодательства о безопасности пищевых продуктов, Закона № 50/2013 об официальном контроле с целью проверки соответствия кормовому и пищевому законодательству и правилам, касающимся здоровья и благополучия животных, Закона № 131/2012 о государственном контроле предпринимательской деятельности, Закона № 235/2006 об основных принципах регулирования предпринимательской деятельности.
Авторизация может быть восстановлена в случае представления оператором продовольственного сектора доказательств, что он соответствует положениям настоящей Нормы.
31. Компетентный орган:
a) проводит в соответствии с положениями Закона № 131/2012 о государственном контроле предпринимательской деятельности периодические проверки на предмет соблюдения требований настоящей главы;
b) составляет и поддерживает в обновленном виде перечень авторизованных операторов продовольственного сектора и зарегистрированных помещений, используемых ими в связи со своей деятельностью, а также номеров авторизации, присвоенных предпринимателям продовольственного сектора, и предоставляет его общественности.
1) поголовья животных;
2) владельца объекта или любого физического или юридического лица, на которого возложена эта обязанность;
3) уполномоченного ветеринарного врача или официального ветеринарного врача, ответственного за объект;
4) официальной ветеринарной службы страны;
5) официальных ветеринарно-диагностических лабораторий или любой назначенной лаборатории;
6) электронной базы данных.
Официальные ветеринарные врачи убойных предприятий и заготовительных центров являются участниками сетевой системы.
33. Основными задачами системы сетевого контроля являются:
1) официальная квалификация объектов;
2) поддержание этой квалификации посредством периодических проверок;
3) сбор эпидемиологических данных и контроль за болезнями для гарантирования соблюдения всех положений настоящей Нормы или любой другой уместной нормы в области здоровья животных.
Сетевая система надзора, внедренная на территории страны, является обязательной на всех объектах или, первоначально, только на объектах, включенных в пилотный проект.
Компетентный ветеринарно-санитарный орган устанавливает обязанности и права, которым должны соответствовать уполномоченные ветеринарные врачи, лицо, ответственное за объект, или его владелец, и любой другой участник системы, в том числе лицо, ответственное за выдачу сертификата о состоянии здоровья.
1) обеспечил услуги уполномоченного ветеринарного врача по контракту или по юридическому документу;
2) незамедлительно вызывал уполномоченного ветеринарного врача, отвечающего за объект, в момент возникновения подозрения на заразную болезнь или болезнь, подлежащую немедленному уведомлению;
3) информировал уполномоченного ветеринарного врача о любом ввозе животных на свой объект;
4) изолировал животных перед ввозом на свой объект, чтобы позволить уполномоченному ветеринарному врачу проверить, с помощью лабораторных проб, сохраняется ли статус объекта.
1) отвечать необходимым условиям для занятия своей профессией ветеринарного врача;
2) не иметь никакой финансово заинтересованной или семейной связи с владельцем объекта или работником, ответственным за объект;
3) обладать специфическими знаниями в области здоровья животных, применяемыми к животным данного вида, что предполагает необходимость:
a) регулярно совершенствовать свои знания в области здоровья животных;
b) соответствовать условиям нормального функционирования сети;
c) информировать и помогать владельцу объекта или работнику, ответственному за объект, для принятия всех необходимых мер по сохранению статуса объекта, в частности, на основе программ, принятых по согласованию с компетентным органом;
d) следить за соблюдением положений, касающихся: идентификации и сертификата о состоянии здоровья для животных поголовья, ввозимых и продаваемых животных; обязанности заявлять об инфекционных болезнях и любом другом факторе риска для здоровья и благополучия животных и для здоровья человека; устанавливать, по мере возможности, причину смертности животных и место, куда они должны быть отправлены; условия гигиены поголовья и объектов производства животноводческой продукции.
36. Для обеспечения нормального функционирования системы компетентный орган сокращает ответственность ветеринарных врачей до ограниченного количества объектов или до определенной географической площади.
Компетентный орган устанавливает списки уполномоченных ветеринарных врачей и авторизованных объектов, участвующих в сети.
В случае, когда компетентный орган считает, что один из участников сети больше не отвечает условиям, предусмотренным в настоящей Норме, он приостанавливает или изымает авторизацию согласно положениям статьи 17 Закона № 235/2007 об основных принципах регулирования предпринимательской деятельности без ущерба для любой другой возможной применимой санкции.
1) код или единые идентификационные коды, установленные Постановлением Правительства № 507/2012 об утверждении норм по идентификации и прослеживаемости животных;
2) дату рождения;
3) пол;
4) породу или цвет кожи;
5) идентификационный код матери или, в случае животного, ввозимого из других стран, единый идентификационный код индивидуального идентификационного средства, присвоенный животному страной назначения в соответствии с положениями Постановления Правительства № 507/2012 об утверждении норм по идентификации и прослеживаемости животных;
6) идентификационный номер объекта, на котором оно родилось;
7) идентификационные номера всех объектов, на которых содержалось животное, и даты каждого перемещения;
8) дату смерти или убоя;
9) вид электронного идентификационного устройства, если к животному применялось такое устройство.
38. Для каждого объекта электронная база данных должна содержать:
a) идентификационный номер, состоящий, помимо кода страны, из кода максимум в 12 символов;
b) фамилию и адрес владельца.
39. База данных должна позволять доступ, в любой момент, к следующей информации:
1) идентификационный номер всех животных вида крупного рогатого скота, имеющихся на объекте, или, в случае групп животных вида свиней – регистрационный номер объекта происхождения или поголовья происхождения и, при необходимости, номер сертификата о состоянии здоровья;
2) перечень всех перемещений каждого животного вида крупного рогатого скота с объекта рождения или для животных, ввозимых из других стран, с объекта вывоза и, для групп животных вида свиней – регистрационный номер последнего объекта или последнего поголовья, а также для животных, ввозимых из других стран, объект вывоза.
Эта информация хранится в базе данных в течение трех лет подряд после смерти животного вида крупного рогатого скота или после регистрации в случае, когда проводится регистрация животных вида свиней.
Положения настоящего пункта и пункта 38 применяются к свиньям.
40. Все остальные участники сети, кроме указанных в пунктах 34-36 настоящей Нормы, осуществляют деятельность под ответственностью компетентного органа, который отвечает за практическую реализацию сети и проводит регулярные проверки сети для обеспечения ее нормального функционирования.
41. При введении в действие системы сетевого оперативного контроля компетентный орган запрашивает помощь международных экспертов для утверждения сетевой системы, в том числе путем аудита, и, в случае установления несоответствий, разрабатывает и вводит в действие план исправительных мер в целях признания/приостановления системы контроля.
42. Компетентный орган страны назначения:
1) незамедлительно информирует компетентный орган страны происхождения в случае установления любого несоответствия в виде нарушения настоящей Нормы.
2) оказывает взаимную поддержку при применении положений настоящей Нормы;
3) применяет адекватные специфические меры по наказанию любого преступления за нарушение положений настоящей Нормы, независимо от того, совершено ли оно физическим или юридическим лицом;
4) в случае подтверждения, что положения настоящей Нормы не соблюдаются или не соблюдались, принимает адекватные меры как по охране здоровья животных, так и по предотвращению распространения болезни, которые состоят в:
a) прекращении перевозки или возврате животных в место отправки по самой короткой дороге при условии, что эта мера не будет создавать угрозу здоровью или благополучию животных;
b) прекращении перевозки с размещением животных и уходом за ними в условиях, соответствующих виду;
c) распоряжении об убое животных, с согласия владельца или уполномоченного лица и компетентного органа страны отправки, с их информированием о мерах, принятых согласно Ветеринарно-санитарным правилам, касающимся субпродуктов животного происхождения, не предназначенных для потребления человеком, утвержденным Постановлением Правительства № 315/2010;
d) выдвижении предложений и дополнений к настоящей Норме в зависимости от развития эпидемиологической ситуации и достигнутого научно-технического прогресса.
1. Поголовье крупного рогатого скота, официально свободное от туберкулеза
Положения настоящего раздела касаются всего крупного рогатого скота, за исключением животных, используемых в культурных или спортивных мероприятиях.
1. Поголовье крупного рогатого скота официально свободным от туберкулеза считается в случае, если:
1) ни у одного животного нет клинических признаков туберкулеза;
2) весь крупный рогатый скот в возрасте более шести недель показал отрицательную реакцию не менее чем на две официальные внутрикожные туберкулиновые пробы, проведенные в соответствии с приложением № 2 к настоящей Норме, в течение шести месяцев после устранения любой инфекции из поголовья и в течение следующих шести месяцев или в случае, когда поголовье создано исключительно из животных, которые происходят из поголовий, официально свободных от туберкулеза, первая проба проводится минимум через 60 дней после создания поголовья, а во второй пробе не было необходимости;
3) после завершения первой пробы, предусмотренной в подпункте 2), в поголовье не вводился крупный рогатый скот в возрасте более шести недель, за исключением случая, когда он показал отрицательную реакцию на внутрикожную туберкулиновую пробу, проведенную и оцененную в соответствии с приложением № 2 к настоящей Норме, и которая состоялась в течение 30 дней до или после введения в поголовье; в случае, когда проба проводится после введения в поголовье, животное (животные) должно (должны) быть физически изолировано (изолированы) от остальных животных, во избежание прямого или косвенного контакта с остальными животными, до тех пор, пока реакция окажется отрицательной.
Вместе с тем компетентный орган может не требовать проведения этой пробы в отношении перемещения животных по территории страны в случае, когда животное происходит из поголовья, официально свободного от туберкулеза, компетентный орган потребовал проведения этих проб в случае животных, перемещающихся между поголовьями, которые участвуют в сетевой системе, согласно положениям главы V настоящей Нормы.
2. Статус официально свободного от туберкулеза поголовья крупного рогатого скота сохраняется в случае, когда:
1) продолжают применяться условия, предусмотренные в подпунктах 1) и 2) пункта 1 настоящего приложения;
2) животные, поступающие на объект, происходят из поголовья со статусом официально свободного от туберкулеза;
3) все животные объекта, за исключением бычков в возрасте менее шести недель, родившихся на объекте, ежегодно подвергаются обычной туберкулиновой пробе в соответствии с приложением № 2 к настоящей Норме.
Компетентный орган изменяет кратность проведения обычных проб для всей страны или для части страны, в которой все поголовья крупного рогатого скота включены в официальную программу по борьбе с туберкулезом, в следующем порядке:
a) в случае если среднегодовое поголовье крупного рогатого скота, подтвержденное как инфицированное туберкулезом, подсчитанное в конце каждого года, не превышает 1% поголовий определенной зоны в течение последних двух годовых поднадзорных периодов, промежуток между обычными исследованиями может быть увеличен до двух лет, а самцы на откорме могут быть исключены из туберкулинового тестирования, при условии, что они происходят из поголовий, официально свободных от туберкулеза, и что компетентный ветеринарный орган гарантирует, что самцы на откорме не используются для воспроизводства и будут вывезены прямо в место убоя;
b) в случае если среднегодовое поголовье крупного рогатого скота, подтвержденное как инфицированное туберкулезом, подсчитанное в конце каждого года, не превышает 0,2% поголовий определенной зоны в течение последних двух периодов двух поднадзорных годов, промежуток между обычными исследованиями может быть увеличен до трех лет, а возраст животных, в котором они должны подвергаться исследованию, может быть увеличен до 24 месяцев;
c) в случае если среднегодовое поголовье крупного рогатого скота, подтвержденное как инфицированное туберкулезом, подсчитанное в конце каждого года, не превышает 0,1% поголовий определенной зоны в течение последних двух периодов трех поднадзорных лет, промежуток между обычными исследованиями может быть увеличен до четырех лет или центральный ветеринарный орган освобождает поголовье от туберкулиновой проб, при соблюдении следующих требований:
- перед введением в поголовье весь крупный рогатый скот подвергается внутрикожной туберкулиновой пробе с отрицательной реакцией; или
- весь убитый крупный рогатый скот исследуется с целью выявления повреждений, вызванных туберкулезом, выявленные повреждения подвергаются гистопатологическому и бактериальному исследованиям на подтверждение туберкулеза.
Также компетентный орган может увеличить кратность проведения туберкулиновых проб при учащении случаев туберкулеза.
3A. Статус официально свободного от туберкулеза поголовья приостанавливается, если:
1) больше не соблюдаются условия, указанные в пункте 2; или
2) установлено, что одно или несколько животных положительно реагировали на туберкулиновую пробу, или заподозрен случай туберкулеза при посмертном исследовании.
Когда животное считается положительно реагирующим на туберкулез, оно отделяется от поголовья и уничтожается. Проводятся адекватные посмертные исследования, лабораторные и эпидемиологические исследования положительно реагирующего животного или туши подозрительного животного. Статус поголовья остается приостановленным до завершения всех лабораторных исследований. В случае неподтверждения туберкулеза приостановление статуса официально свободного от туберкулеза может быть отменено после исследования всех животных в возрасте более шести недель, с отрицательным результатом, не ранее чем через 42 дня после удаления положительно реагирующего животного (животных); или
3) в поголовье есть животные с сомнительным статусом в соответствии с приложением № 2 к настоящей Норме. В таком случае статус поголовья остается приостановленным до выяснения статуса соответствующих животных. Такие животные должны быть изолированы от остальных животных поголовья до выяснения их статуса путем тестирования через 42 дня или при посмертном и лабораторном исследованиях.
Вместе с тем в порядке отступления от требований, предусмотренных в подпункте 3) настоящего приложения, на объекте, где компетентный орган проводит обычные проверки в поголовьях, используя сравнительную туберкулиновую пробу, описанную в приложении № 2 к настоящей Норме, и в поголовье, где не были выявлены подтвержденные положительно реагирующие животные в течение не менее трех лет, компетентный орган может решить не ограничивать движение других животных внутри поголовья при условии, что статус любых сомнительно реагирующих животных будет выяснен путем последующего тестирования, проведенного через 42 дня, и животные объекта не будут предметом торговли до выяснения статуса сомнительно реагирующих животных. Если при тестировании данные животные показывают положительную или сомнительную реакцию, то применяются положения пункта 2). Если в дальнейшем подтверждается наличие болезни, все животные, выбывающие с объекта после даты проведения последнего тестирования поголовья с исключительно отрицательными результатами, должны быть локализованы и исследованы.
3B. Статус официально свободного от туберкулеза поголовья аннулируется в случае, когда туберкулез подтверждается путем выделения M. bovis при лабораторном исследовании.
Компетентный орган аннулирует статус в случае, когда:
1) больше не соблюдаются условия, указанные в пункте 2;
2) при посмертном исследовании выявлены характерные повреждения, вызванные туберкулезом;
3) эпизоотологическая анкета свидетельствует о наличии возможной инфекции;
4) по любым другим причинам, которые считаются необходимыми для контроля туберкулеза крупного рогатого скота.
Локализация и проверка проводятся компетентным органом в отношении любого поголовья, подозрительного с эпидемиологической точки зрения. Статус официально свободного от туберкулеза остается аннулированным до завершении операций по очистке и дезинфекции объекта и предметов и до отрицательной реакции всех животных в возрасте более шести недель на две туберкулиновые пробы подряд, первую, выполненную не ранее чем через 60 дней, а вторую, выполненную не ранее чем через четыре месяца и не позднее чем через 12 месяцев после удаления последнего положительно реагирующего на пробу животного.
4. Страна или область страны признается официально свободной от туберкулеза на основе информации, представленной в соответствии с пунктом 16 настоящей Нормы, при соблюдении следующих требований:
1) процент поголовий крупного рогатого скота, у которых подтверждено инфицированное туберкулезом, не превысил 0,1% ежегодно от общего количества поголовий в течение шести лет подряд, и не менее 99,9% поголовий ежегодно в течение шести лет получали статус поголовья, официально свободного от туберкулеза, при этом второй процент подсчитывается на 31 декабря каждого календарного года;
2) каждое животное вида крупного рогатого скота идентифицировано в соответствии с положениями Постановления Правительства № 507/2012 об утверждении норм по идентификации и прослеживаемости животных;
3) весь забитый крупный рогатый скот подвергается посмертному официальному исследованию;
4) соблюдена процедура приостановления или аннулирования статуса официально свободного от туберкулеза.
5. Страна или часть страны сохраняют за собой статус официально свободной от туберкулеза при соблюдении условий, предусмотренных в подпунктах 1)-4) пункта 4. Вместе с тем, если имеются доказательства существенных изменений ситуации по туберкулезу в стране или на части ее территории, которые были признаны официально свободными от туберкулеза, компетентный орган принимает решение о приостановлении или аннулировании статуса до тех пор, пока будут выполнены требования настоящей Нормы.
1. Поголовье крупного рогатого скота считается официально свободным от бруцеллеза, если:
1) в поголовье нет животных, вакцинированных от бруцеллеза, за исключением самок, вакцинированных не менее трех лет назад;
2) ни одно животное не проявило клинических признаков болезни в течение не менее шести месяцев;
3) все животные в возрасте более 12 месяцев исследованы одним из тестов и показали отрицательные
реакции при:
a) двух серологических исследованиях, предусмотренных в пункте 10, выполненных с промежутком не менее трех месяцев и не более 12 месяцев;
b) при трех тестах на пробах молока, выполненных с промежутком в три месяца, и последующем серологическом исследовании, предусмотренном в пункте 10;
4) любое вводимое в поголовье животное вида крупного рогатого скота происходит из поголовий, официально свободных от бруцеллеза, и крупный рогатый скот в возрасте более 12 месяцев при реакции сероагглютинации на бруцеллез, выполненной в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме, показал титр менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл или отрицательно реагировал на любые другие утвержденные пробы, в течение 30 дней до или после введения в поголовье; в случае проведения пробы после введения в поголовье животное (животные) должны быть физически изолированы от остальных животных поголовья, чтобы исключить прямой и косвенный контакт с ними до подтверждения отрицательной реакции.
2. Статус официально свободного от бруцеллеза поголовья крупного рогатого скота сохраняется, если:
1) ежегодно проводится один из следующих методов исследования с отрицательными результатами в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме:
a) три кольцевые реакции, выполненные на пробах молока с промежутками не менее трех месяцев;
b) три ELISA-теста, выполненных на пробах молока с промежутками не менее трех месяцев;
c) две кольцевые реакции, выполненные на пробах молока с промежутком не менее трех месяцев, с последующим серологическим исследованием, проведенным как минимум через шесть недель, в соответствии с пунктом 10;
d) два ELISA-теста, выполненные на пробах молока с промежутком не менее трех месяцев, с последующим серологическим исследованием, проведенным как минимум через шесть недель, в соответствии с пунктом 10;
e) два серологических исследования, выполненные с промежутком не менее трех месяца и не более 12 месяцев.
Вместе с тем компетентный орган изменяет кратность проведения обычных исследований во всей стране или на части ее территории, которая не является официально свободной от бруцеллеза, но все поголовья крупного рогатого скота включены в официальную программу по борьбе с бруцеллезом, следующим образом:
a) когда инфицировано не более 1% поголовий крупного рогатого скота, может быть достаточно проведения ежегодных двух кольцевых реакций, выполненных на пробах молока, или двух ELISA-тестов, выполненных на пробах молока с промежутком не менее трех месяцев, или одного серологического исследования;
b) когда не менее 99,8% поголовий крупного рогатого скота признаны официально свободными от бруцеллеза в течение не менее четырех лет, промежуток между проверками может быть продлен до двух лет, если исследованы все животные в возрасте более 12 месяцев, или исследование может быть ограничено животными в возрасте более 24 месяцев, если поголовья продолжают исследоваться ежегодно. Проверки должны проводиться с использованием одного из серологических тестов, предусмотренных в пункте 10;
2) весь вводимый в поголовье крупный рогатый скот происходит исключительно из поголовий со статусом официально свободных от бруцеллеза, и крупный рогатый скот в возрасте более 12 месяцев при реакции сероагглютинации на бруцеллез, выполненной в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме, показал титр менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл, или отрицательно реагировал на любую другую из утвержденных проб, проведенную в течение 30 дней до или после введения в поголовье; в случае проведения пробы после введения в поголовье животное (животные) должно (должны) быть физически изолировано (изолированы) от остальных животных, чтобы исключить прямой или косвенный контакты с остальными животными до подтверждения отрицательной реакции.
Вместе с тем исследование, предусмотренное в пункте 2), не является обязательным в странах или областях стран, где процент инфицированных бруцеллезом поголовий крупного рогатого скота не превышал 0,2% в течение не менее двух лет, и если животные происходят из официально свободных от бруцеллеза поголовий соответствующей страны или области, и не контактируют во время перевозки с крупным рогатым скотом с менее благополучным статусом здоровья;
3) не затрагивая пункта 2), животные, которые происходят из поголовий, свободных от бруцеллеза, могут вводиться в поголовье, официально свободное от бруцеллеза, если их возраст превышает 18 месяцев и они были вакцинированы от бруцеллеза не менее года назад.
В течение 30 дней до введения в поголовье эти животные должны показать бруцеллезный титр менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл или отрицательный результат при реакции связывания комплемента или на другую утвержденную пробу.
Вместе с тем, если самка крупного рогатого скота из официально свободного от бруцеллеза поголовья введена в поголовье, официально свободное от бруцеллеза, согласно положениям предыдущей части, поголовье считается официально свободным от бруцеллеза в течение двух лет с момента введения в поголовье последнего вакцинированного животного.
3A. Статус официально свободного от бруцеллеза поголовья приостанавливается, если:
1) больше не соблюдаются условия, изложенные в пунктах 1 и 2; или
2) в результате лабораторных или клинических исследований одно или более животных оказались подозрительными на бруцеллез и были убиты или изолированы таким образом, чтоб исключить любой прямой и непрямой контакт с остальными животными.
Если животное убито и уже не может быть исследовано, приостановление может быть отменено в случае, когда два сероагглютинирующих исследования, проведенных в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме, у всего крупного рогатого скота поголовья в возрасте более 12 месяцев, показали титр менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл. Первое исследование проводится не раньше чем через 30 дней после удаления животного, а второе - не раньше чем через 60 дней после первого.
Если животное изолировано от поголовья, оно может быть вновь введено в поголовье и статус поголовья может быть пересмотрен:
a) после проведения серологического исследования с титром менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл и отрицательного результата в реакции связывания комплемента; или
b) отрицательного результата любыми совместными тестами, утвержденными для этих целей.
3B. Статус официально свободного от бруцеллеза поголовья аннулируется, если лабораторными или эпидемиологическими исследованиями подтверждено заражение поголовья бруцеллезом.
Статус поголовья пересматривается, если животные вида крупного рогатого скота, имеющиеся в поголовье на момент вспышки очага, были забиты, или если поголовье подвергли проверочному исследованию и все животные в возрасте более 12 месяцев отрицательно показали отрицательные результаты при двух пробах подряд, выполненных с промежутком в 60 дней, а первая - не раньше чем через 30 дней после удаления положительно реагирующего (реагирующих) животного (животных).
Конечная проверка стельного крупного рогатого скота, имеющегося в момент вспышки очага, должна проводиться не раньше чем через 21 день после отела последнего беременного животного в момент вспышки очага.
4. Поголовье крупного рогатого скота считается свободным от бруцеллеза, если соблюдаются условия, предусмотренные в подпунктах 2) и 3) пункта 1, и вакцинация проводилась следующим образом:
1) самки крупного рогатого скота были вакцинированы:
a) до достижения 6-месячного возраста живой вакциной из вирусного штамма 19; или
b) до достижения 15-месячного возраста – инактивированной адъювантной вакциной 45/20, проверенной и официально утвержденной; или
c) другими утвержденными вакцинами;
2) крупный рогатый скот в возрасте до 30 месяцев, вакцинированный живой вакциной из вирусного штамма 19, в сероагглютинирующем тесте показал результат более 30 международных единиц (МЕ), но менее 80 международных единиц (МЕ)/миллилитр, при условии, что в реакции связывания комплемента самки, вакцинированные менее 12 месяцев назад, показали результат менее 30 международных единиц (ЕЕС) или не менее 20 международных единиц (ЕЕС) во всех остальных случаях.
5. Статус свободного от бруцеллеза поголовья крупного рогатого скота сохраняется, если:
1) поголовье исследуется одной из мер тестирования, перечисленной в подпункте 1) пункта 2;
2) ввозимый в поголовье крупный рогатый скот отвечает требованиям подпункта 2) пункта 2; или
a) происходит из поголовья со статусом свободного от бруцеллеза и, для крупного рогатого скота в возрасте более 12 месяцев, в течение 30 дней до введения или во время изоляции после введения в поголовье, показал титр менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл в реакции сероагглютинации или отрицательный результат в реакции связывания комплемента, проведенных в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме; или
b) происходит из поголовья со статусом свободного от бруцеллеза, имеет возраст менее 30 месяцев и был вакцинирован живой вакциной из вирусного штамма 19, и в реакции сероагглютинации показал результат более 30 международных единиц (МЕ), но менее 80 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/миллилитр, при условии, что в реакции связывания комплемента самки, вакцинированные менее 12 месяцев назад, показали результат менее 30 международных единиц (ЕЕС) или менее 20 международных единиц (ЕЕС) во всех остальных случаях.
6A. Статус свободного от бруцеллеза поголовья приостанавливается, если:
1) не выполнены условия, указанные в пунктах 4 и 5; или
b) в результате лабораторных исследований или из клинических соображений одно или более животных в возрасте более 30 месяцев оказались подозрительными на бруцеллез и подозрительное (подозрительные) животное (животные) были забиты или изолированы таким образом, чтобы исключить любой прямой и непрямой контакт с остальными животными.
В случае, когда животное изолировано, оно может быть вновь введено в поголовье, и статус поголовья может быть восстановлен, если впоследствии животное реагировало в титре менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл и показало отрицательный результат в реакции связывания комплемента или на любой другой утвержденный тест.
Если животные забиты и не могут подвергаться исследованию, приостановление может быть отменено, если после двух сероагглютинирующих исследований, проведенных в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме, все животные в возрасте более 12 месяцев реагируют в бруцеллезном титре менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл. Первое исследование проводится не ранее чем через 30 дней после удаления животного, а второе – не ранее чем через 60 дней после первого.
В случае, когда животные, которые должны быть исследованы в соответствии с требованиями двух предыдущих параграфов, имеют возраст менее 30 месяцев и были вакцинированы живой вакциной из вирусного штамма 19, они могут считаться отрицательно реагирующими, если при сероагглютинирующем исследовании показали результат более 30 международных единиц (МЕ), но менее 80 международных единиц (МЕ)/мл при условии, что в реакции связывания комплемента они показали результат менее 30 международных единиц (ЕЕС) в случае самок, вакцинированных менее 12 месяцев назад, или менее 20 международных единиц (ЕЕС) во всех остальных случаях.
6B. Статус свободного от бруцеллеза поголовья аннулируется, если лабораторными пробами в ходе эпидемиологических исследований подтверждена бруцеллезная инфекция в поголовье. Статус поголовья пересматривается, если весь крупный рогатый скот, имеющийся в поголовье в момент вспышки очага, подвергался контрольному исследованию и все не вакцинированные животные в возрасте более 12 месяцев отрицательно реагировали на две пробы подряд, выполненные с промежутком в 60 дней: первая – не ранее чем через 30 дней после удаления положительно реагирующего (реагирующих) животного (животных).
В случае, когда все животные, которые должны быть исследованы в соответствии с требованиями двух предыдущих параграфов, имеют возраст меньше 30 месяцев и были вакцинированы живой вакциной из вирусного штамма 19, они могут считаться отрицательно реагирующими, в случае бруцеллезного титра более 30 международных единиц (МЕ), но менее 80 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл при условии, что в реакции связывания комплемента они показали результат менее 30 международных единиц (ЕЕС) в случае самок, вакцинированных менее 12 месяцев назад, или менее 20 международных единиц (ЕЕС) во всех остальных случаях.
Конечная проверка стельных животных, имеющихся в момент вспышки очага, должна проводиться не ранее чем через 21 день после отела последнего беременного животного в момент вспышки очага.
7. Страна или область официально свободной от бруцеллеза признается в случае выполнения следующих условий:
1) не было зарегистрировано в течение не менее трех лет случаев аборта, вызванного инфицированием Brucella, и не было выявлено ни одной культуры Brucella abortus, и не менее 99,8% поголовий получили статус поголовья, официально свободного от бруцеллеза, а процент подсчитан на 31 декабря каждого календарного года. Вместе с тем, если компетентный орган утверждает политику убоя всего поголовья, отдельные случаи - которые признаны эпидемиологическим исследованием вызванными ввозом некоторых животных из-за рубежа или на часть ее территории, и из поголовий, чей статус поголовья официально свободного от бруцеллеза, был приостановлен или аннулирован по другим причинам, чем подозрение на заражение - не учитываются при расчете вышеуказанного процента, при условии, что центральный ветеринарный орган страны, в которой отмечены инциденты, составляет ежегодные отчеты и передает их международным организациям, в которые он входит, в соответствии с пунктом 16 настоящей Нормы;
2) каждая особь крупного рогатого скота идентифицирована;
3) случаи аборта подлежат обязательному оповещению и исследованию компетентным ветеринарным органом.
8. При условии соблюдения пункта 9 страна или ее область, признанные официально свободными от бруцеллеза, сохраняют свой статус, если:
1) условия, предусмотренные пунктами 1) и 2) пункта 7, по-прежнему выполняются в случае, когда оповещение о случаях аборта, по которым есть подозрение о том, что они вызваны бруцеллезом, является обязательным и они исследуются компетентным органом;
2) каждый год в течение первых пяти лет после получения статуса весь крупный рогатый скот в возрасте более 24 месяцев не менее чем в 20 % поголовий был исследован и показал отрицательную реакцию на серологическое исследование, проведенное в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме, или в случае молочных поголовий, в ходе исследований проб молока в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме;
3) о каждой особи крупного рогатого скота, подозреваемой в заражении бруцеллезом, сообщается компетентному органу, и она подвергается официальному эпидемиологическому исследованию по выявлению бруцеллеза посредством не менее двух серологических исследований крови, включая реакцию связывания комплемента, и микробиологическому исследованию взятых проб;
4) на период подозрения на заражение бруцеллезом, который продолжается до получения отрицательных результатов проб, предусмотренных в пункте 3), статус официально свободного от бруцеллеза поголовья происхождения или транзита подозрительного животного и подозрительных поголовий в связи с данным животным приостанавливается;
5) в случае распространения очага бруцеллеза весь крупный рогатый скот был убит. Оставшиеся животные подозреваемых видов подвергаются необходимым исследованиям, а объект и оборудование чистятся и дезинфицируются.
9. Страна или ее область, признанные официально свободными от бруцеллеза, обязаны информировать международные организации, в которые она входит, обо всех случаях бруцеллеза. При наличии доказательства существенного изменения ситуации по бруцеллезу в стране или на части ее территории, которая была признана официально свободной от бруцеллеза, предлагается приостановить или аннулировать статус до тех пор, пока не будут выполнены требования настоящей Нормы.
10. В смысле раздела II под серологическим тестом понимается реакция сероагглютинации, реакция с буферным бруцеллезным антигеном, реакция связывания комплемента, реакция агглютинации на плазме, кольцевая реакция на плазме, реакция микроагглютинации или ELISA-тест, выполненный индивидуально на пробах крови, в соответствии с описанием, приведенным в приложении № 3 к настоящей Норме. Также принимается любое другое диагностическое исследование, утвержденное и изложенное в приложении № 3 к настоящей Норме. Под исследованием проб молока подразумевается кольцевая реакция или ELISA-тест, выполненные на пробах молока, в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме.
Присутствие Mycobacterium bovis (M. bovis), возбудителя туберкулеза крупного рогатого скота, в клинических и посмертных пробах может устанавливаться путем рассмотрения окрашенных мазков или приемами иммунопероксидазы и подтверждаться выращиванием организма в среде первичной изоляции.
Патологическая ткань, необходимая для подтверждения присутствия M. bovis, берется из отклоняющихся от нормы узлов паренхиматозных органов, таких как легкие, печень, селезенка и т.д. Если у животного нет патологических повреждений, то пробы следует взять из заднеглоточных узлов, легочных узлов, средостенных узлов, надгрудинных лимфатических узлов, подчелюстных узлов и из определенных мезентериальных и печеночных узлов с целью исследования и выращивания.
Идентификацию изолятов можно выполнить, как правило, путем установления биохимических свойств и особенностей соответствующей культуры. Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) также можно использовать для выявления туберкулезного комплекса M. tuberculosis. Приемы анализа ДНК могут оказаться более быстрыми и надежными, чем биохимические методы дифференциации Mycobacterium bovis от других членов туберкулезного комплекса M. tuberculosis. Генетические отпечатки позволяют установить разницу между различными штаммами Mycobacterium bovis, а также описать модели причин и способов передачи и распространения Mycobacterium bovis.
Используемые технические приемы и средства, их стандартизация и интерпретация результатов должны соответствовать указаниям, изложенным в главе 2.3.3 (туберкулез крупного рогатого скота) Руководства по диагностическим тестам и вакцинам Международного эпизоотического бюро (издание четвертое, 2000 г.).
2. Кожная туберкулиновая проба
Для проведения официальной кожной туберкулиновой пробы используют очищенные белковые дериваты туберкулина, которые соответствуют условиям, предусмотренным в пункте 2.1, в соответствии с процедурами, указанными в пункте 2.2.
2.1. Нормы, применяемые к туберкулину (бычьему и птичьему)
2.1.1. Определение
Очищенный белковый дериват (туберкулин PPD, бычий или птичий) – это препарат, получаемый путем применения тепловой обработки продуктов выращивания и лизиса Mycobacterium bovis и 6 (при необходимости), который может проявлять замедленную повышенную чувствительность у животного, сенсибилизированного к микроорганизмам того же вида.
2.1.2. Производство
Туберкулин получают из водорастворимых фракций, приготовленных путем нагревания на свободном пару, с последующей фильтрацией, культур M. Bovis и M. avium (по необходимости), выращиваемых в синтетической жидкой среде. Активная фракция жидкости, состоящая в основном из белков, изолируется путем преципитации, смывается и еще раз разбавляется. Можно добавить продукт противомикробной защиты, который не вызывает ложноположительных реакций, такой как фенол. Конечный стерильный продукт, в котором нет микробактерий, разливают в асептических условиях в безопасные стеклянные емкости, которые закрывают во избежание заражения. Препарат можно лиофилизировать.
2.1.3. Идентификация продукта
Инъекционно внутрикожно вводят несколько калиброванных доз в разные точки правильно сенсибилизированным крысам альбиносам весом не менее 250 г каждая. Через 24-28 часов возникают реакции в виде отеков с покраснением с некрозом в точках введения или нет. Масштаб и тяжесть реакций различаются в зависимости от введенной дозы. Крысы, которые не были сенсибилизированы, не показывают никакой реакции на инъекции такого вида.
2.1.4. Пробы
2.1.4.1. pH: pH колеблется от 6,5 до 7,5.
2.1.4.2. Фенол: если подлежащий исследованию препарат содержит фенол, его концентрация не должна превышать 5 г/л.
2.1.4.3. Эффект сенсибилизации: используется группа из 3 крыс, которые не получали материалы, способные интерферировать с пробой. Каждой крысе трижды вводят внутрикожно с промежутком в пять дней дозу подлежащего исследованию препарата, эквивалентную 500 МЕ на 0,1 мл. Через 15 дней до 21 дня после первого введения вводят внутрикожно такую же дозу (500 МЕ) тем же животным, а также контрольной группе, состоящей из крыс с аналогичным весом, которым предварительно не вводился туберкулин. Через 24 часа до 48 часов после последних введений реакции этих двух групп не будут существенно отличаться.
2.1.4.4. Токсичность: используют две крысы весом не менее 250 граммов каждая, которые предварительно не получали материалы, способные интерферировать с пробой. Каждой крысе подкожно вводят по 0,5 мл исследуемого препарата. Животные наблюдаются в течение семи дней. Во время периода наблюдения не проявляется ни одного отклоняющегося от нормы действия.
2.1.4.5. Стерильность: необходимо провести пробу на стерильность, предписанную в Монографии о ветеринарных вакцинах в Европейской фармакопее, издание четвертое (2002 г.).
2.1.5. Сила реакции
Сила реакции белкового деривата туберкулина (бычьего и птичьего) определяется путем сравнения реакций, наступивших у сенсибилизированных крыс путем внутрикожного введения ряда разбавлений исследуемого препарата, с реакциями, вызванными известными концентрациями эталонного препарата очищенного белкового деривата туберкулина (бычьего и птичьего, по необходимости), измеряемого в международных единицах.
Для исследования силы реакции сенсибилизируется не менее двух крыс альбиносов весом от 400 до 600 граммов каждая путем глубокого внутримышечного введения 0,0001 мг влажной массы штамма AN5 живого M. bovis, в суспензии в 0,5 мл раствора натрия хлорида R в объеме 9 г/л для бычьего туберкулина или адекватной дозы дезактивированного или живого M. avium для птичьего туберкулина. Не менее чем через четыре недели после сенсибилизации крыс сбривают у животных шерсть с боковых сторон тела, чтобы освободить необходимое пространство, по меньшей мере, для четырех точек введения на каждой стороне. Приготавливаются разбавления исследуемого препарата и эталонного препарата, используя буферный солевой изотонический раствор фосфатов (с pH от 6,5 до 7,5), который содержит 0,005 г/л полисорбата 80 R. Используют минимум три дозы эталонного препарата и такое же количество исследуемого препарата. Дозы определяются так, чтобы диаметр вызываемых повреждений составлял от 8 до 25 мм. Разбавления распределяются случайным способом среди точек в нарисованном латинском квадрате. Каждая доза вводится внутрикожно в постоянном объеме 0,1 или 0,2 мл. Через период от 24 до 48 часов измеряются диаметры повреждений и рассчитывается результат пробы путем использования обычных статистических методов и на основе предположения, что диаметры повреждений прямо пропорциональны логарифму концентрации туберкулинов.
Проба действительна только при условии, что степени погрешности (P = 0,95) выше 50 % и ниже 200 % оценочной силы реакции. Оценочная сила реакции составляет более 66 % и менее 150 % заявленной силы бычьего туберкулина. Расчетная сила реакции должна быть выше 75 % и ниже 133 % заявленной силы птичьего туберкулина. Заявленная сила реакции должна быть выше 20 000 МЕ/мл для двух видов туберкулина (бычьего и птичьего).
2.1.6. Хранение
Хранится в темных местах при температуре 5 ± 3 °С.
2.1.7. Этикетирование
На этикетке должно быть указано следующее:
- сила реакции в международных единицах на миллилитр;
- наименование и количество добавленных веществ;
- для лиофилизированных препаратов:
наименование и объем добавляемого разбавителя;
то, что продукт следует использовать сразу же после разбавления.
2.2. Процедуры проведения проб
2.2.1. Признаны официальными внутрикожными туберкулиновыми пробами следующие пробы:
- простая внутрикожная проба: эта проба требует только одного введения бычьего туберкулина;
- сравнительная внутрикожная проба: эта проба требует одного введения бычьего туберкулина и одного введения птичьего туберкулина одновременно.
2.2.2. Доза вводимого туберкулина должна быть:
- равна или выше 2 000 МЕ бычьего туберкулина;
- равна или выше 2 000 МЕ птичьего туберкулина.
2.2.3. Объем каждой инъекции не должен превышать 0,2 мл.
2.2.4. Туберкулиновые пробы проводятся путем введения туберкулина в кожу шеи. Точки введения должны быть расположены на границе между передней и средней третью шеи. Если одному животному вводятся оба вида туберкулина, бычьего и птичьего, то точка введения птичьего туберкулина должна располагаться на 10 см от верхней линии шеи, а точка введения бычьего туберкулина – на 12,5 см ниже, на линии, приблизительно параллельной линии плеча, или на боковых сторонах шеи; у молодых животных, у которых нет достаточного места для отделения точек введения на одной стороне шеи, проводится по одному введению с каждой стороны шеи в одинаковых точках, расположенных в центре средней трети шеи.
2.2.5. Техника туберкулинизации и интерпретация реакций.
2.2.5.1. Техника
Точки введения выстригаются и дезинфицируются. Складка кожи в каждой подготовленной зоне захватывается большим и указательным пальцами, измеряется штангенциркулем и регистрируется результат. Затем вводится доза туберкулина методом, гарантирующим ее внутрикожное введение. Для этого можно использовать короткую и стерильную иглу с косым срезом и краем, направленным наружу, подсоединенная к градуированному наполненному туберкулином шприцу, которая вводится в более глубокие слои кожи. Правильность введения проверяется путем пальпации малого узелка в каждой точке введения, похожего на гороховый боб. Толщина складки каждой точки введения вновь измеряется через 72 часа (+/- 4 часа) после введения и регистрируется результат.
2.2.5.2. Интерпретация реакций
Интерпретация результатов осуществляется на основе клинических наблюдениях и установленном увеличении или увеличений толщины кожных складок в местах введения, зарегистрированных через 72 часа после введения туберкулина или туберкулинов.
a) Отрицательная реакция: реакция считается отрицательной, если наблюдается лишь ограниченное воспаление с увеличением толщины кожной складки на более 2 мм, отсутствие клинических признаков, таких как обширный или разлитой отек, экссудация, некроз, болезненность или воспаление лимфатических сосудов или лимфатических узлов соответствующей области.
b) Сомнительная реакция: реакция считается сомнительной, если не наблюдается ни одного из клинических признаков, указанных в подпункте а), и если толщина кожной складки увеличилась более чем на 2 мм, но менее чем на 4 мм.
c) Положительная реакция: реакция считается положительной, если наблюдаются клинические признаки, указанные в подпункте a), или повышение толщины кожной складки в месте инъекции на 4 мм и более.
2.2.5.3. Интерпретация официальных внутрикожных туберкулиновых проб осуществляется следующим образом:
2.2.5.3.1. Простая внутрикожная проба:
a) положительная: положительная реакция на бычий туберкулин, согласно описанию, данному в подпункте c) пункта 2.2.5.2;
b) сомнительная: сомнительная реакция, согласно описанию, данному в подпункте b) пункта 2.2.5.2;
c) отрицательная: отрицательная реакция на бычий туберкулин, согласно описанию, данному в подпункте a) пункта 2.2.5.2.
Животные, у которых простая внутрикожная проба дала сомнительные результаты, исследуются повторно не раньше чем через 42 дня.
Животные, у которых вторая проба не показала отрицательных результатов, считаются положительно реагирующими на пробу.
Животные, у которых простая внутрикожная проба дала положительные результаты, могут быть подвергнуты сравнительному внутрикожному исследованию, если подозревается присутствие ложноположительной реакции или интерферирующей реакции.
2.2.5.3.2. Сравнительная внутрикожная проба с целью установления и поддержания статуса поголовья, официально свободного от туберкулеза:
a) положительная: реакция считается положительной на бычий туберкулин, если имеются клинические признаки или бычий туберкулин вызвал повышение толщины кожной складки на 4 мм больше, чем при реакции на птичий туберкулин;
b) сомнительная: реакция считается положительной или сомнительной на бычий туберкулин, если нет клинических признаков и если бычий туберкулин вызвал повышение толщины кожной складки на 1-4 мм больше, чем при реакции на птичий туберкулин;
c) отрицательная: реакция считается отрицательной на бычий туберкулин, если нет клинических признаков и если бычий туберкулин вызвал отрицательную реакцию или положительную реакцию либо сомнительную, в результате которой толщина кожной складки равна или меньше, чем в случае положительной или сомнительной реакции на птичий туберкулин.
Животные, у которых сравнительные внутрикожные пробы дали сомнительные результаты, исследуются повторно не раньше чем через 42 дня. Животные, у которых вторая проба не дала отрицательных результатов, считаются положительно реагирующими на пробу.
2.2.5.3.3. Статус поголовья, официально свободного от туберкулеза, может быть приостановлен и животные данного поголовья не могут быть предметом торговли внутри Сообщества до определения окончательного статуса следующих животных:
a) животные, которые сомнительно реагировали на простую внутрикожную пробу;
b) животные, которые положительно реагировали на простую внутрикожную пробу, но должны быть подвергнуты новому исследованию, в виде сравнительной внутрикожной пробы;
c) животные, которые сомнительно реагировали на сравнительную внутрикожную пробу.
2.2.5.3.4. Если законодательством Сообщества предусмотрено, чтобы животные подвергались внутрикожному исследованию перед перемещением, проба должна быть оценена таким образом, что ни одно животное, которое отреагировало утолщением кожной складки более чем на 2 мм или проявило клинические признаки, не должно быть предметом торговли.
2.2.5.3.5. Для содействия выявлению максимального количества инфицированных или больных животных в поголовье или области страна – импортер может изменить критерии интерпретации проб с целью улучшения чувствительности к пробам, признавая все сомнительные реакции, указанные в подпунктах b) пунктов 2.2.5.3.1. и 2.2.5.3.2, положительными реакциями.
3. Дополнительные пробы
Для выявления максимального количества инфицированных или больных животных в поголовье или области страны-участницы могут разрешить, помимо туберкулинизации, применение дозировки гамма-интерферона, указанного в главе 2.3.3 (туберкулез крупного рогатого скота) руководства о нормах проведения диагностических проб и вакцин, издание четвертое (2000 г.), Международного эпизоотического бюро (МЭБ).
4. Государственные институты и базовые национальные лаборатории
4.1. Обязанности и ответственность
Государственные институты, базовые национальные лаборатории или официальные институты, назначенные в соответствии с пунктом 16 настоящей Нормы, несут ответственность за официальное тестирование туберкулинов или реактивов, указанных в пунктах 2 и, соответственно, 3, с целью гарантирования адекватности каждого из этих туберкулинов или реактивов, с точки зрения стандартов, указанных в пункте 2.1 и, соответственно, пункте 3.
При любой возможности Brucella spp. следует выделять, используя простые или выборочные среды, путем отбора из маточных выделений, из плодов-выкидышей, выделений из вымени или определенных тканей, а также лимфатических узлов и репродуктивных органов самцов и самок.
После выделения виды и биотип можно идентифицировать путем лизиса фагов и/или пробами окислительного обмена веществ в зависимости от критериев культуры, биохимических и серологических критериев. ПЦР может обеспечить также дополнительный метод биотипизации, основанный на геномных последовательностях.
Используемые приемы и среды, стандартизация и интерпретация результатов должны соответствовать условиям Руководства по диагностическим тестам и вакцинам для наземных животных, издание шестое, 2008 г., глава 2.4.3 (бруцеллез крупного рогатого скота), глава 2.7.2 (бруцеллез коз и крупного рогатого скота) и глава 2.8.5 (бруцеллез свиней).
2. Иммунологические пробы
2.1. Стандарты
2.1.1. При приготовлении всех антигенов, используемых при реакции с розовым бенгалом (RBT), реакции сероагглютинации (SAT), реакции на связывание комплемента (CFT) и кольцевой реакции, выполняемой на пробе молока (MRT), используется штамм Weybridge № 99 и USDA 1119-3 биотипа 1 Brucella abortus.
2.1.2. Стандартной эталонной сывороткой для реакций RBT, SAT, CFT и MRT будет международная стандартная сыворотка МЭБ (OIEISS), известная ранее как вторая международная стандартная сыворотка анти-Brucella abortus ВОЗ (ISAbS).
2.1.3. Стандартные эталонные сыворотки для иммуноферментных методов (ELISA) следующие:
- OIEISS;
- стандартная сыворотка ELISA слабоположительная МЭБ (OIEELISAWPSS);
- стандартная сыворотка ELISA сильноположительная МЭБ (OIEELISASPSS);
- стандартная сыворотка ELISA отрицательная МЭБ (OIEELISANSS).
2.1.4. Эталонные стандартные сыворотки для оценки флюоресценции в полярном свете (FPA) следующие:
- стандартная сыворотка ELISA слабоположительная МЭБ (OIEELISAWPSS);
- стандартная сыворотка ELISA сильноположительная МЭБ (OIEELISASPSS);
- стандартная сыворотка ELISA отрицательная МЭБ (OIEELISANSS).
2.1.5. Стандартные сыворотки, указанные в пунктах 2.1.3 и 2.1.4, поставляются базовой лабораторией Сообщества или Агентством ветеринарных лабораторий [Veterinary Laboratories Agency (VLA)], Weybridge, Великобритания.
2.1.6. OIEISS, OIEELISAWPSS, OIEELISASPSS и OIEELISANSS – главные международные стандарты, на основе которых устанавливаются, в каждом государстве-участнике, национальные стандартные сыворотки («эталонные сыворотки») для каждой из проб, указанных в пункте 2.1.1.
2.2. Иммуноферментные методы (ELISA) или другие обязательные реакции на агглютинацию для выявления бруцеллеза крупного рогатого скота в сыворотке или молоке.
2.2.1. Материал и реактивы
Используемая техника и интерпретация результатов должны быть предварительно утверждены в соответствии с принципами, предусмотренными в главе 1.1.4 Руководства по диагностическим тестам и вакцинам для наземных животных, издание шестое, 2008 г., и должны включать как минимум лабораторные и диагностические исследования.
2.2.2. Стандартизация теста
2.2.2.1. Стандартизация тестовой процедуры для отдельных проб сыворотки:
a) предварительное разбавление 1/150 сыворотки OIEISS или предварительное разбавление 1/2 сыворотки OIEELISAWPSS или предварительное разбавление 1/16 сыворотки OIEELISASPSS в отрицательной сыворотке (или в смеси отрицательных сывороток) должно дать положительную реакцию;
b) предварительное разбавление 1/600 сыворотки OIEISS или предварительное разбавление 1/8 сыворотки OIEELISAWPSS или предварительное разбавление 1/64 сыворотки OIEELISASPSS в отрицательной сыворотке (или в смеси отрицательных сывороток) должно дать отрицательную реакцию;
c) сыворотка OIEELISANSS всегда должна давать отрицательную реакцию.
2.2.2.2. Стандартизация тестовой процедуры для смешанных проб сыворотки:
a) предварительное разбавление 1/150 сыворотки OIEISS или предварительное разбавление 1/2 сыворотки OIEELISAWPSS или предварительное разбавление 1/16 сыворотки OIEELISASPSS в отрицательной сыворотке (или в смеси отрицательных сывороток) и снова разбавленных в отрицательных сыворотках с коэффициентом разбавления, тождественным количеству составляющих смесь сывороток, должно дать положительную реакцию;
b) сыворотка OIEELISANSS всегда должна давать отрицательную реакцию;
c) тест должен быть способным выявить присутствие инфекции у одного животного из группы животных, от которых сочетались пробы сыворотки.
2.2.2.3. Стандартизация тестовой процедуры для проб молока или смешанной сыворотки:
a) предварительное разбавление 1/1 000 сыворотки OIEISS или предварительное разбавление 1/16 сыворотки OIEELISAWPSS или предварительное разбавление 1/125 сыворотки OIEELISASPSS в отрицательной сыворотке (или в смеси отрицательных сывороток) и снова разбавленных в пропорции 1/10 в отрицательном молоке должно дать положительную реакцию;
b) сыворотка OIEELISANSS, разбавленная в соотношении 1/10 в отрицательном молоке, всегда должна давать отрицательную реакцию;
c) тест должен быть способным выявить присутствие инфекции у одного животного из группы животных, от которых сочетались пробы молока или сыворотки.
2.2.3. Условия использования ELISA-тестов в диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота:
2.2.3.1. При использовании условий калибровки ELISA-теста, изложенных в пунктах 2.2.2.1 и 2.2.2.2, на пробах сыворотки диагностическая чувствительность ELISA будет равна или выше, чем при реакции RBT или реакции CFT, с учетом эпидемиологической ситуации его использования.
2.2.3.2. При использовании условий калибровки ELISA-теста, изложенных в пункте 2.2.2.3, на пробах смешанного молока диагностическая чувствительность ELISA будет равна или выше, чем при реакции MRT, учитывая не только эпидемиологическую ситуацию, но и средние и большие поголовья предусмотренных систем выращивания.
2.2.3.3. Если ELISA-тесты используются в целях сертификации в соответствии с пунктом 13 настоящей Нормы или для создания и поддержания статуса поголовья в соответствии с пунктом 10 части II приложения № 1 к настоящей Норме, то смесь проб сыворотки следует выполнить так, чтобы результаты тестов можно было четко отнести к разным животным, от которых происходит введенное в смесь молоко. Любой подтверждающий тест должен проводиться на пробах сыворотки, взятых у отдельных животных.
2.2.3.4. ELISA-тесты можно применять на пробах молока из выборки молока, взятой на ферме, где не менее 30 % молочных коров находятся в периоде лактации. При использовании данного метода следует принять меры для того, чтобы взятые для исследования пробы четко относились к разным животным, от которых происходит молоко. Любой подтверждающий тест должен проводиться на пробах сыворотки, взятых у отдельных животных.
2.3. Реакция связывания комплемента (CFT)
2.3.1. Антиген представляет собой бактериальную эмульсию, приготовленную на фенольно-солевом растворе [NaCl 0,85 % (м/о) и фенол 0,5% (о/о)] или в буфере веронал. Антигены можно брать в концентрированном виде, при условии, чтобы используемый коэффициент разбавления был указан на этикетке флакона. Антиген следует хранить при температуре 4 °С. Нельзя замораживать.
2.3.2. Сыворотки следует дезактивировать следующим образом:
– сыворотка крупного рогатого скота: при температуре 56-60 °C в течение 30-50 минут;
– сыворотка свиней: при температуре 60 °C в течение 30-50 минут.
2.3.3. Для получения удовлетворительной реакции в ходе тестовой процедуры используется доза комплемента выше минимально необходимой дозы для полного гемолиза.
2.3.4. Во время реакции связывания комплемента проводятся следующие проверки:
a) проверка антикомплементарного эффекта сыворотки;
b) проверка антигена;
c) проверка сенсибилизированных эритроцитов;
d) проверка комплемента;
e) проверка чувствительности запуска реакции, используя положительную сыворотку;
f) проверка специфичности реакции, используя отрицательную сыворотку.
2.3.5. Подсчет результатов.
Сыворотка OIEISS содержит 1 000 международных единиц CFT (ICFTU) на мл. Если сыворотка OIEISS тестируется одним из указанных методов, то результат выражается в виде титра (например, самое высокое прямое разбавление сыворотки OIEISS, которое дает 50 % гемолиза, TOIEISS). Результат реакции для тестовой сыворотки дается как титр (TSERTEST), должен выражаться в ICFTU на мл. Для превращения выражения титра в ICFTU, необходимый коэффициент (F) для превращения титра неизвестной исследуемой сыворотки (TSERTEST), исследуемой этим методом, выражаемый в ICFTU, находят по формуле:
F = 1 000 × 1/TOIEISS,
а содержание международных единиц CFT на мл исследуемого теста (ICFTUSERTEST), из формулы:
ICFTUTESTSERUM = F × TTESTSERUM
2.3.6. Интерпретация результатов
Сыворотка, содержащая 20 или более ICFTU на мл, будет считаться положительной.
2.4. Кольцевая реакция на пробе молока (MRT)
2.4.1. Антиген представляет собой бактериальную эмульсию, приготовленную на фенольно-солевом растворе [NaCl 0,85 % (м/о) и феноле 0,5 % (о/о)], окрашенную гематоксилином. Антиген следует хранить при температуре 4 °C. Не замораживать.
2.4.2. Чувствительность антигена должна быть стандартизирована к сыворотке OIEISS, чтобы антиген давал положительную реакцию при разбавлении 1/500 сыворотки OIEISS в отрицательном молоке и отрицательную реакцию при разбавлении 1/1 000.
2.4.3. Кольцевую реакцию следует проводить на представительных пробах содержимого каждой емкости с молоком и каждой эксплуатационной емкости с фермы.
2.4.4. Пробы молока нельзя замораживать, нагревать или сильно встряхивать.
2.4.5. Реакция должна выполняться, используя один из следующих методов:
- на столбике молока высотой не менее 25 мм и не менее 1 мл молока, к которому добавляется 0,03 мл или 0,05 мл одного из окрашенных стандартизированных антигенов;
- на столбике молока высотой не менее 25 мм и не менее 2 мл молока, к которому добавляется 0,05 мл одного из окрашенных стандартизированных антигенов;
- на 8 мл молока, к которому добавляется 0,08 мл одного из окрашенных стандартизированных антигенов.
2.4.6. Смесь молока и антигена должна быть инкубирована при 37°С в течение 60 минут, с положительными и отрицательными эталонными сыворотками. Чувствительность пробы высокая, если инкубация сохраняется при 4 °C в течение 16-24 часов.
2.4.7. Интерпретация результатов:
a) реакция отрицательная: молоко окрашено, сметана не окрашена;
b) реакция положительная:
- молоко и сметана окрашены одинаково; или
- молоко не окрашено и сметана окрашена.
2.5. Проба с буферным бруцеллезным антигеном [проба с розовым Бенгалом (RBT)]
2.5.1. Антиген состоит из бактериальной эмульсии из разбавленного буферного бруцеллезного антигена с pH 3,65 ± 0,05, окрашенного розовым Бенгалом. Антиген берется готовым к употреблению и должен храниться при 4 °C. Не замораживать.
2.5.2. Антиген должен быть приготовлен без учета концентрации клеток, но чувствительность должна быть стандартизирована к сыворотке OIEISS, таким образом, чтобы антиген дал положительную реакцию с разбавленной сывороткой в соотношении 1/45 и отрицательную реакцию при разбавлении 1/55.
2.5.3. Проба RBT проводится следующим образом:
a) сыворотку (20-30 μл) смешивают с аналогичным объемом антигена в белой или эмалированной чашке для создания зоны диаметром примерно в 2 см. Смесь немного встряхивают в течение четырех минут при комнатной температуре, затем рассматривается при соответствующем свете для наблюдения за агглютинацией;
b) автоматический метод разрешается, но должен иметь такую же степень чувствительности и аккуратности, что и ручной метод.
2.5.4. Интерпретация результатов
Любая видимая реакция считается положительной, за исключением случая пересушивания вокруг краев.
В каждую серию проб включаются положительные и отрицательные эталонные сыворотки.
2.6. Сероагглютинирующая проба (SAT)
2.6.1. Антиген представляет собой бактериальную эмульсию, приготовленную на фенольно-солевом растворе [NaCl 0,85 % (м/о) и феноле 0,5 % (о/о)].
Не используется формальдегид.
Антигены можно брать в концентрированном виде, при условии, чтобы используемый коэффициент разбавления был указан на этикетке флакона.
К эмульсии антигена можно добавлять EDTA до получения конечного разбавления 5 мM для сокращения ложноположительных результатов реакции сероагглютинации. Затем pH следует снова довести до 7,2 в эмульсии антигена.
2.6.2. Сыворотка OIEISS содержит 1 000 международных агглютинирующих единиц.
2.6.3. Антиген должен быть приготовлен без учета концентрации клеток, но чувствительность должна быть стандартизирована к сыворотке OIEISS, таким образом, чтобы антиген дал положительную реакцию сыворотки
50 % при конечном разбавлении сыворотки 1/600-1/1 000 или агглютинацию в 75 % при конечном разбавлении сыворотки 1/500-1/750.
Рекомендуется сравнить реактивность новых партий антигена и ранее стандартизированных партий с помощью определенной группы сывороток.
2.6.4. Проба проводится в пробирках или на микропластинах. Смесь антигени и разбавлений сыворотки инкубируется при 37 °C в течение 16-24 часов.
Следует приготовить как минимум три разбавления для каждой сыворотки. Разбавления подозрительной сыворотки следует сделать таким образом, чтобы читка реакции в пределе положительности проводилась в средней пробирке (или в промежуточных отсеках в случае метода микропластин).
2.6.5. Интерпретация результатов:
Степень агглютинации Brucella в сыворотке выражается в МЕ на мл.
Сыворотка, содержащая 30 и более МЕ на мл, считается положительной.
2.7. Тест на оценку флуоресценции в полярном свете (FPA)
2.7.1. Тест FPA можно проводить в стеклянных пробирках или на пластине с 96 отсеками. Используемая техника, ее стандартизация и интерпретация результатов должны соответствовать тем, которые указаны в главе 2.4.3 (бруцеллез крупного рогатого скота) Руководства диагностических тестов и вакцин для наземных животных. Международное эпизоотическое бюро, издание шестое, 2008 г.
2.7.2. Стандартизация теста.
Проба FPA стандартизируется таким образом, чтобы:
a) сыворотки OIEELISASPSS и OIEELISAWPSS постоянно давали положительные результаты;
b) предварительное разбавление 1/8 сыворотки OIEELISAWPSS или предварительное разбавление 1/64 сыворотки OIEELISASPSS, в отрицательной сыворотке (или в смеси отрицательных сывороток) всегда давали отрицательную реакцию;
c) сыворотка OIEELISANSS всегда давали отрицательную реакцию.
В каждую партию включается: сильноположительная эталонная сыворотка, слабоположительная, отрицательная (калиброванная, исходя из эталонной сыворотки ELISA Международного эпизоотического бюро).
3. Дополнительные пробы
3.1. Кожная проба на бруцеллез (BST)
3.1.1. Условия использования BST
a) Кожную пробу на бруцеллез нельзя использовать для сертификации в целях международной торговли.
b) Кожная проба на бруцеллез – один из самых специфических тестов по выявлению бруцеллеза у не вакцинированных животных; вместе с тем, диагноз не следует ставить исключительно на основе положительных внутрикожных реакций.
c) Крупный рогатый скот, который получил отрицательный результат по одной из серологических проб, указанных в настоящем приложении, но положительную реакцию на BST, будет считаться инфицированным или с подозрением на инфекцию.
d) Крупный рогатый скот, который получил положительный результат по одной из серологических проб, указанных в настоящем приложении, может быть подвергнут тесту BST для подтверждения интерпретации результатов серологических проб; в частности, в случаях, когда нельзя исключить перекрестную реакцию с антителами против других бактерий в поголовьях крупного рогатого скота, свободных или официально свободных от бруцеллеза.
3.1.2. Пробу следует проводить используя стандартизированный и определенный аллергенный препарат, не содержащий плоский липополисахаридный антиген (LPS), поскольку он может вызвать неспецифические воспалительные реакции или интерферировать с дальнейшими серологическими пробами.
Требования к приготовлению бруцеллина должны соответствовать разделу C1 главы 2.4.3 Руководства по диагностическим тестам и вакцинам для наземных животных. Международное эпизоотическое бюро, издание шестое, 2008 г.
3.1.3. Процедура тестирования
3.1.3.1. Внутрикожно вводят 0,1 мл аллергена бруцеллеза в хвостовую складку, кожу крупа или в боковую часть шеи.
3.1.3.2. Пробу читают через 48-72 часа.
3.1.3.3. Толщину кожи в месте введения измеряют кутиметром, до введения и в момент повторного осмотра.
3.1.3.4. Интерпретация результатов:
Сильные реакции легко заметить по воспалению и уплотнению кожи на местном уровне.
Утолщение кожи на 1,5-2 мм считается показателем положительной реакции на BST.
3.2. Сравнительные иммуноферментные тесты (cELISA)
3.2.1. Условия использования cELISA-теста
cELISA-тест нельзя использовать для сертификации в целях торговли.
Крупный рогатый скот, у которого был положительный результат по одной из серологических проб, указанных в настоящем приложении, может быть подвергнут cELISA-тесту для подтверждения интерпретации остальных результатов серологических проб, в частности, в случаях, когда в поголовьях крупного рогатого скота, свободных или официально свободных от бруцеллеза, нельзя исключить перекрестную реакцию с антителами против других бактерий, или для устранения реакций, вызванных остаточными антителами, выработанными в результате вакцинации S19.
3.2.2. Процедура тестирования
Тест проводится в соответствии с предписанием, изложенным в пункте 2 раздела B главы 2.4.3 Руководства по диагностическим тестам и вакцинам для наземных животных. Международное эпизоотическое бюро, издание шестое, 2008 г.
4. Национальная базовая лаборатория
4.1. Обязанности и ответственность
Базовые национальные лаборатории отвечают за:
a) утверждение результатов подтверждающих исследований, показывающих надежность используемого в стране метода тестирования;
b) определение максимального количества проб, которые могут быть смешаны в используемых наборах ELISA;
c) калибровку эталонных сывороток, указанных в пункте 2.1.6;
d) качественные проверки всех антигенов и партий наборов ELISA, используемых в стране;
e) соблюдением рекомендаций базовых лабораторий Сообщества по бруцеллезу и сотрудничество с ними.
1) не существует подтверждений, клинических или полученных в результате лабораторных исследований, ни одного случая энзоотического лейкоза крупного рогатого скота в поголовье и такие случаи не подтвердились в течение последних двух лет; и
2) в течение последних 12 месяцев, все животные в возрасте более 24 месяцев отрицательно реагировали на два исследования, проведенные в соответствии с настоящим приложением, с промежутком не менее четырех месяцев; или
3) соответствует требованиям, предусмотренным в пункте 1), и расположено в стране или в регионе, официально свободных от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота.
2. Статус поголовья, официально свободного от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, сохраняется, если:
продолжают выполняться условия, предусмотренные в подпункте 1) пункта 1;
1) животные, вводимые в поголовье, происходят из поголовья, официально свободного энзоотического лейкоза крупного рогатого скота;
2) все животные в возрасте более 24 месяцев продолжают отрицательно реагировать на пробы, проведенные, в соответствии с главой II, с промежутками в три года;
3) животные для репродукции, введенные в поголовье, которые происходят из другой страны, завезены в соответствии с положениями Постановления Правительства № 189/2014 об утверждении Ветеринарно-санитарной нормы о состоянии здоровья животных при импорте и транзите определенных живых копытных животных.
3. Статус официально свободного от лейкоза поголовья приостанавливается при невыполнении условий, указанных в пункте 2, или в случае, когда на основании результатов лабораторных исследований или из клинических соображений одно или более животных подозрительны на энзоотический лейкоз крупного рогатого скота и немедленно забиты.
4. Статус остается приостановленным до выполнения следующих требований:
1) если только одно животное из поголовья, официально свободного от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, положительно реагировало на одну из проб, предусмотренных в настоящей Норме, или в случае, когда есть одно животное с подозрением на инфекцию в поголовье:
a) животное, положительно реагирующее, а в случае коровы все полученные от нее телята исключены из поголовья только путем убоя под надзором ветеринарного органа;
b) все животные поголовья в возрасте более 12 месяцев отрицательно реагировали на два серологических исследования (с промежутком не менее 4 и не более 12 месяцев), проведенные, согласно главе II, не ранее чем через три месяца после выведения из поголовья положительно реагирующего животного и полученного от него потомства;
c) проведена эпидемиологическая анкета с отрицательным результатом, и все поголовье, эпидемически связанное с зараженным поголовьем, было подвергнуто мерам, предусмотренным в подпункте b).
Вместе с тем компетентный орган может предоставить отступление от обязательного убоя теленка, полученного от зараженной коровы, если он сразу после рождения был отделен от матери. В таком случае применяются требования, предусмотренные в литере с) подпункта 2);
2) в случае если более чем одно животное из поголовья, официально свободного от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, отреагировало положительно на один из тестов, предусмотренных в главе II, или когда инфекция подозревается более чем у одного животного из поголовья:
а) все положительно реагирующие животные, а для коров – и полученные от них телята должны быть исключены из поголовья и забиты под надзором ветеринарных органов;
b) все животные из поголовья в возрасте более 12 месяцев должны отрицательно реагировать на две пробы, проведенные, в соответствии с положениями настоящей Нормы, с промежутком не менее 4 и не более 12 месяцев;
c) после идентификации все остальные животные поголовья должны оставаться в поголовье до возраста более 24 месяцев и до исследования в соответствии с положениями настоящей Нормы, а после достижения данного возраста компетентный орган может разрешить отправку животных прямо на убой под официальным надзором;
d) проведено эпидемиологическое исследование с отрицательным результатом, и все поголовье, подозреваемое в связи с зараженным поголовьем, было подвергнуто мерам, предусмотренным в литере b).
Вместе с тем компетентный орган может сделать отступление от обязательного убоя теленка, полученного от зараженной коровы, если он сразу после рождения был отделен от матери. В таком случае применяются требования, предусмотренные в литере с) подпункта 2.
5. Страна или регион считается свободным от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота на основе информации, предоставленной в соответствии с пунктом 16 настоящей Нормы, в случае если:
1) выполнены все условия, предусмотренные в пункте 1, и не менее 99,8 % поголовий крупного рогатого скота официально свободны от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота; или
2) в течение последних трех лет не были подтверждены случаи энзоотического лейкоза крупного рогатого скота в стране или на части ее территории, а уведомление о подозрительных опухолях ЭЛКРС является обязательным, c последующим проведением исследований на предмет причин данных опухолей, и:
а) в случае страны, все животные в возрасте более 24 месяцев не менее чем из 10 % случайно выбранных поголовий отрицательно реагировали на пробы, проведенные, в соответствии с положениями настоящей Нормы, в течение последних 24 месяцев, или
b) в случае части территории государства-участника, все животные в возрасте более 24 месяцев отрицательно реагировали на пробы, проведенные, в соответствии с положениями настоящей Нормы, в течение последних
24 месяцев; или
3) любой другой метод показывает, с долей вероятности 99 %, инфицирование менее 0,2 % поголовий.
6. Страна или ее часть сохраняет статус официально свободной от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, если:
1) все животные, забитые на территории страны или в регионе данной страны, подвергаются официальному послеубойному исследованию, и все опухоли, которые могли быть вызваны вирусом ЭЛКРС, отправляются в лабораторию для исследования;
2) компетентный орган информирует международные организации, стороной которых является, о случаях энзоотического лейкоза крупного рогатого скота;
3) все животные, положительно реагирующие на любой из тестов, предусмотренных в настоящей Норме, забиты, а поголовья, откуда они происходят, по-прежнему находятся под запретом до пересмотра их статуса в соответствии с пунктом 4;
4) все животные в возрасте более двух лет были исследованы в первые пять лет после получения статуса в соответствии с положениями настоящей Нормы или в течение первых пяти лет после получения статуса были исследованы на основе процедуры, доказывающей с точностью до 99%, что менее 0,2% поголовий заражено. При этом, если в течение, по меньшей мере, трех лет в стране или в регионе страны не был зарегистрирован ни один случай энзоотического лейкоза крупного рогатого скота в 10-тысячном поголовье, можно принять решение о сокращении обычных серологических исследований при условии, что все животные в возрасте более 12 месяцев из не менее 1% поголовий, отбирающихся ежегодно случайным методом, подвергались исследованию в соответствии с положениями настоящей Нормы.
7. Статус официально свободной от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота страны или части ее территории приостанавливается, если в результате исследований, проведенных в соответствии с пунктом 6, имеются доказательства существенного изменения ситуации по энзоотическому лейкозу крупного рогатого скота в стране или на части ее территории, которые признаны официально свободными от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота.
Статус официально свободного от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота может быть пересмотрен при соблюдении критериев, предусмотренных той же процедурой.
Пробы AGID и ELISA стандартизируются по отношению к сыворотке E05, официальной стандартной сыворотке ЕС, которая поставляется: Friedrich-Loeffler-Institut, Federal Research Institute for Animal Health, базовой лабораторией МЭБ по энзоотическому лейкозу крупного рогатого скота (ЭЛКРС), Südufer 10, 17493 Greifswald – Insel Riems, Германия.
1. Иммунодиффузное исследование в агаровом геле на энзоотический лейкоз крупного рогатого скота
1) Антиген, используемый для данного исследования, должен содержать гликопротеин вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота. Антиген стандартизируется к стандартной сыворотке E05.
2) Государственные институты, базовые национальные лаборатории или официально назначенные институты, в соответствии с положениями пункта 14 настоящей Нормы, для координации стандартов и методов диагностики в отношении исследований на выявление энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, несут ответственность за калибровку рабочего стандартного антигена лаборатории в сравнении с сывороткой E05.
3) Стандартные антигены, используемые в лаборатории, должны быть отправлены не реже одного раза в государственные институты, базовые национальные лаборатории или официально назначенные институты, в соответствии с положениями пункта 16 настоящей Нормы, для исследования в сравнении с сывороткой E05. Помимо такой стандартизации, антиген для исследования может быть калиброван в соответствии с методом, изложенным в пункте 2.
4) При исследовании используются следующие реактивы:
a) антиген: гликопротеин вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, стандартизированный к сыворотке E05;
b) исследуемая сыворотка;
c) известная положительная контрольная сыворотка;
d) агаровый гель:
- 0,8 % агара;
- 8,5 % NaCl;
- буфер Tris 0,05 M, pH 7,2;
- 15 мл такого геля должен быть разлит в чашки Петри диаметром 85 мм, чтобы толщина агара составила 2,6 мм.
5) Создается конфигурация для исследования в виде семи лунок путем врезания в толщу агара до дна чашки; одна центральная лунка и шесть лунок, расположенных по кругу вокруг нее.
Диаметр центральной лунки – 4 мм, диаметр периферических лунок – 6 мм, расстояние между центральной и периферическими лунками – 3 мм.
6) Центральная лунка наполняется стандартным антигеном. Периферические лунки 1 и 4, указанные в подпункте 3) пункта 2, наполняются известной положительной сывороткой; лунки 2, 3, 5 и 6 наполняются исследуемой сывороткой. Лунки заполняются до исчезновения мениски (верхнего края).
7) Получаются следующие объемы:
- антиген: 32 μл;
- контрольная сыворотка: 73 μл;
- исследуемая сыворотка: 73 μл.
8) Инкубация длится 72 часа при температуре воздуха (20-27 °C) в закрытом влажном помещении.
9) Реакция читается через 24 часа, затем через 48 часов, но нельзя получить ни одного конечного результата раньше чем через 72 часа:
a) исследуемая сыворотка является положительной, если образуется специфическая линия преципитации с антигеном вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота (ЭЛКРС) и формируется линия, совпадающая с линией контрольной сыворотки;
b) исследуемая сыворотка является отрицательной, если не образуется специфической линии преципитации с антигеном вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота и не изменяется кривая линия контрольной сыворотки;
c) реакцию нельзя считать убедительной, если:
- линия контрольной сыворотки в сторону луночки с антигеном вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота изгибается и не образуется линия видимой преципитации с антигеном; или
- невозможна положительная или отрицательная интерпретация.
В случае сомнительных реакций исследование можно повторить и использовать концентрированную сыворотку.
10) Можно использовать любой другой штамп или любое другое расположение луночек, при условии, чтобы сыворотка E05, разбавленная 1:10 с отрицательной сывороткой, могла идентифицироваться как положительная.
2. Метод стандартизации антигена
1. Необходимые растворы и материалы:
a) 40 мл 1,6 % агара на буфере Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 и NaCl 85 %;
b) 15 мл положительной сыворотки крупного рогатого скота с энзоотическим лейкозом, содержащей антитела лишь к гликопротеинам вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, разбавленной в соотношении 1:10 с буфером Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 и NaCl 8,5 %;
c) 15 мл положительной сыворотки к лейкозу крупного рогатого скота с энзоотическим лейкозом, содержащей антитела лишь к гликопротеинами вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, разбавленной в соотношении 1:5 с буфером Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 и NaCl 8,5 %;
b) четыре пластмассовых чашки Петри диаметром 85 мм;
c) перфоратор диаметром 4-6 мм;
d) антиген-эталон;
e) антиген, который должен быть стандартизирован;
f) водяная баня (56 °C).
2) Процедура:
Агар (1,6 %) растворяется в буферном растворе Tris/HCl, осторожно подогревая до 100 °C. Используется водяная баня при 56 °C в течение примерно одного часа. Добавляются растворы положительной сыворотки к лейкозу крупного рогатого скота в водяную баню при 56 °C.
Затем смешиваются 15 мл агарного раствора при 56 °C с 15 мл положительной сыворотки к лейкозу крупного рогатого скота (1:10), быстро встряхивается и выливается в две чашки Петри, по 15 мл в каждую. Вышеперечисленные операции снова начинаются с сывороткой лейкоза крупного рогатого скота, разбавленной 1:5.
После затвердения агара лунки готовятся следующим образом
3. Добавление антигена:
a) чашки Петри № 1 и 3:
- лунка A – неразбавленный антиген, эталон;
- лунка B – разбавленный 1:2 антиген - эталон;
- лунки C и E – антигены-эталоны;
- лунка D – неразбавленный исследуемый антиген;
b) чашки Петри № 2 и 4:
- лунка A – неразбавленный исследуемый антиген;
- лунка B – разбавленный 1:2 исследуемый антиген;
- лунка C – разбавленный 1:4 исследуемый антиген;
- лунка D – разбавленный 1:8 исследуемый антиген.
4) Дополнительные указания:
a) в целях получения оптимальной преципитации опыт должен проводиться с сывороткой в 2 разбавлениях (1:5 и 1:10);
b) если диаметр преципитации слишком маленький в обоих разбавлениях сыворотку следует разбавить дополнительно;
c) Если диаметр преципитации слишком большой или невыраженный, в обоих разбавлениях должны выбрать меньшую степень разбавления сыворотки;
d) конечная концентрация агара должна быть 0,8%, сывороток - 5% и соответственно 10%;
e) записываются диаметры, определенные по следующей системе координат. Рабочее разбавление - то, которое показало одинаковый диаметр исследуемого антигенов и антигена-эталона.
3. Иммуноферментный тест (ELISA) для выявления энзоотического лейкоза крупного рогатого скота
1) Используются следующие материалы и реактивы:
a) твердофазные микропластинки, кюветки или другая любая твердая основа;
b) антиген, фиксируемый в твердой фазе с или без помощи фиксирующих моноклональных или поликлональных антител. Если антиген прикреплен прямо к твердой фазе, все исследуемые пробы, дающие положительную реакцию, должны быть исследованы против контрольного антигена. Контрольный антиген должен быть идентичным с исследуемым антигеном, исключая антигены вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота. Если фиксирующие антитела ассоциированы с твердой фазой, то антитела не должны вступать в реакцию с другими антителами, кроме антител к ЭЛКРС;
c) исследуемая биологическая жидкость;
d) соответствующий положительный и отрицательный контроль;
e) конъюгат;
f) субстрат, приспособленный к используемому ферменту;
g) ингибирующий раствор, при необходимости;
h) растворы для разбавления исследуемых проб, для приготовления реактивов и для мытья;
i) система читки, соответствующая используемому субстрату.
2) Стандартизация и чувствительность теста
Чувствительность ELISA-теста должна быть на таком уровне, чтобы сыворотка Е05, будучи оценена при 10-кратном разбавлении, показала положительную реакцию (для проб сыворотки) или в 250 раз больше в сравнении с полученными разбавлениями, начиная со сборных проб (для проб молока). В исследованиях, в которых пробы (сыворотка и молоко) исследуются отдельно, сыворотка Е05 при разбавлении 1:10 (для отрицательной сыворотки) или 1:250 (для отрицательного молока) должна показать положительную реакцию, когда исследуется при том же рабочем разбавлении, что и при индивидуальном исследовании. Институты, указанные в подпункте 2 пункта 1, отвечают за проверку качества ELISA-метода, в частности, для определения в каждой партии продукции количества проб, взятых вместе, в зависимости от титра, полученного для сыворотки Е05.
3) Условия использования ELISA-теста для выявления энзоотического лейкоза крупного рогатого скота:
a) ELISA –тесты могут использоваться на пробах сыворотки или молока;
b) если ELISA-тесты используются в целях сертификации в соответствии с положениями подпункта 3) пункта 14 настоящей Нормы или для присвоения и сохранения статуса поголовья в соответствии с частью I настоящего приложения, смесь проб сыворотки или молока выполняется таким образом, чтобы взятые для исследования пробы можно было однозначно отнести к отдельным животным, от которых происходит включенная в смесь сыворотка или молоко. Любое подтверждающее исследование проводится на пробах, взятых от отдельных животных;
c) при использовании ELISA-тестов на пробе разливного молока, эта проба берется из молока, которое происходит из поголовий, в которых не менее 30 % молочных коров находятся в лактационном периоде. Любое подтверждающее исследование проводится на пробах сыворотки или молока, взятых от отдельных животных.
приложение № 5
2013 г., № 125-129, ст. 396) Правительство ПОСТАНОВЛЯЕТ:
1. Утвердить Ветеринарно-санитарную норму о требованиях к здоровью и сертификации животных при торговле (импорте и экспорте) крупным рогатым скотом и свиньями согласно приложению.
2. Контроль за исполнением настоящего постановления возложить на Национальное агентство по безопасности пищевых продуктов.
3. Настоящее постановление вступает в силу со дня опубликования.
ПРЕМЬЕР-МИНИСТР Павел ФИЛИП
№ 913. Кишинэу, 24 сентября 2018 г.
Приложение
к Постановлению Правительства
№ 913/2018
к Постановлению Правительства
№ 913/2018
ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ НОРМА
о требованиях к здоровью и сертификации
животных при торговле (импорте и экспорте)
крупным рогатым скотом и свиньями
Ветеринарно-санитарная норма о требованиях к здоровью и сертификации животных при торговле (импорте и экспорте) крупным рогатым скотом и свиньями (в дальнейшем – Норма) перелагает положения Директивы 64/432/ЕЭС от 26 июня 1964 г. о проблемах ветеринарной проверки, затрагивающих торговлю в Сообществе крупным рогатым скотом и свиньями, опубликованной в Официальном журнале Европейского Союза, серия P 121, от 29 июля 1964 г., п.1977, согласно последнему изменению (61-му), внесенному Решением о применении (ЕС) 2015/819 Комиссии, опубликованному в Официальном журнале Европейского Союза, 2015 г., серия L 129, стр. 28.о требованиях к здоровью и сертификации
животных при торговле (импорте и экспорте)
крупным рогатым скотом и свиньями
Глава I
ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
1. Настоящая Норма устанавливает требования к здоровью и ветеринарной сертификации при импорте и экспорте крупного рогатого скота и свиней, за исключением дикого кабана.ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
2. Настоящая Норма не затрагивает норм, которые применяются постоянно к декоративным домашним животным, если они не влияют на устранение ветеринарно-санитарных проверок на границе.
3. Требования к здоровью животных, указанные в пункте 2 настоящей Нормы, подлежащие соблюдению, установлены в следующих нормативных актах:
1) Ветеринарно-санитарная норма о здоровье животных при импорте репродуктивного материала крупного рогатого скота, которая частично перелагает Директиву Совета № 88/407/ЕЕС от 14 июня 1988 г., устанавливающую требования, применяемые к торговле внутри Сообщества и импорту репродуктивного материала крупного рогатого скота (JO L194, 22 июля 1988 г., стр. 10), с последним изменением, внесенным Решением Комиссии о внедрении № 2011/629/ЕС от 20 сентября 2011 года (JO L 247, 24 сентября 2011 г., стр. 2), утвержденная Постановлением Правительства № 1297/2016 об утверждении Ветеринарно-санитарных норм о здоровье животных при импорте репродуктивного материала;
2) Ветеринарно-санитарная норма о здоровье животных при импорте репродуктивного материала свиней, которая частично излагает Директиву Совета от 26 июня
1990 года, устанавливающую требования о состоянии здоровья, применимые к торговле внутри Сообщества и импорту репродуктивного материала домашних свиней (90/429/EEC) (JO L 224, 18 августа 1990 г., стр. 62), с последними изменениями, внесенными Регламентом по применению (ЕС) № 176/2012 Комиссии от 1 марта
2012 г. (JO L 61, стр. 1 от 2 марта 2012 г.), утвержденная Постановлением Правительства № 1297/2016 об утверждении Ветеринарно-санитарных норм о здоровье животных при импорте репродуктивного материала;
3) Постановление Правительства № 189/2014 об утверждении Ветеринарно-санитарной нормы о состоянии здоровья животных при импорте и транзите определенных живых копытных животных, приведенное в соответствие с Директивой № 2004/68/ЕС Совета от 26 апреля 2004 г., устанавливающей нормы здоровья животных при импорте и транзите через Сообщество некоторых видов живых копытных животных, которая вносит изменения в Директивы 90/426/ЕЕС и 92/65/ЕЕС и отменяет
Директиву 72/462/ЕЕС.
4. В целях настоящей Нормы применяются следующие понятия:
поголовье – животное или группа животных, содержащихся на одном объекте, которая считается эпидемиологической единицей, а в случае если на одном объекте содержится несколько поголовий, они должны составлять отдельную единицу, с одинаковым статусом здоровья животных;
животное для убоя – животное вида крупного рогатого скота (включая виды Bison bison и Bubalus bubalus) или вида свиней, прямо или косвенно перевозимое через заготовительный центр или убойное предприятие;
животное для выращивания или для производства – животное вида крупного рогатого скота (включая виды Bison bison и Bubalus bubalus) и вида свиней, главным образом, предназначенные для выращивания, производства молока или мяса либо работы, для участия в конкурсах и выставках, за исключением животных, участвующих в культурных и спортивных мероприятиях;
болезни, подлежащие обязательному уведомлению – болезни, подлежащие обязательному уведомлению, указанные в настоящей Норме, перечисленные в подпункте 1) пункта 18 настоящей Нормы.
Глава II
ОБЩИЕ ТРЕБОВАНИЯ
5. Допускается импорт и экспорт только животных, соответствующих требованиям, установленным настоящей Нормой.ОБЩИЕ ТРЕБОВАНИЯ
6. Животные вида крупного рогатого скота и свиней должны:
1) подвергаться официально проверке по идентификации и клиническому осмотру ветеринарным врачом за 24 часа до отправки, а осмотр должен показать отсутствие любого клинического признака болезни;
2) не приниматься на объект или территорию, на которую наложены запрет или ограничение в отношении данного вида;
3) идентифицироваться согласно положениям части 3 главы I Положения о процедурах и документах, касающихся Системы идентификации и прослеживаемости животных, утвержденного Постановлением Правительства № 507/2012 об утверждении норм по идентификации и прослеживаемости животных;
4) не быть животными для убоя и не подвергаться ограничениям на здоровье животных в рамках программы по искоренению заразных или инфекционных болезней;
5) после выбытия с объекта происхождения и до прибытия в место назначения на территории страны не вступать в контакт с другими парнокопытными животными, не имеющими такого же статуса здоровья животных;
6) отправляться транспортными средствами, которые соответствуют требованиям приложения № 1 к Ветеринарно-санитарной норме о защите и благополучии животных во время перевозки, утвержденной Постановлением Правительства № 793/2012;
7) отправляться с объектов с помещениями, где проводится уборка и дезинфекция;
8) сопровождаться во время перевозки к своему месту назначения ветеринарно-санитарным сертификатом – сертификатом о состоянии здоровья животных, оформленным в соответствии с образцами, приведенным в приложении № 5 к настоящей Норме.
7. Ветеринарно-санитарный сертификат, образец которого прилагается к настоящей Норме:
1) должен содержать один лист или, в случае когда необходимо несколько страниц, они должны размещаться таким образом, чтобы каждая пара или группа страниц входила в неделимое целое, и серийный номер;
2) должен составляться в день проведения ветеринарно-санитарной проверки, по меньшей мере на одном из официальных языков страны назначения, или иметь его удостоверенный перевод;
3) быть действительным в течение 10 дней со дня проверки здоровья животных.
8. Проверки здоровья животных для выдачи сертификата о состоянии здоровья (включая дополнительные гарантии) на партию животных могут проводиться на объекте происхождения или в заготовительном центре.
Ветеринарно-санитарный сертификат составляется официальным ветеринарным врачом в результате инспекций, визитов и проверок, предусмотренных настоящей Нормой.
9. Для животных, поступающих из заготовительных центров, авторизованных согласно статье 18 Закона 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности, с внесением разрешительного документа в перечень разрешительных документов, установленный Законом № 160/20011 о регулировании предпринимательской деятельности путем разрешения, ветеринарно-санитарный сертификат составляется согласно образцам, приведенным в настоящей Норме:
1) на основе необходимых сведений, предусмотренных образцом ветеринарно-санитарного сертификата, представленных официальным ветеринарным врачом, ответственным за объект происхождения; или
2) на основе ветеринарно-санитарного сертификата, заполненного официальным ветеринарным врачом, ответственным за объект происхождения.
10. В случае когда была введена система электронного сетевого контроля для животных, которые происходят с объекта, включенного в указанную систему, ветеринарно-санитарный сертификат составляется:
1) на основе информации из системы, заполняемой уполномоченным ветеринарным врачом, ответственным за объект происхождения, предусмотренной в части 4 главы II Положения о процедурах и документах, касающихся Системы идентификации и прослеживаемости животных, утвержденного Постановлением Правительства № 507/2012;
2) на основе типового ветеринарно-санитарного сертификата, заполненного, по необходимости, с соблюдением требований, касающихся здоровья и благополучия животных.
11. Официальный ветеринарный врач, ответственный за заготовительный центр:
1) проводит все необходимые проверки животных сразу же после их прибытия;
2) заполняет ветеринарно-санитарный сертификат согласно образцу, установленному в приложении № 5 к настоящей Норме;
3) обеспечивает регистрацию животных в системе ANIMO в день выдачи ветеринарно-санитарного сертификата.
12. Допускается прохождение через заготовительный центр, расположенный на территории другой страны, животных, сопровождаемых ветеринарно-санитарным сертификатом, заполненным официальным ответственным ветеринарным врачом страны происхождения животных, с предварительным уведомлением через информационную систему TRACES не менее чем за 24 часа до запланированной операции.
Официальный ветеринарный врач, ответственный за заготовительный центр, выдает второй сертификат или удостоверенную копию, аналогичную ветеринарно-санитарному сертификату, где указан серийный номер оригинала сертификата, и который прилагается им к оригиналу сертификата без изменения срока действия.
Глава III
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ
13. Помимо общих требований, указанных в главе II настоящей Нормы, животные для откорма и производства должны:СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ
1) оставаться на одном объекте в течение 30 дней перед отправкой или после рождения, если они моложе 30 дней, на объекте происхождения. Официальный ветеринарный врач должен на основе идентификации и официальных документов быть уверен, что животные соответствовали этому условию и что, кроме этого, они происходят из одной страны или были ввезены из одной страны;
2) в случае животных, которые проходят через авторизованный заготовительный центр, расположенный в стране происхождения, срок заготовки соответствующих животных вне объекта происхождения не должен превышать шести дней:
a) животные, ввезенные из страны, которая не является их конечной страной назначения, должны быть отправлены на территорию страны назначения в кратчайший срок на основании ветеринарно-санитарного сертификата;
b) в случае импортных животных, при их прибытии в место назначения и перед любым другим перемещением, должны выполнятся требования настоящей Нормы и, в частности, обязанность пребывания, предусмотренная в подпункте 1) настоящего пункта, а животные не могут вводиться в поголовье до того, как ветеринарный врач, ответственный за данный объект, убедится, что данные животные не способны создать угрозу состоянию здоровья объекта;
3) в случае введения животного на объект ни одно животное с данного объекта нельзя продавать в течение 30 дней после его введения, за исключением случая, когда импортное животное полностью изолировано от остальных животных объекта.
14. Помимо общих требований, указанных в главе II настоящей Нормы, животные для выращивания и производства вида крупного рогатого скота должны:
1) происходить из поголовья крупного рогатого скота, официально свободного от туберкулеза, и, в случае животных старше 6 недель, показать отрицательные результаты на кожную туберкулиновую пробу, проведенную в течение 30 дней до выбытия из поголовья происхождения, за исключением внутрикожной туберкулиновой пробы в случае, когда животные происходят из страны или части территории страны, признанной официально свободной от туберкулеза, или из страны, которая входит в признанную сеть контроля;
2) в случае некастрированных животных, которые происходят из объекта крупного рогатого скота, официально свободного от бруцеллеза, и их возраст составляет более 12 месяцев, показать титр Brucella менее 30 международных агглютинирующих единиц на миллилитр при реакции сероагглютинации или на любую международно признанную пробу, проведенную в течение 30 дней, предшествующих выбытию из поголовья происхождения, и, согласно положениям, предусмотренным в приложении № 3 к настоящей Норме, за исключением сероагглютинации или любой пробы в случае, когда животные происходят из страны или из части территории этой страны, официально признанной свободной от бруцеллеза или входящей в признанную сеть контроля;
3) происходить из объекта, официально свободного от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, и, в случае животных старше 12 месяцев, давать отрицательную реакцию на индивидуальную пробу, проведенную в течение 30 дней, предшествующих выбытию из поголовья происхождения, согласно положениям, указанным в приложении № 4 к настоящей Норме, за исключением указанной в настоящем подпункте пробы в случае, когда животные происходят из страны или из части территории этой страны, официально признанной свободной от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота или входящей в признанную сеть контроля;
4) ни разу после их выбытия с объекта происхождения и до прибытия в место назначения на территории страны не вступать в контакт с животными, которые соответствуют только требованиям пункта 15 настоящей Нормы;
15. Помимо общих требований, указанных в главе II настоящей Нормы, животные для убоя вида крупного рогатого скота должны происходить из поголовья, официально свободного от туберкулеза или энзоотического лейкоза крупного рогатого скота и, в случае некастрированного крупного рогатого скота, происходить из поголовья, официально свободного от бруцеллеза.
16. Публичное учреждение «Республиканский ветеринарно-диагностический центр» в качестве национальной референтной лаборатории в области ветеринарии и безопасности пищевых продуктов, административно и технически подведомственной Национальному агентству по безопасности пищевых продуктов, назначенной в соответствии с положениями Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности, координирует стандарты и методы диагностики, указанные в настоящей Норме, внедряет и обновляет их перечни, обнародует их.
17. Животные для убоя, которые по прибытии в страну назначения между прибытием в заготовительный центр и прибытием на убойное предприятие не должны вступать в контакт с парнокопытными животными, кроме тех, которые отвечают условиям настоящей Нормы, и отправляются:
1) на убойное предприятие – должны быть подвергнуты убою в кратчайший срок или не более чем через 72 часа после прибытия;
2) в заготовительный центр – должны быть отправлены после покупки на убойное предприятие и подвергнуты убою в кратчайший срок, через три дня после их прибытия в заготовительный центр.
18. Компетентный ветеринарно-санитарный орган:
1) обеспечивает, чтобы любое подозрение на наличие болезни, указанной в настоящем подпункте, подлежало немедленному обязательному уведомлению в следующем порядке:
a) болезни крупного рогатого скота: ящур, бешенство, туберкулез, бруцеллез, контагиозная плевропневмония крупного рогатого скота, энзоотический лейкоз крупного рогатого скота, сибирская язва;
b) болезни свиней: бешенство, бруцеллез, классическая чума свиней, африканская чума свиней, ящур, везикулярная болезнь свиней, сибирская язва;
2) ежегодно передает международным организациям, в которые он входит, подробный итоговый отчет о случаях болезней, предусмотренных в пунктах а) и b) 18 настоящего пункта, или любой другой болезни, подлежащей дополнительным гарантиям, а также подробный итоговый отчет о проводимых программах контроля или искоренения.
19. В случае, когда Национальное агентство по безопасности пищевых продуктов располагает обязательной национальной Программой по борьбе с заразными болезнями (болезнь Ауески, ринотрахеит крупного рогатого скота, инфекция Brucella suis, трансмиссивный гастроэнтерит) для всей территории страны или для ее части и представляет ее в международные организации, в которые входит, с указыванием, в частности:
a) состояния болезни на своей территории;
b) обоснования программы, с учетом важности болезни и ожидаемых от программы преимуществ в соотношении с ее стоимостью;
c) географической территории, на которой будет применяться программа;
d) различных статусов, применяемых к объектам, и стандартов, которые должны соблюдаться в каждой категории, а также процедур исследования;
e) процедур контроля этой программы, результаты которых должны передаваться международным организациям, в которые оно входит, не реже одного раза в год;
f) последствия потери статуса объекта по причине здоровья животных;
g) мер, которые должны быть приняты в случае положительных результатов, установленных во время проверок, проведенных согласно положениям программы.
В случае внешней торговли программы, указанные в настоящем пункте, дополнительные гарантии, общие или ограниченные, должны быть эквивалентны тем, которые применяются на национальном уровне.
Компетентный ветеринарно-санитарный орган утверждает и сообщает международным организациям, в которые он входит (МЭБ), изменения и дополнения к ранее разработанным программам.
20. В случае, когда страна считается полностью или частично свободной от одной из болезней, перечисленных в пункте 19 настоящей Нормы, представляет доказательства международным организациям, в которые входят, в частности:
a) природа болезни и история ее возникновения на своей территории;
b) результаты контрольных проб, основанных на серологическом, микробиологическом, патологическом или эпидемиологическом исследовании, и на том, что речь идет о болезни, подлежащей обязательному уведомлению;
c) продолжительность проведенной проверки;
d) возможный период времени, в течение которого была запрещена вакцинация от болезни, и географическая территория, где применялся данный запрет;
e) правила, позволяющие контролировать отсутствие болезни.
Доказательства, указанные в настоящем пункте, дополнительные, общие или ограниченные гарантии применяются и в случае внешней торговли;
f) доказательства, касающиеся болезни, в частности любого нового возникновения болезни, и необходимые изменения и дополнения, в зависимости от ранее сообщенной информации.
Глава IV
ТРЕБОВАНИЯ К ЗАГОТОВИТЕЛЬНЫМ ЦЕНТРАМ
21. Заготовительные центры по накоплению, содержанию, при необходимости, проведению лечения или лабораторных исследований, в течение ограниченного времени, независимо от использования крупного рогатого скота и свиней, должны быть авторизованы компетентным ветеринарно-санитарным органом на основании Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности, Закона № 412/1999 о животноводстве, разрешительный документ включен в Перечень разрешительных документов Закона № 160/2011 о регулировании предпринимательской деятельности путем разрешения и соответствовать требованиям, указанным в настоящей главе.ТРЕБОВАНИЯ К ЗАГОТОВИТЕЛЬНЫМ ЦЕНТРАМ
22. Заготовительные центры должны:
1) находиться под контролем официального ветеринарного врача, который обеспечивает, в частности, соблюдение положений, указанных в подпунктах e)-f) пункта 6 настоящей Нормы;
2) находиться на территории, на которую не наложен запрет или ограничение по причине состояния здоровья и благополучия животных;
3) подвергаться предварительной уборке и дезинфекции перед каждым использованием согласно указаниям официального ветеринарного врача;
4) в зависимости от возможности размещения иметь:
a) оснащение, предназначенное исключительно для этой цели;
b) установки для погрузки и выгрузки животных, их соответствующего размещения, поения и кормления, для проведения любого необходимого лечения; эти установки должны легко чиститься и дезинфицироваться;
с) инфраструктуру для осмотра;
d) инфраструктуру для изоляции;
e) оборудование для чистки и дезинфекции помещений и грузовиков;
f) площадку для складирования кормов, подстилок и навоза;
g) систему сбора сточных вод;
h) кабинет или специальное помещение для официального ветеринарного врача;
5) допускать только идентифицированных животных, происходящих из поголовий, официально свободных от туберкулеза, бруцеллеза и лейкоза, животных для убоя, которые соответствуют условиям, установленным в настоящей Норме и, в частности, предусмотренным в пункте 13 настоящей Нормы, при условии, что владелец или ответственный работник центра проверяет или назначает проверку идентификационных марок животных и документов о состоянии здоровья или других сопроводительных документов, свойственных данным видам или категориям;
6) соблюдать положения Постановления Правительства № 793/2012 об утверждении Ветеринарно-санитарной нормы о защите и благополучии животных во время перевозки;
7) подвергаться регулярным проверкам для подтверждения дальнейшего соответствия условиям авторизации согласно положениям Закона 131/2012 о государственном контроле предпринимательской деятельности.
23. Владелец или ответственное лицо заготовительного центра на основании сопроводительного документа либо идентификационных номеров или марок животных вносит в журнал или на электронный носитель и хранит в течение не менее трех лет следующую информацию:
а) имя владельца, происхождение, дату завоза и вывоза, идентификационный номер крупного рогатого скота, регистрационный номер объекта происхождения или поголовья происхождения свиней, завезенных в центр, и предлагаемое назначение;
b) регистрационный номер перевозчика и номер ветеринарно-санитарного разрешения на деятельность грузового транспорта, которым осуществляется погрузка или разгрузка животных в центре, выданного компетентным ветеринарно-санитарным органом в соответствии с положениями Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности.
24. Компетентный ветеринарно-санитарный орган:
1) присваивает номер авторизации каждому заготовительному центру, который может быть ограничен определенным видом, животными для выращивания или производства, либо животными, предназначенными для убоя;
2) составляет и поддерживает в обновленном виде перечень заготовительных центров и номеров их авторизации и предоставляет его общественности;
3) приостанавливает или изымает авторизацию в случае несоблюдения настоящей Нормы, Постановления Правительства № 793/ 2012 об утверждении Ветеринарно-санитарной нормы о защите и благополучии животных во время перевозки, а также других правил, связанных с состоянием здоровья и благополучием животных при импорте крупного рогатого скота и свиней, на основании Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности, Закона № 113/2012 об установлении общих принципов и предписаний законодательства о безопасности пищевых продуктов, Закона № 50/2013 об официальном контроле с целью проверки соответствия кормовому и пищевому законодательству и правилам, касающимся здоровья и благополучия животных, Закона № 131/2012 о государственном контроле предпринимательской деятельности, Закона № 235/2006 об основных принципах регулирования предпринимательской деятельности;
4) повторно выдает авторизацию в случае полного соблюдения заготовительным центром всех положений, указанных в настоящей Норме;
5) проверяет наличие в заготовительных центрах официальных ветеринарных врачей для выполнения всех возложенных на них задач.
25. Перевозчики животных должны соблюдать следующие дополнительные условия:
1) использовать транспортные средства, которые:
a) построены таким образом, чтобы фекалии животных, подстилка или корм не вытекали или выпадали из транспортного средства; и
b) подвергались чистке и дезинфекции сразу же после каждой перевозки животных или любой продукции, способной отрицательно повлиять на здоровье животных, используя дезинфицирующие средства, зарегистрированные в соответствии с положениями статей 37-3712 Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности;
2) иметь установки по чистке и дезинфекции, в том числе условия для хранения подстилки или навоза;
3) предъявлять документы, подтверждающие проведение этих операций третьей стороной;
4) обеспечить наличие у каждого транспортного средства, используемого для перевозки животных, журнала, содержащего, по меньшей мере, следующие сведения, которые хранятся не менее трех лет:
a) место, дата и время загрузки, фамилия или наименование и адрес объекта или заготовительного центра, откуда загружаются животные;
b) место, дата и время отправки, фамилия или наименование и адрес получателя (получателей);
c) виды и количество перевозимых животных;
d) дата и место проведения дезинфекции;
e) подробности сопроводительных документов, включая номер;
f) прогнозируемая продолжительность перевозки;
5) обеспечивать, чтобы после вывоза с объектов или заготовительного центра происхождения и до прибытия в место назначения партия или животные ни разу не вступали в контакт с животными с более неблагополучным состоянием здоровья.
Компетентный орган проверяет соблюдение перевозчиками положений настоящего пункта по сопутствующей документации, которая должна сопровождать животных.
Положения настоящего пункта не применяются к лицам, которые перевозят животных на расстояние максимум 65 км от места вывоза до места назначения.
В случае несоблюдения настоящего пункта положения о нарушениях и уведомления о нарушениях, связанных с состоянием здоровья животных, применяются положения Ветеринарно-санитарной нормы о защите и благополучии животных во время перевозки, утвержденной Постановлением Правительства № 793/2012.
26. Все предприниматели продовольственного сектора должны регистрироваться и утверждаться, получить номер авторизации и вести торговлю только животными, идентифицированными как происходящие из поголовья, официально свободного от туберкулеза, бруцеллеза и лейкоза, или животными для убоя, которые соответствуют условиям, в частности, предусмотренным в пункте 15 настоящей Нормы, обеспечивая правильную идентификацию животных и их сопровождение документами о состоянии здоровья для данных видов.
27. Разрешаются операции с идентифицированными животными, которые не соответствуют условиям, предусмотренным в пункте 26 настоящей Нормы, при условии, что они сразу отправляются на убойное предприятие, без прохождения через их установки, для скорейшего убоя, во избежание любого распространения болезни, обеспечивая, чтобы эти животные не вступали в контакт с другими животными и подвергались убою отдельно от других животных под контролем официального ветеринарного врача.
28. Оператор продовольственного сектора:
1) должен, на основе сопроводительного документа животных или на основе идентификационных номеров или знаков животных, вносить в журнал или на электронный носитель и хранить в течение не менее трех лет следующую информацию:
a) фамилия владельца, происхождение, дата покупки, категории, количество и идентификация животных вида крупного рогатого скота или регистрационный номер объекта происхождения или поголовья свиней купленных свиней;
b) регистрационный номер перевозчика и/или номер ветеринарно-санитарного разрешения на право деятельности грузового транспорта, который привозит и загружает животных, выданного компетентным ветеринарно-санитарным органом в соответствии с положениями Закона № 221/2007 о ветеринарно-санитарной деятельности;
c) номер и адрес покупателя и назначение животных;
d) серийный номер сертификатов о состоянии здоровья животных;
2) в случае содержания животных на своих установках должен убедиться, что:
a) персонал, который занимается животными, подготовлен к применению требований настоящей Нормы и обеспечению ухода за животными и их благополучия;
b) официальный ветеринарный врач регулярно проводит проверки и, при необходимости, пробы у животных, и обеспечивает принятие всех необходимых мер во избежание распространения болезни.
29. В соответствии с положениями Закона №221/2007 о ветеринарно- санитарной деятельности, каждая установка, используемая оператором продовольственного сектора, регистрируется и имеет номер ветеринарно-санитарного разрешения на право деятельности, выданного компетентным ветеринарно-санитарным органом при следующих условиях:
1) находится под контролем официального ветеринарного врача;
2) находится на территории, на которую не наложен запрет или ограничение из-за состояния здоровья и безопасности животных;
3) имеет возможность размещения количества животных данного вида согласно физиологическим потребностям, в частности, инфраструктуру по проверке и инфраструктуры по изоляции, способные изолировать всех животных в случае возникновения заразного заболевания;
4) имеет установки для разгрузки животных для соответствующих видов и для размещения, возможности для поения, кормления и проведения любого необходимого лечения; эти установки должны легко чиститься и дезинфицироваться;
5) имеет достаточную площадь для приема соломенных подстилок и навоза;
6) имеет систему сбора сточных вод;
7) подвергается предварительной уборке и дезинфекции перед каждым использованием согласно указаниям официального ветеринарного врача.
30. В случае несоблюдения положений настоящей Нормы на авторизованном объекте незамедлительно принимается решение о приостановлении импорта в соответствии с положениями Закона № 221/ 2007 о ветеринарно-санитарной деятельности, Закона № 113/2012 об установлении общих принципов и предписаний законодательства о безопасности пищевых продуктов, Закона № 50/2013 об официальном контроле с целью проверки соответствия кормовому и пищевому законодательству и правилам, касающимся здоровья и благополучия животных, Закона № 131/2012 о государственном контроле предпринимательской деятельности, Закона № 235/2006 об основных принципах регулирования предпринимательской деятельности.
Авторизация может быть восстановлена в случае представления оператором продовольственного сектора доказательств, что он соответствует положениям настоящей Нормы.
31. Компетентный орган:
a) проводит в соответствии с положениями Закона № 131/2012 о государственном контроле предпринимательской деятельности периодические проверки на предмет соблюдения требований настоящей главы;
b) составляет и поддерживает в обновленном виде перечень авторизованных операторов продовольственного сектора и зарегистрированных помещений, используемых ими в связи со своей деятельностью, а также номеров авторизации, присвоенных предпринимателям продовольственного сектора, и предоставляет его общественности.
Глава V
СЕТИ ПО КОНТРОЛЮ
СЕТИ ПО КОНТРОЛЮ
Раздел 1
Система сетевого контроля
32. Компетентный ветеринарно-санитарный орган создает систему сетевого контроля, которая должна состоять, по меньшей мере, из:Система сетевого контроля
1) поголовья животных;
2) владельца объекта или любого физического или юридического лица, на которого возложена эта обязанность;
3) уполномоченного ветеринарного врача или официального ветеринарного врача, ответственного за объект;
4) официальной ветеринарной службы страны;
5) официальных ветеринарно-диагностических лабораторий или любой назначенной лаборатории;
6) электронной базы данных.
Официальные ветеринарные врачи убойных предприятий и заготовительных центров являются участниками сетевой системы.
33. Основными задачами системы сетевого контроля являются:
1) официальная квалификация объектов;
2) поддержание этой квалификации посредством периодических проверок;
3) сбор эпидемиологических данных и контроль за болезнями для гарантирования соблюдения всех положений настоящей Нормы или любой другой уместной нормы в области здоровья животных.
Сетевая система надзора, внедренная на территории страны, является обязательной на всех объектах или, первоначально, только на объектах, включенных в пилотный проект.
Компетентный ветеринарно-санитарный орган устанавливает обязанности и права, которым должны соответствовать уполномоченные ветеринарные врачи, лицо, ответственное за объект, или его владелец, и любой другой участник системы, в том числе лицо, ответственное за выдачу сертификата о состоянии здоровья.
Раздел 2
Обязанности владельца объекта
34. Компетентный орган следит за тем, чтобы любой владелец объекта или любое ответственный работник соблюдал следующие требования:Обязанности владельца объекта
1) обеспечил услуги уполномоченного ветеринарного врача по контракту или по юридическому документу;
2) незамедлительно вызывал уполномоченного ветеринарного врача, отвечающего за объект, в момент возникновения подозрения на заразную болезнь или болезнь, подлежащую немедленному уведомлению;
3) информировал уполномоченного ветеринарного врача о любом ввозе животных на свой объект;
4) изолировал животных перед ввозом на свой объект, чтобы позволить уполномоченному ветеринарному врачу проверить, с помощью лабораторных проб, сохраняется ли статус объекта.
Раздел 3
Обязанности уполномоченного ветеринарного
врача
35. Уполномоченный ветеринарный врач, контролируемый компетентным органом, должен соблюдать следующие условия:Обязанности уполномоченного ветеринарного
врача
1) отвечать необходимым условиям для занятия своей профессией ветеринарного врача;
2) не иметь никакой финансово заинтересованной или семейной связи с владельцем объекта или работником, ответственным за объект;
3) обладать специфическими знаниями в области здоровья животных, применяемыми к животным данного вида, что предполагает необходимость:
a) регулярно совершенствовать свои знания в области здоровья животных;
b) соответствовать условиям нормального функционирования сети;
c) информировать и помогать владельцу объекта или работнику, ответственному за объект, для принятия всех необходимых мер по сохранению статуса объекта, в частности, на основе программ, принятых по согласованию с компетентным органом;
d) следить за соблюдением положений, касающихся: идентификации и сертификата о состоянии здоровья для животных поголовья, ввозимых и продаваемых животных; обязанности заявлять об инфекционных болезнях и любом другом факторе риска для здоровья и благополучия животных и для здоровья человека; устанавливать, по мере возможности, причину смертности животных и место, куда они должны быть отправлены; условия гигиены поголовья и объектов производства животноводческой продукции.
36. Для обеспечения нормального функционирования системы компетентный орган сокращает ответственность ветеринарных врачей до ограниченного количества объектов или до определенной географической площади.
Компетентный орган устанавливает списки уполномоченных ветеринарных врачей и авторизованных объектов, участвующих в сети.
В случае, когда компетентный орган считает, что один из участников сети больше не отвечает условиям, предусмотренным в настоящей Норме, он приостанавливает или изымает авторизацию согласно положениям статьи 17 Закона № 235/2007 об основных принципах регулирования предпринимательской деятельности без ущерба для любой другой возможной применимой санкции.
Раздел 4
Электронная база данных
37. Для каждого животного электронная база данных должна содержать:Электронная база данных
1) код или единые идентификационные коды, установленные Постановлением Правительства № 507/2012 об утверждении норм по идентификации и прослеживаемости животных;
2) дату рождения;
3) пол;
4) породу или цвет кожи;
5) идентификационный код матери или, в случае животного, ввозимого из других стран, единый идентификационный код индивидуального идентификационного средства, присвоенный животному страной назначения в соответствии с положениями Постановления Правительства № 507/2012 об утверждении норм по идентификации и прослеживаемости животных;
6) идентификационный номер объекта, на котором оно родилось;
7) идентификационные номера всех объектов, на которых содержалось животное, и даты каждого перемещения;
8) дату смерти или убоя;
9) вид электронного идентификационного устройства, если к животному применялось такое устройство.
38. Для каждого объекта электронная база данных должна содержать:
a) идентификационный номер, состоящий, помимо кода страны, из кода максимум в 12 символов;
b) фамилию и адрес владельца.
39. База данных должна позволять доступ, в любой момент, к следующей информации:
1) идентификационный номер всех животных вида крупного рогатого скота, имеющихся на объекте, или, в случае групп животных вида свиней – регистрационный номер объекта происхождения или поголовья происхождения и, при необходимости, номер сертификата о состоянии здоровья;
2) перечень всех перемещений каждого животного вида крупного рогатого скота с объекта рождения или для животных, ввозимых из других стран, с объекта вывоза и, для групп животных вида свиней – регистрационный номер последнего объекта или последнего поголовья, а также для животных, ввозимых из других стран, объект вывоза.
Эта информация хранится в базе данных в течение трех лет подряд после смерти животного вида крупного рогатого скота или после регистрации в случае, когда проводится регистрация животных вида свиней.
Положения настоящего пункта и пункта 38 применяются к свиньям.
40. Все остальные участники сети, кроме указанных в пунктах 34-36 настоящей Нормы, осуществляют деятельность под ответственностью компетентного органа, который отвечает за практическую реализацию сети и проводит регулярные проверки сети для обеспечения ее нормального функционирования.
41. При введении в действие системы сетевого оперативного контроля компетентный орган запрашивает помощь международных экспертов для утверждения сетевой системы, в том числе путем аудита, и, в случае установления несоответствий, разрабатывает и вводит в действие план исправительных мер в целях признания/приостановления системы контроля.
42. Компетентный орган страны назначения:
1) незамедлительно информирует компетентный орган страны происхождения в случае установления любого несоответствия в виде нарушения настоящей Нормы.
2) оказывает взаимную поддержку при применении положений настоящей Нормы;
3) применяет адекватные специфические меры по наказанию любого преступления за нарушение положений настоящей Нормы, независимо от того, совершено ли оно физическим или юридическим лицом;
4) в случае подтверждения, что положения настоящей Нормы не соблюдаются или не соблюдались, принимает адекватные меры как по охране здоровья животных, так и по предотвращению распространения болезни, которые состоят в:
a) прекращении перевозки или возврате животных в место отправки по самой короткой дороге при условии, что эта мера не будет создавать угрозу здоровью или благополучию животных;
b) прекращении перевозки с размещением животных и уходом за ними в условиях, соответствующих виду;
c) распоряжении об убое животных, с согласия владельца или уполномоченного лица и компетентного органа страны отправки, с их информированием о мерах, принятых согласно Ветеринарно-санитарным правилам, касающимся субпродуктов животного происхождения, не предназначенных для потребления человеком, утвержденным Постановлением Правительства № 315/2010;
d) выдвижении предложений и дополнений к настоящей Норме в зависимости от развития эпидемиологической ситуации и достигнутого научно-технического прогресса.
Приложение № 1
к Ветеринарно-санитарной норме о
требованиях к здоровью и сертифи-
кации животных при торговле (импорте
и экспорте) крупным рогатым скотом и
свиньями
к Ветеринарно-санитарной норме о
требованиях к здоровью и сертифи-
кации животных при торговле (импорте
и экспорте) крупным рогатым скотом и
свиньями
1. Поголовье крупного рогатого скота, официально свободное от туберкулеза
Положения настоящего раздела касаются всего крупного рогатого скота, за исключением животных, используемых в культурных или спортивных мероприятиях.
1. Поголовье крупного рогатого скота официально свободным от туберкулеза считается в случае, если:
1) ни у одного животного нет клинических признаков туберкулеза;
2) весь крупный рогатый скот в возрасте более шести недель показал отрицательную реакцию не менее чем на две официальные внутрикожные туберкулиновые пробы, проведенные в соответствии с приложением № 2 к настоящей Норме, в течение шести месяцев после устранения любой инфекции из поголовья и в течение следующих шести месяцев или в случае, когда поголовье создано исключительно из животных, которые происходят из поголовий, официально свободных от туберкулеза, первая проба проводится минимум через 60 дней после создания поголовья, а во второй пробе не было необходимости;
3) после завершения первой пробы, предусмотренной в подпункте 2), в поголовье не вводился крупный рогатый скот в возрасте более шести недель, за исключением случая, когда он показал отрицательную реакцию на внутрикожную туберкулиновую пробу, проведенную и оцененную в соответствии с приложением № 2 к настоящей Норме, и которая состоялась в течение 30 дней до или после введения в поголовье; в случае, когда проба проводится после введения в поголовье, животное (животные) должно (должны) быть физически изолировано (изолированы) от остальных животных, во избежание прямого или косвенного контакта с остальными животными, до тех пор, пока реакция окажется отрицательной.
Вместе с тем компетентный орган может не требовать проведения этой пробы в отношении перемещения животных по территории страны в случае, когда животное происходит из поголовья, официально свободного от туберкулеза, компетентный орган потребовал проведения этих проб в случае животных, перемещающихся между поголовьями, которые участвуют в сетевой системе, согласно положениям главы V настоящей Нормы.
2. Статус официально свободного от туберкулеза поголовья крупного рогатого скота сохраняется в случае, когда:
1) продолжают применяться условия, предусмотренные в подпунктах 1) и 2) пункта 1 настоящего приложения;
2) животные, поступающие на объект, происходят из поголовья со статусом официально свободного от туберкулеза;
3) все животные объекта, за исключением бычков в возрасте менее шести недель, родившихся на объекте, ежегодно подвергаются обычной туберкулиновой пробе в соответствии с приложением № 2 к настоящей Норме.
Компетентный орган изменяет кратность проведения обычных проб для всей страны или для части страны, в которой все поголовья крупного рогатого скота включены в официальную программу по борьбе с туберкулезом, в следующем порядке:
a) в случае если среднегодовое поголовье крупного рогатого скота, подтвержденное как инфицированное туберкулезом, подсчитанное в конце каждого года, не превышает 1% поголовий определенной зоны в течение последних двух годовых поднадзорных периодов, промежуток между обычными исследованиями может быть увеличен до двух лет, а самцы на откорме могут быть исключены из туберкулинового тестирования, при условии, что они происходят из поголовий, официально свободных от туберкулеза, и что компетентный ветеринарный орган гарантирует, что самцы на откорме не используются для воспроизводства и будут вывезены прямо в место убоя;
b) в случае если среднегодовое поголовье крупного рогатого скота, подтвержденное как инфицированное туберкулезом, подсчитанное в конце каждого года, не превышает 0,2% поголовий определенной зоны в течение последних двух периодов двух поднадзорных годов, промежуток между обычными исследованиями может быть увеличен до трех лет, а возраст животных, в котором они должны подвергаться исследованию, может быть увеличен до 24 месяцев;
c) в случае если среднегодовое поголовье крупного рогатого скота, подтвержденное как инфицированное туберкулезом, подсчитанное в конце каждого года, не превышает 0,1% поголовий определенной зоны в течение последних двух периодов трех поднадзорных лет, промежуток между обычными исследованиями может быть увеличен до четырех лет или центральный ветеринарный орган освобождает поголовье от туберкулиновой проб, при соблюдении следующих требований:
- перед введением в поголовье весь крупный рогатый скот подвергается внутрикожной туберкулиновой пробе с отрицательной реакцией; или
- весь убитый крупный рогатый скот исследуется с целью выявления повреждений, вызванных туберкулезом, выявленные повреждения подвергаются гистопатологическому и бактериальному исследованиям на подтверждение туберкулеза.
Также компетентный орган может увеличить кратность проведения туберкулиновых проб при учащении случаев туберкулеза.
3A. Статус официально свободного от туберкулеза поголовья приостанавливается, если:
1) больше не соблюдаются условия, указанные в пункте 2; или
2) установлено, что одно или несколько животных положительно реагировали на туберкулиновую пробу, или заподозрен случай туберкулеза при посмертном исследовании.
Когда животное считается положительно реагирующим на туберкулез, оно отделяется от поголовья и уничтожается. Проводятся адекватные посмертные исследования, лабораторные и эпидемиологические исследования положительно реагирующего животного или туши подозрительного животного. Статус поголовья остается приостановленным до завершения всех лабораторных исследований. В случае неподтверждения туберкулеза приостановление статуса официально свободного от туберкулеза может быть отменено после исследования всех животных в возрасте более шести недель, с отрицательным результатом, не ранее чем через 42 дня после удаления положительно реагирующего животного (животных); или
3) в поголовье есть животные с сомнительным статусом в соответствии с приложением № 2 к настоящей Норме. В таком случае статус поголовья остается приостановленным до выяснения статуса соответствующих животных. Такие животные должны быть изолированы от остальных животных поголовья до выяснения их статуса путем тестирования через 42 дня или при посмертном и лабораторном исследованиях.
Вместе с тем в порядке отступления от требований, предусмотренных в подпункте 3) настоящего приложения, на объекте, где компетентный орган проводит обычные проверки в поголовьях, используя сравнительную туберкулиновую пробу, описанную в приложении № 2 к настоящей Норме, и в поголовье, где не были выявлены подтвержденные положительно реагирующие животные в течение не менее трех лет, компетентный орган может решить не ограничивать движение других животных внутри поголовья при условии, что статус любых сомнительно реагирующих животных будет выяснен путем последующего тестирования, проведенного через 42 дня, и животные объекта не будут предметом торговли до выяснения статуса сомнительно реагирующих животных. Если при тестировании данные животные показывают положительную или сомнительную реакцию, то применяются положения пункта 2). Если в дальнейшем подтверждается наличие болезни, все животные, выбывающие с объекта после даты проведения последнего тестирования поголовья с исключительно отрицательными результатами, должны быть локализованы и исследованы.
3B. Статус официально свободного от туберкулеза поголовья аннулируется в случае, когда туберкулез подтверждается путем выделения M. bovis при лабораторном исследовании.
Компетентный орган аннулирует статус в случае, когда:
1) больше не соблюдаются условия, указанные в пункте 2;
2) при посмертном исследовании выявлены характерные повреждения, вызванные туберкулезом;
3) эпизоотологическая анкета свидетельствует о наличии возможной инфекции;
4) по любым другим причинам, которые считаются необходимыми для контроля туберкулеза крупного рогатого скота.
Локализация и проверка проводятся компетентным органом в отношении любого поголовья, подозрительного с эпидемиологической точки зрения. Статус официально свободного от туберкулеза остается аннулированным до завершении операций по очистке и дезинфекции объекта и предметов и до отрицательной реакции всех животных в возрасте более шести недель на две туберкулиновые пробы подряд, первую, выполненную не ранее чем через 60 дней, а вторую, выполненную не ранее чем через четыре месяца и не позднее чем через 12 месяцев после удаления последнего положительно реагирующего на пробу животного.
4. Страна или область страны признается официально свободной от туберкулеза на основе информации, представленной в соответствии с пунктом 16 настоящей Нормы, при соблюдении следующих требований:
1) процент поголовий крупного рогатого скота, у которых подтверждено инфицированное туберкулезом, не превысил 0,1% ежегодно от общего количества поголовий в течение шести лет подряд, и не менее 99,9% поголовий ежегодно в течение шести лет получали статус поголовья, официально свободного от туберкулеза, при этом второй процент подсчитывается на 31 декабря каждого календарного года;
2) каждое животное вида крупного рогатого скота идентифицировано в соответствии с положениями Постановления Правительства № 507/2012 об утверждении норм по идентификации и прослеживаемости животных;
3) весь забитый крупный рогатый скот подвергается посмертному официальному исследованию;
4) соблюдена процедура приостановления или аннулирования статуса официально свободного от туберкулеза.
5. Страна или часть страны сохраняют за собой статус официально свободной от туберкулеза при соблюдении условий, предусмотренных в подпунктах 1)-4) пункта 4. Вместе с тем, если имеются доказательства существенных изменений ситуации по туберкулезу в стране или на части ее территории, которые были признаны официально свободными от туберкулеза, компетентный орган принимает решение о приостановлении или аннулировании статуса до тех пор, пока будут выполнены требования настоящей Нормы.
II. Поголовья крупного рогатого скота,
официально свободные от бруцеллеза
и свободные от бруцеллеза
Положения настоящего раздела касаются всего крупного рогатого скота, за исключением самцов на откорме, при условии, что он происходит с объектов, официально свободных от бруцеллеза, и компетентный орган гарантирует, что самцы на откорме не будут использованы для воспроизводства и будут отправлены прямо в место убоя.официально свободные от бруцеллеза
и свободные от бруцеллеза
1. Поголовье крупного рогатого скота считается официально свободным от бруцеллеза, если:
1) в поголовье нет животных, вакцинированных от бруцеллеза, за исключением самок, вакцинированных не менее трех лет назад;
2) ни одно животное не проявило клинических признаков болезни в течение не менее шести месяцев;
3) все животные в возрасте более 12 месяцев исследованы одним из тестов и показали отрицательные
реакции при:
a) двух серологических исследованиях, предусмотренных в пункте 10, выполненных с промежутком не менее трех месяцев и не более 12 месяцев;
b) при трех тестах на пробах молока, выполненных с промежутком в три месяца, и последующем серологическом исследовании, предусмотренном в пункте 10;
4) любое вводимое в поголовье животное вида крупного рогатого скота происходит из поголовий, официально свободных от бруцеллеза, и крупный рогатый скот в возрасте более 12 месяцев при реакции сероагглютинации на бруцеллез, выполненной в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме, показал титр менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл или отрицательно реагировал на любые другие утвержденные пробы, в течение 30 дней до или после введения в поголовье; в случае проведения пробы после введения в поголовье животное (животные) должны быть физически изолированы от остальных животных поголовья, чтобы исключить прямой и косвенный контакт с ними до подтверждения отрицательной реакции.
2. Статус официально свободного от бруцеллеза поголовья крупного рогатого скота сохраняется, если:
1) ежегодно проводится один из следующих методов исследования с отрицательными результатами в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме:
a) три кольцевые реакции, выполненные на пробах молока с промежутками не менее трех месяцев;
b) три ELISA-теста, выполненных на пробах молока с промежутками не менее трех месяцев;
c) две кольцевые реакции, выполненные на пробах молока с промежутком не менее трех месяцев, с последующим серологическим исследованием, проведенным как минимум через шесть недель, в соответствии с пунктом 10;
d) два ELISA-теста, выполненные на пробах молока с промежутком не менее трех месяцев, с последующим серологическим исследованием, проведенным как минимум через шесть недель, в соответствии с пунктом 10;
e) два серологических исследования, выполненные с промежутком не менее трех месяца и не более 12 месяцев.
Вместе с тем компетентный орган изменяет кратность проведения обычных исследований во всей стране или на части ее территории, которая не является официально свободной от бруцеллеза, но все поголовья крупного рогатого скота включены в официальную программу по борьбе с бруцеллезом, следующим образом:
a) когда инфицировано не более 1% поголовий крупного рогатого скота, может быть достаточно проведения ежегодных двух кольцевых реакций, выполненных на пробах молока, или двух ELISA-тестов, выполненных на пробах молока с промежутком не менее трех месяцев, или одного серологического исследования;
b) когда не менее 99,8% поголовий крупного рогатого скота признаны официально свободными от бруцеллеза в течение не менее четырех лет, промежуток между проверками может быть продлен до двух лет, если исследованы все животные в возрасте более 12 месяцев, или исследование может быть ограничено животными в возрасте более 24 месяцев, если поголовья продолжают исследоваться ежегодно. Проверки должны проводиться с использованием одного из серологических тестов, предусмотренных в пункте 10;
2) весь вводимый в поголовье крупный рогатый скот происходит исключительно из поголовий со статусом официально свободных от бруцеллеза, и крупный рогатый скот в возрасте более 12 месяцев при реакции сероагглютинации на бруцеллез, выполненной в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме, показал титр менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл, или отрицательно реагировал на любую другую из утвержденных проб, проведенную в течение 30 дней до или после введения в поголовье; в случае проведения пробы после введения в поголовье животное (животные) должно (должны) быть физически изолировано (изолированы) от остальных животных, чтобы исключить прямой или косвенный контакты с остальными животными до подтверждения отрицательной реакции.
Вместе с тем исследование, предусмотренное в пункте 2), не является обязательным в странах или областях стран, где процент инфицированных бруцеллезом поголовий крупного рогатого скота не превышал 0,2% в течение не менее двух лет, и если животные происходят из официально свободных от бруцеллеза поголовий соответствующей страны или области, и не контактируют во время перевозки с крупным рогатым скотом с менее благополучным статусом здоровья;
3) не затрагивая пункта 2), животные, которые происходят из поголовий, свободных от бруцеллеза, могут вводиться в поголовье, официально свободное от бруцеллеза, если их возраст превышает 18 месяцев и они были вакцинированы от бруцеллеза не менее года назад.
В течение 30 дней до введения в поголовье эти животные должны показать бруцеллезный титр менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл или отрицательный результат при реакции связывания комплемента или на другую утвержденную пробу.
Вместе с тем, если самка крупного рогатого скота из официально свободного от бруцеллеза поголовья введена в поголовье, официально свободное от бруцеллеза, согласно положениям предыдущей части, поголовье считается официально свободным от бруцеллеза в течение двух лет с момента введения в поголовье последнего вакцинированного животного.
3A. Статус официально свободного от бруцеллеза поголовья приостанавливается, если:
1) больше не соблюдаются условия, изложенные в пунктах 1 и 2; или
2) в результате лабораторных или клинических исследований одно или более животных оказались подозрительными на бруцеллез и были убиты или изолированы таким образом, чтоб исключить любой прямой и непрямой контакт с остальными животными.
Если животное убито и уже не может быть исследовано, приостановление может быть отменено в случае, когда два сероагглютинирующих исследования, проведенных в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме, у всего крупного рогатого скота поголовья в возрасте более 12 месяцев, показали титр менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл. Первое исследование проводится не раньше чем через 30 дней после удаления животного, а второе - не раньше чем через 60 дней после первого.
Если животное изолировано от поголовья, оно может быть вновь введено в поголовье и статус поголовья может быть пересмотрен:
a) после проведения серологического исследования с титром менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл и отрицательного результата в реакции связывания комплемента; или
b) отрицательного результата любыми совместными тестами, утвержденными для этих целей.
3B. Статус официально свободного от бруцеллеза поголовья аннулируется, если лабораторными или эпидемиологическими исследованиями подтверждено заражение поголовья бруцеллезом.
Статус поголовья пересматривается, если животные вида крупного рогатого скота, имеющиеся в поголовье на момент вспышки очага, были забиты, или если поголовье подвергли проверочному исследованию и все животные в возрасте более 12 месяцев отрицательно показали отрицательные результаты при двух пробах подряд, выполненных с промежутком в 60 дней, а первая - не раньше чем через 30 дней после удаления положительно реагирующего (реагирующих) животного (животных).
Конечная проверка стельного крупного рогатого скота, имеющегося в момент вспышки очага, должна проводиться не раньше чем через 21 день после отела последнего беременного животного в момент вспышки очага.
4. Поголовье крупного рогатого скота считается свободным от бруцеллеза, если соблюдаются условия, предусмотренные в подпунктах 2) и 3) пункта 1, и вакцинация проводилась следующим образом:
1) самки крупного рогатого скота были вакцинированы:
a) до достижения 6-месячного возраста живой вакциной из вирусного штамма 19; или
b) до достижения 15-месячного возраста – инактивированной адъювантной вакциной 45/20, проверенной и официально утвержденной; или
c) другими утвержденными вакцинами;
2) крупный рогатый скот в возрасте до 30 месяцев, вакцинированный живой вакциной из вирусного штамма 19, в сероагглютинирующем тесте показал результат более 30 международных единиц (МЕ), но менее 80 международных единиц (МЕ)/миллилитр, при условии, что в реакции связывания комплемента самки, вакцинированные менее 12 месяцев назад, показали результат менее 30 международных единиц (ЕЕС) или не менее 20 международных единиц (ЕЕС) во всех остальных случаях.
5. Статус свободного от бруцеллеза поголовья крупного рогатого скота сохраняется, если:
1) поголовье исследуется одной из мер тестирования, перечисленной в подпункте 1) пункта 2;
2) ввозимый в поголовье крупный рогатый скот отвечает требованиям подпункта 2) пункта 2; или
a) происходит из поголовья со статусом свободного от бруцеллеза и, для крупного рогатого скота в возрасте более 12 месяцев, в течение 30 дней до введения или во время изоляции после введения в поголовье, показал титр менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл в реакции сероагглютинации или отрицательный результат в реакции связывания комплемента, проведенных в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме; или
b) происходит из поголовья со статусом свободного от бруцеллеза, имеет возраст менее 30 месяцев и был вакцинирован живой вакциной из вирусного штамма 19, и в реакции сероагглютинации показал результат более 30 международных единиц (МЕ), но менее 80 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/миллилитр, при условии, что в реакции связывания комплемента самки, вакцинированные менее 12 месяцев назад, показали результат менее 30 международных единиц (ЕЕС) или менее 20 международных единиц (ЕЕС) во всех остальных случаях.
6A. Статус свободного от бруцеллеза поголовья приостанавливается, если:
1) не выполнены условия, указанные в пунктах 4 и 5; или
b) в результате лабораторных исследований или из клинических соображений одно или более животных в возрасте более 30 месяцев оказались подозрительными на бруцеллез и подозрительное (подозрительные) животное (животные) были забиты или изолированы таким образом, чтобы исключить любой прямой и непрямой контакт с остальными животными.
В случае, когда животное изолировано, оно может быть вновь введено в поголовье, и статус поголовья может быть восстановлен, если впоследствии животное реагировало в титре менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл и показало отрицательный результат в реакции связывания комплемента или на любой другой утвержденный тест.
Если животные забиты и не могут подвергаться исследованию, приостановление может быть отменено, если после двух сероагглютинирующих исследований, проведенных в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме, все животные в возрасте более 12 месяцев реагируют в бруцеллезном титре менее 30 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл. Первое исследование проводится не ранее чем через 30 дней после удаления животного, а второе – не ранее чем через 60 дней после первого.
В случае, когда животные, которые должны быть исследованы в соответствии с требованиями двух предыдущих параграфов, имеют возраст менее 30 месяцев и были вакцинированы живой вакциной из вирусного штамма 19, они могут считаться отрицательно реагирующими, если при сероагглютинирующем исследовании показали результат более 30 международных единиц (МЕ), но менее 80 международных единиц (МЕ)/мл при условии, что в реакции связывания комплемента они показали результат менее 30 международных единиц (ЕЕС) в случае самок, вакцинированных менее 12 месяцев назад, или менее 20 международных единиц (ЕЕС) во всех остальных случаях.
6B. Статус свободного от бруцеллеза поголовья аннулируется, если лабораторными пробами в ходе эпидемиологических исследований подтверждена бруцеллезная инфекция в поголовье. Статус поголовья пересматривается, если весь крупный рогатый скот, имеющийся в поголовье в момент вспышки очага, подвергался контрольному исследованию и все не вакцинированные животные в возрасте более 12 месяцев отрицательно реагировали на две пробы подряд, выполненные с промежутком в 60 дней: первая – не ранее чем через 30 дней после удаления положительно реагирующего (реагирующих) животного (животных).
В случае, когда все животные, которые должны быть исследованы в соответствии с требованиями двух предыдущих параграфов, имеют возраст меньше 30 месяцев и были вакцинированы живой вакциной из вирусного штамма 19, они могут считаться отрицательно реагирующими, в случае бруцеллезного титра более 30 международных единиц (МЕ), но менее 80 международных агглютинирующих единиц (МЕ)/мл при условии, что в реакции связывания комплемента они показали результат менее 30 международных единиц (ЕЕС) в случае самок, вакцинированных менее 12 месяцев назад, или менее 20 международных единиц (ЕЕС) во всех остальных случаях.
Конечная проверка стельных животных, имеющихся в момент вспышки очага, должна проводиться не ранее чем через 21 день после отела последнего беременного животного в момент вспышки очага.
7. Страна или область официально свободной от бруцеллеза признается в случае выполнения следующих условий:
1) не было зарегистрировано в течение не менее трех лет случаев аборта, вызванного инфицированием Brucella, и не было выявлено ни одной культуры Brucella abortus, и не менее 99,8% поголовий получили статус поголовья, официально свободного от бруцеллеза, а процент подсчитан на 31 декабря каждого календарного года. Вместе с тем, если компетентный орган утверждает политику убоя всего поголовья, отдельные случаи - которые признаны эпидемиологическим исследованием вызванными ввозом некоторых животных из-за рубежа или на часть ее территории, и из поголовий, чей статус поголовья официально свободного от бруцеллеза, был приостановлен или аннулирован по другим причинам, чем подозрение на заражение - не учитываются при расчете вышеуказанного процента, при условии, что центральный ветеринарный орган страны, в которой отмечены инциденты, составляет ежегодные отчеты и передает их международным организациям, в которые он входит, в соответствии с пунктом 16 настоящей Нормы;
2) каждая особь крупного рогатого скота идентифицирована;
3) случаи аборта подлежат обязательному оповещению и исследованию компетентным ветеринарным органом.
8. При условии соблюдения пункта 9 страна или ее область, признанные официально свободными от бруцеллеза, сохраняют свой статус, если:
1) условия, предусмотренные пунктами 1) и 2) пункта 7, по-прежнему выполняются в случае, когда оповещение о случаях аборта, по которым есть подозрение о том, что они вызваны бруцеллезом, является обязательным и они исследуются компетентным органом;
2) каждый год в течение первых пяти лет после получения статуса весь крупный рогатый скот в возрасте более 24 месяцев не менее чем в 20 % поголовий был исследован и показал отрицательную реакцию на серологическое исследование, проведенное в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме, или в случае молочных поголовий, в ходе исследований проб молока в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме;
3) о каждой особи крупного рогатого скота, подозреваемой в заражении бруцеллезом, сообщается компетентному органу, и она подвергается официальному эпидемиологическому исследованию по выявлению бруцеллеза посредством не менее двух серологических исследований крови, включая реакцию связывания комплемента, и микробиологическому исследованию взятых проб;
4) на период подозрения на заражение бруцеллезом, который продолжается до получения отрицательных результатов проб, предусмотренных в пункте 3), статус официально свободного от бруцеллеза поголовья происхождения или транзита подозрительного животного и подозрительных поголовий в связи с данным животным приостанавливается;
5) в случае распространения очага бруцеллеза весь крупный рогатый скот был убит. Оставшиеся животные подозреваемых видов подвергаются необходимым исследованиям, а объект и оборудование чистятся и дезинфицируются.
9. Страна или ее область, признанные официально свободными от бруцеллеза, обязаны информировать международные организации, в которые она входит, обо всех случаях бруцеллеза. При наличии доказательства существенного изменения ситуации по бруцеллезу в стране или на части ее территории, которая была признана официально свободной от бруцеллеза, предлагается приостановить или аннулировать статус до тех пор, пока не будут выполнены требования настоящей Нормы.
10. В смысле раздела II под серологическим тестом понимается реакция сероагглютинации, реакция с буферным бруцеллезным антигеном, реакция связывания комплемента, реакция агглютинации на плазме, кольцевая реакция на плазме, реакция микроагглютинации или ELISA-тест, выполненный индивидуально на пробах крови, в соответствии с описанием, приведенным в приложении № 3 к настоящей Норме. Также принимается любое другое диагностическое исследование, утвержденное и изложенное в приложении № 3 к настоящей Норме. Под исследованием проб молока подразумевается кольцевая реакция или ELISA-тест, выполненные на пробах молока, в соответствии с приложением № 3 к настоящей Норме.
Приложение № 2
к Ветеринарно-санитарной норме о
требованиях к здоровью и сертифи-
кации животных при торговле (импорте
и экспорте) крупным рогатым скотом и
свиньями
к Ветеринарно-санитарной норме о
требованиях к здоровью и сертифи-
кации животных при торговле (импорте
и экспорте) крупным рогатым скотом и
свиньями
ТУБЕРКУЛЕЗ
1. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯПрисутствие Mycobacterium bovis (M. bovis), возбудителя туберкулеза крупного рогатого скота, в клинических и посмертных пробах может устанавливаться путем рассмотрения окрашенных мазков или приемами иммунопероксидазы и подтверждаться выращиванием организма в среде первичной изоляции.
Патологическая ткань, необходимая для подтверждения присутствия M. bovis, берется из отклоняющихся от нормы узлов паренхиматозных органов, таких как легкие, печень, селезенка и т.д. Если у животного нет патологических повреждений, то пробы следует взять из заднеглоточных узлов, легочных узлов, средостенных узлов, надгрудинных лимфатических узлов, подчелюстных узлов и из определенных мезентериальных и печеночных узлов с целью исследования и выращивания.
Идентификацию изолятов можно выполнить, как правило, путем установления биохимических свойств и особенностей соответствующей культуры. Полимеразную цепную реакцию (ПЦР) также можно использовать для выявления туберкулезного комплекса M. tuberculosis. Приемы анализа ДНК могут оказаться более быстрыми и надежными, чем биохимические методы дифференциации Mycobacterium bovis от других членов туберкулезного комплекса M. tuberculosis. Генетические отпечатки позволяют установить разницу между различными штаммами Mycobacterium bovis, а также описать модели причин и способов передачи и распространения Mycobacterium bovis.
Используемые технические приемы и средства, их стандартизация и интерпретация результатов должны соответствовать указаниям, изложенным в главе 2.3.3 (туберкулез крупного рогатого скота) Руководства по диагностическим тестам и вакцинам Международного эпизоотического бюро (издание четвертое, 2000 г.).
2. Кожная туберкулиновая проба
Для проведения официальной кожной туберкулиновой пробы используют очищенные белковые дериваты туберкулина, которые соответствуют условиям, предусмотренным в пункте 2.1, в соответствии с процедурами, указанными в пункте 2.2.
2.1. Нормы, применяемые к туберкулину (бычьему и птичьему)
2.1.1. Определение
Очищенный белковый дериват (туберкулин PPD, бычий или птичий) – это препарат, получаемый путем применения тепловой обработки продуктов выращивания и лизиса Mycobacterium bovis и 6 (при необходимости), который может проявлять замедленную повышенную чувствительность у животного, сенсибилизированного к микроорганизмам того же вида.
2.1.2. Производство
Туберкулин получают из водорастворимых фракций, приготовленных путем нагревания на свободном пару, с последующей фильтрацией, культур M. Bovis и M. avium (по необходимости), выращиваемых в синтетической жидкой среде. Активная фракция жидкости, состоящая в основном из белков, изолируется путем преципитации, смывается и еще раз разбавляется. Можно добавить продукт противомикробной защиты, который не вызывает ложноположительных реакций, такой как фенол. Конечный стерильный продукт, в котором нет микробактерий, разливают в асептических условиях в безопасные стеклянные емкости, которые закрывают во избежание заражения. Препарат можно лиофилизировать.
2.1.3. Идентификация продукта
Инъекционно внутрикожно вводят несколько калиброванных доз в разные точки правильно сенсибилизированным крысам альбиносам весом не менее 250 г каждая. Через 24-28 часов возникают реакции в виде отеков с покраснением с некрозом в точках введения или нет. Масштаб и тяжесть реакций различаются в зависимости от введенной дозы. Крысы, которые не были сенсибилизированы, не показывают никакой реакции на инъекции такого вида.
2.1.4. Пробы
2.1.4.1. pH: pH колеблется от 6,5 до 7,5.
2.1.4.2. Фенол: если подлежащий исследованию препарат содержит фенол, его концентрация не должна превышать 5 г/л.
2.1.4.3. Эффект сенсибилизации: используется группа из 3 крыс, которые не получали материалы, способные интерферировать с пробой. Каждой крысе трижды вводят внутрикожно с промежутком в пять дней дозу подлежащего исследованию препарата, эквивалентную 500 МЕ на 0,1 мл. Через 15 дней до 21 дня после первого введения вводят внутрикожно такую же дозу (500 МЕ) тем же животным, а также контрольной группе, состоящей из крыс с аналогичным весом, которым предварительно не вводился туберкулин. Через 24 часа до 48 часов после последних введений реакции этих двух групп не будут существенно отличаться.
2.1.4.4. Токсичность: используют две крысы весом не менее 250 граммов каждая, которые предварительно не получали материалы, способные интерферировать с пробой. Каждой крысе подкожно вводят по 0,5 мл исследуемого препарата. Животные наблюдаются в течение семи дней. Во время периода наблюдения не проявляется ни одного отклоняющегося от нормы действия.
2.1.4.5. Стерильность: необходимо провести пробу на стерильность, предписанную в Монографии о ветеринарных вакцинах в Европейской фармакопее, издание четвертое (2002 г.).
2.1.5. Сила реакции
Сила реакции белкового деривата туберкулина (бычьего и птичьего) определяется путем сравнения реакций, наступивших у сенсибилизированных крыс путем внутрикожного введения ряда разбавлений исследуемого препарата, с реакциями, вызванными известными концентрациями эталонного препарата очищенного белкового деривата туберкулина (бычьего и птичьего, по необходимости), измеряемого в международных единицах.
Для исследования силы реакции сенсибилизируется не менее двух крыс альбиносов весом от 400 до 600 граммов каждая путем глубокого внутримышечного введения 0,0001 мг влажной массы штамма AN5 живого M. bovis, в суспензии в 0,5 мл раствора натрия хлорида R в объеме 9 г/л для бычьего туберкулина или адекватной дозы дезактивированного или живого M. avium для птичьего туберкулина. Не менее чем через четыре недели после сенсибилизации крыс сбривают у животных шерсть с боковых сторон тела, чтобы освободить необходимое пространство, по меньшей мере, для четырех точек введения на каждой стороне. Приготавливаются разбавления исследуемого препарата и эталонного препарата, используя буферный солевой изотонический раствор фосфатов (с pH от 6,5 до 7,5), который содержит 0,005 г/л полисорбата 80 R. Используют минимум три дозы эталонного препарата и такое же количество исследуемого препарата. Дозы определяются так, чтобы диаметр вызываемых повреждений составлял от 8 до 25 мм. Разбавления распределяются случайным способом среди точек в нарисованном латинском квадрате. Каждая доза вводится внутрикожно в постоянном объеме 0,1 или 0,2 мл. Через период от 24 до 48 часов измеряются диаметры повреждений и рассчитывается результат пробы путем использования обычных статистических методов и на основе предположения, что диаметры повреждений прямо пропорциональны логарифму концентрации туберкулинов.
Проба действительна только при условии, что степени погрешности (P = 0,95) выше 50 % и ниже 200 % оценочной силы реакции. Оценочная сила реакции составляет более 66 % и менее 150 % заявленной силы бычьего туберкулина. Расчетная сила реакции должна быть выше 75 % и ниже 133 % заявленной силы птичьего туберкулина. Заявленная сила реакции должна быть выше 20 000 МЕ/мл для двух видов туберкулина (бычьего и птичьего).
2.1.6. Хранение
Хранится в темных местах при температуре 5 ± 3 °С.
2.1.7. Этикетирование
На этикетке должно быть указано следующее:
- сила реакции в международных единицах на миллилитр;
- наименование и количество добавленных веществ;
- для лиофилизированных препаратов:
наименование и объем добавляемого разбавителя;
то, что продукт следует использовать сразу же после разбавления.
2.2. Процедуры проведения проб
2.2.1. Признаны официальными внутрикожными туберкулиновыми пробами следующие пробы:
- простая внутрикожная проба: эта проба требует только одного введения бычьего туберкулина;
- сравнительная внутрикожная проба: эта проба требует одного введения бычьего туберкулина и одного введения птичьего туберкулина одновременно.
2.2.2. Доза вводимого туберкулина должна быть:
- равна или выше 2 000 МЕ бычьего туберкулина;
- равна или выше 2 000 МЕ птичьего туберкулина.
2.2.3. Объем каждой инъекции не должен превышать 0,2 мл.
2.2.4. Туберкулиновые пробы проводятся путем введения туберкулина в кожу шеи. Точки введения должны быть расположены на границе между передней и средней третью шеи. Если одному животному вводятся оба вида туберкулина, бычьего и птичьего, то точка введения птичьего туберкулина должна располагаться на 10 см от верхней линии шеи, а точка введения бычьего туберкулина – на 12,5 см ниже, на линии, приблизительно параллельной линии плеча, или на боковых сторонах шеи; у молодых животных, у которых нет достаточного места для отделения точек введения на одной стороне шеи, проводится по одному введению с каждой стороны шеи в одинаковых точках, расположенных в центре средней трети шеи.
2.2.5. Техника туберкулинизации и интерпретация реакций.
2.2.5.1. Техника
Точки введения выстригаются и дезинфицируются. Складка кожи в каждой подготовленной зоне захватывается большим и указательным пальцами, измеряется штангенциркулем и регистрируется результат. Затем вводится доза туберкулина методом, гарантирующим ее внутрикожное введение. Для этого можно использовать короткую и стерильную иглу с косым срезом и краем, направленным наружу, подсоединенная к градуированному наполненному туберкулином шприцу, которая вводится в более глубокие слои кожи. Правильность введения проверяется путем пальпации малого узелка в каждой точке введения, похожего на гороховый боб. Толщина складки каждой точки введения вновь измеряется через 72 часа (+/- 4 часа) после введения и регистрируется результат.
2.2.5.2. Интерпретация реакций
Интерпретация результатов осуществляется на основе клинических наблюдениях и установленном увеличении или увеличений толщины кожных складок в местах введения, зарегистрированных через 72 часа после введения туберкулина или туберкулинов.
a) Отрицательная реакция: реакция считается отрицательной, если наблюдается лишь ограниченное воспаление с увеличением толщины кожной складки на более 2 мм, отсутствие клинических признаков, таких как обширный или разлитой отек, экссудация, некроз, болезненность или воспаление лимфатических сосудов или лимфатических узлов соответствующей области.
b) Сомнительная реакция: реакция считается сомнительной, если не наблюдается ни одного из клинических признаков, указанных в подпункте а), и если толщина кожной складки увеличилась более чем на 2 мм, но менее чем на 4 мм.
c) Положительная реакция: реакция считается положительной, если наблюдаются клинические признаки, указанные в подпункте a), или повышение толщины кожной складки в месте инъекции на 4 мм и более.
2.2.5.3. Интерпретация официальных внутрикожных туберкулиновых проб осуществляется следующим образом:
2.2.5.3.1. Простая внутрикожная проба:
a) положительная: положительная реакция на бычий туберкулин, согласно описанию, данному в подпункте c) пункта 2.2.5.2;
b) сомнительная: сомнительная реакция, согласно описанию, данному в подпункте b) пункта 2.2.5.2;
c) отрицательная: отрицательная реакция на бычий туберкулин, согласно описанию, данному в подпункте a) пункта 2.2.5.2.
Животные, у которых простая внутрикожная проба дала сомнительные результаты, исследуются повторно не раньше чем через 42 дня.
Животные, у которых вторая проба не показала отрицательных результатов, считаются положительно реагирующими на пробу.
Животные, у которых простая внутрикожная проба дала положительные результаты, могут быть подвергнуты сравнительному внутрикожному исследованию, если подозревается присутствие ложноположительной реакции или интерферирующей реакции.
2.2.5.3.2. Сравнительная внутрикожная проба с целью установления и поддержания статуса поголовья, официально свободного от туберкулеза:
a) положительная: реакция считается положительной на бычий туберкулин, если имеются клинические признаки или бычий туберкулин вызвал повышение толщины кожной складки на 4 мм больше, чем при реакции на птичий туберкулин;
b) сомнительная: реакция считается положительной или сомнительной на бычий туберкулин, если нет клинических признаков и если бычий туберкулин вызвал повышение толщины кожной складки на 1-4 мм больше, чем при реакции на птичий туберкулин;
c) отрицательная: реакция считается отрицательной на бычий туберкулин, если нет клинических признаков и если бычий туберкулин вызвал отрицательную реакцию или положительную реакцию либо сомнительную, в результате которой толщина кожной складки равна или меньше, чем в случае положительной или сомнительной реакции на птичий туберкулин.
Животные, у которых сравнительные внутрикожные пробы дали сомнительные результаты, исследуются повторно не раньше чем через 42 дня. Животные, у которых вторая проба не дала отрицательных результатов, считаются положительно реагирующими на пробу.
2.2.5.3.3. Статус поголовья, официально свободного от туберкулеза, может быть приостановлен и животные данного поголовья не могут быть предметом торговли внутри Сообщества до определения окончательного статуса следующих животных:
a) животные, которые сомнительно реагировали на простую внутрикожную пробу;
b) животные, которые положительно реагировали на простую внутрикожную пробу, но должны быть подвергнуты новому исследованию, в виде сравнительной внутрикожной пробы;
c) животные, которые сомнительно реагировали на сравнительную внутрикожную пробу.
2.2.5.3.4. Если законодательством Сообщества предусмотрено, чтобы животные подвергались внутрикожному исследованию перед перемещением, проба должна быть оценена таким образом, что ни одно животное, которое отреагировало утолщением кожной складки более чем на 2 мм или проявило клинические признаки, не должно быть предметом торговли.
2.2.5.3.5. Для содействия выявлению максимального количества инфицированных или больных животных в поголовье или области страна – импортер может изменить критерии интерпретации проб с целью улучшения чувствительности к пробам, признавая все сомнительные реакции, указанные в подпунктах b) пунктов 2.2.5.3.1. и 2.2.5.3.2, положительными реакциями.
3. Дополнительные пробы
Для выявления максимального количества инфицированных или больных животных в поголовье или области страны-участницы могут разрешить, помимо туберкулинизации, применение дозировки гамма-интерферона, указанного в главе 2.3.3 (туберкулез крупного рогатого скота) руководства о нормах проведения диагностических проб и вакцин, издание четвертое (2000 г.), Международного эпизоотического бюро (МЭБ).
4. Государственные институты и базовые национальные лаборатории
4.1. Обязанности и ответственность
Государственные институты, базовые национальные лаборатории или официальные институты, назначенные в соответствии с пунктом 16 настоящей Нормы, несут ответственность за официальное тестирование туберкулинов или реактивов, указанных в пунктах 2 и, соответственно, 3, с целью гарантирования адекватности каждого из этих туберкулинов или реактивов, с точки зрения стандартов, указанных в пункте 2.1 и, соответственно, пункте 3.
Приложение № 3
к Ветеринарно-санитарной норме о
требованиях к здоровью и сертифи-
кации животных при торговле (импорте
и экспорте) крупным рогатым скотом и
свиньями
к Ветеринарно-санитарной норме о
требованиях к здоровью и сертифи-
кации животных при торговле (импорте
и экспорте) крупным рогатым скотом и
свиньями
БРУЦЕЛЛЕЗ
1. Идентификация возбудителя
Выделение путем измененного кисло-устойчивого или иммуноспецифического окрашивания организмов с морфологией Brucella, находящихся в остатках, полученных в результате аборта, выделений из влагалища или молока, дает вероятное указание на бруцеллез, в частности, если он подтверждается серологическими пробами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) предоставляет дополнительные методы выявления.1. Идентификация возбудителя
При любой возможности Brucella spp. следует выделять, используя простые или выборочные среды, путем отбора из маточных выделений, из плодов-выкидышей, выделений из вымени или определенных тканей, а также лимфатических узлов и репродуктивных органов самцов и самок.
После выделения виды и биотип можно идентифицировать путем лизиса фагов и/или пробами окислительного обмена веществ в зависимости от критериев культуры, биохимических и серологических критериев. ПЦР может обеспечить также дополнительный метод биотипизации, основанный на геномных последовательностях.
Используемые приемы и среды, стандартизация и интерпретация результатов должны соответствовать условиям Руководства по диагностическим тестам и вакцинам для наземных животных, издание шестое, 2008 г., глава 2.4.3 (бруцеллез крупного рогатого скота), глава 2.7.2 (бруцеллез коз и крупного рогатого скота) и глава 2.8.5 (бруцеллез свиней).
2. Иммунологические пробы
2.1. Стандарты
2.1.1. При приготовлении всех антигенов, используемых при реакции с розовым бенгалом (RBT), реакции сероагглютинации (SAT), реакции на связывание комплемента (CFT) и кольцевой реакции, выполняемой на пробе молока (MRT), используется штамм Weybridge № 99 и USDA 1119-3 биотипа 1 Brucella abortus.
2.1.2. Стандартной эталонной сывороткой для реакций RBT, SAT, CFT и MRT будет международная стандартная сыворотка МЭБ (OIEISS), известная ранее как вторая международная стандартная сыворотка анти-Brucella abortus ВОЗ (ISAbS).
2.1.3. Стандартные эталонные сыворотки для иммуноферментных методов (ELISA) следующие:
- OIEISS;
- стандартная сыворотка ELISA слабоположительная МЭБ (OIEELISAWPSS);
- стандартная сыворотка ELISA сильноположительная МЭБ (OIEELISASPSS);
- стандартная сыворотка ELISA отрицательная МЭБ (OIEELISANSS).
2.1.4. Эталонные стандартные сыворотки для оценки флюоресценции в полярном свете (FPA) следующие:
- стандартная сыворотка ELISA слабоположительная МЭБ (OIEELISAWPSS);
- стандартная сыворотка ELISA сильноположительная МЭБ (OIEELISASPSS);
- стандартная сыворотка ELISA отрицательная МЭБ (OIEELISANSS).
2.1.5. Стандартные сыворотки, указанные в пунктах 2.1.3 и 2.1.4, поставляются базовой лабораторией Сообщества или Агентством ветеринарных лабораторий [Veterinary Laboratories Agency (VLA)], Weybridge, Великобритания.
2.1.6. OIEISS, OIEELISAWPSS, OIEELISASPSS и OIEELISANSS – главные международные стандарты, на основе которых устанавливаются, в каждом государстве-участнике, национальные стандартные сыворотки («эталонные сыворотки») для каждой из проб, указанных в пункте 2.1.1.
2.2. Иммуноферментные методы (ELISA) или другие обязательные реакции на агглютинацию для выявления бруцеллеза крупного рогатого скота в сыворотке или молоке.
2.2.1. Материал и реактивы
Используемая техника и интерпретация результатов должны быть предварительно утверждены в соответствии с принципами, предусмотренными в главе 1.1.4 Руководства по диагностическим тестам и вакцинам для наземных животных, издание шестое, 2008 г., и должны включать как минимум лабораторные и диагностические исследования.
2.2.2. Стандартизация теста
2.2.2.1. Стандартизация тестовой процедуры для отдельных проб сыворотки:
a) предварительное разбавление 1/150 сыворотки OIEISS или предварительное разбавление 1/2 сыворотки OIEELISAWPSS или предварительное разбавление 1/16 сыворотки OIEELISASPSS в отрицательной сыворотке (или в смеси отрицательных сывороток) должно дать положительную реакцию;
b) предварительное разбавление 1/600 сыворотки OIEISS или предварительное разбавление 1/8 сыворотки OIEELISAWPSS или предварительное разбавление 1/64 сыворотки OIEELISASPSS в отрицательной сыворотке (или в смеси отрицательных сывороток) должно дать отрицательную реакцию;
c) сыворотка OIEELISANSS всегда должна давать отрицательную реакцию.
2.2.2.2. Стандартизация тестовой процедуры для смешанных проб сыворотки:
a) предварительное разбавление 1/150 сыворотки OIEISS или предварительное разбавление 1/2 сыворотки OIEELISAWPSS или предварительное разбавление 1/16 сыворотки OIEELISASPSS в отрицательной сыворотке (или в смеси отрицательных сывороток) и снова разбавленных в отрицательных сыворотках с коэффициентом разбавления, тождественным количеству составляющих смесь сывороток, должно дать положительную реакцию;
b) сыворотка OIEELISANSS всегда должна давать отрицательную реакцию;
c) тест должен быть способным выявить присутствие инфекции у одного животного из группы животных, от которых сочетались пробы сыворотки.
2.2.2.3. Стандартизация тестовой процедуры для проб молока или смешанной сыворотки:
a) предварительное разбавление 1/1 000 сыворотки OIEISS или предварительное разбавление 1/16 сыворотки OIEELISAWPSS или предварительное разбавление 1/125 сыворотки OIEELISASPSS в отрицательной сыворотке (или в смеси отрицательных сывороток) и снова разбавленных в пропорции 1/10 в отрицательном молоке должно дать положительную реакцию;
b) сыворотка OIEELISANSS, разбавленная в соотношении 1/10 в отрицательном молоке, всегда должна давать отрицательную реакцию;
c) тест должен быть способным выявить присутствие инфекции у одного животного из группы животных, от которых сочетались пробы молока или сыворотки.
2.2.3. Условия использования ELISA-тестов в диагностике бруцеллеза крупного рогатого скота:
2.2.3.1. При использовании условий калибровки ELISA-теста, изложенных в пунктах 2.2.2.1 и 2.2.2.2, на пробах сыворотки диагностическая чувствительность ELISA будет равна или выше, чем при реакции RBT или реакции CFT, с учетом эпидемиологической ситуации его использования.
2.2.3.2. При использовании условий калибровки ELISA-теста, изложенных в пункте 2.2.2.3, на пробах смешанного молока диагностическая чувствительность ELISA будет равна или выше, чем при реакции MRT, учитывая не только эпидемиологическую ситуацию, но и средние и большие поголовья предусмотренных систем выращивания.
2.2.3.3. Если ELISA-тесты используются в целях сертификации в соответствии с пунктом 13 настоящей Нормы или для создания и поддержания статуса поголовья в соответствии с пунктом 10 части II приложения № 1 к настоящей Норме, то смесь проб сыворотки следует выполнить так, чтобы результаты тестов можно было четко отнести к разным животным, от которых происходит введенное в смесь молоко. Любой подтверждающий тест должен проводиться на пробах сыворотки, взятых у отдельных животных.
2.2.3.4. ELISA-тесты можно применять на пробах молока из выборки молока, взятой на ферме, где не менее 30 % молочных коров находятся в периоде лактации. При использовании данного метода следует принять меры для того, чтобы взятые для исследования пробы четко относились к разным животным, от которых происходит молоко. Любой подтверждающий тест должен проводиться на пробах сыворотки, взятых у отдельных животных.
2.3. Реакция связывания комплемента (CFT)
2.3.1. Антиген представляет собой бактериальную эмульсию, приготовленную на фенольно-солевом растворе [NaCl 0,85 % (м/о) и фенол 0,5% (о/о)] или в буфере веронал. Антигены можно брать в концентрированном виде, при условии, чтобы используемый коэффициент разбавления был указан на этикетке флакона. Антиген следует хранить при температуре 4 °С. Нельзя замораживать.
2.3.2. Сыворотки следует дезактивировать следующим образом:
– сыворотка крупного рогатого скота: при температуре 56-60 °C в течение 30-50 минут;
– сыворотка свиней: при температуре 60 °C в течение 30-50 минут.
2.3.3. Для получения удовлетворительной реакции в ходе тестовой процедуры используется доза комплемента выше минимально необходимой дозы для полного гемолиза.
2.3.4. Во время реакции связывания комплемента проводятся следующие проверки:
a) проверка антикомплементарного эффекта сыворотки;
b) проверка антигена;
c) проверка сенсибилизированных эритроцитов;
d) проверка комплемента;
e) проверка чувствительности запуска реакции, используя положительную сыворотку;
f) проверка специфичности реакции, используя отрицательную сыворотку.
2.3.5. Подсчет результатов.
Сыворотка OIEISS содержит 1 000 международных единиц CFT (ICFTU) на мл. Если сыворотка OIEISS тестируется одним из указанных методов, то результат выражается в виде титра (например, самое высокое прямое разбавление сыворотки OIEISS, которое дает 50 % гемолиза, TOIEISS). Результат реакции для тестовой сыворотки дается как титр (TSERTEST), должен выражаться в ICFTU на мл. Для превращения выражения титра в ICFTU, необходимый коэффициент (F) для превращения титра неизвестной исследуемой сыворотки (TSERTEST), исследуемой этим методом, выражаемый в ICFTU, находят по формуле:
F = 1 000 × 1/TOIEISS,
а содержание международных единиц CFT на мл исследуемого теста (ICFTUSERTEST), из формулы:
ICFTUTESTSERUM = F × TTESTSERUM
2.3.6. Интерпретация результатов
Сыворотка, содержащая 20 или более ICFTU на мл, будет считаться положительной.
2.4. Кольцевая реакция на пробе молока (MRT)
2.4.1. Антиген представляет собой бактериальную эмульсию, приготовленную на фенольно-солевом растворе [NaCl 0,85 % (м/о) и феноле 0,5 % (о/о)], окрашенную гематоксилином. Антиген следует хранить при температуре 4 °C. Не замораживать.
2.4.2. Чувствительность антигена должна быть стандартизирована к сыворотке OIEISS, чтобы антиген давал положительную реакцию при разбавлении 1/500 сыворотки OIEISS в отрицательном молоке и отрицательную реакцию при разбавлении 1/1 000.
2.4.3. Кольцевую реакцию следует проводить на представительных пробах содержимого каждой емкости с молоком и каждой эксплуатационной емкости с фермы.
2.4.4. Пробы молока нельзя замораживать, нагревать или сильно встряхивать.
2.4.5. Реакция должна выполняться, используя один из следующих методов:
- на столбике молока высотой не менее 25 мм и не менее 1 мл молока, к которому добавляется 0,03 мл или 0,05 мл одного из окрашенных стандартизированных антигенов;
- на столбике молока высотой не менее 25 мм и не менее 2 мл молока, к которому добавляется 0,05 мл одного из окрашенных стандартизированных антигенов;
- на 8 мл молока, к которому добавляется 0,08 мл одного из окрашенных стандартизированных антигенов.
2.4.6. Смесь молока и антигена должна быть инкубирована при 37°С в течение 60 минут, с положительными и отрицательными эталонными сыворотками. Чувствительность пробы высокая, если инкубация сохраняется при 4 °C в течение 16-24 часов.
2.4.7. Интерпретация результатов:
a) реакция отрицательная: молоко окрашено, сметана не окрашена;
b) реакция положительная:
- молоко и сметана окрашены одинаково; или
- молоко не окрашено и сметана окрашена.
2.5. Проба с буферным бруцеллезным антигеном [проба с розовым Бенгалом (RBT)]
2.5.1. Антиген состоит из бактериальной эмульсии из разбавленного буферного бруцеллезного антигена с pH 3,65 ± 0,05, окрашенного розовым Бенгалом. Антиген берется готовым к употреблению и должен храниться при 4 °C. Не замораживать.
2.5.2. Антиген должен быть приготовлен без учета концентрации клеток, но чувствительность должна быть стандартизирована к сыворотке OIEISS, таким образом, чтобы антиген дал положительную реакцию с разбавленной сывороткой в соотношении 1/45 и отрицательную реакцию при разбавлении 1/55.
2.5.3. Проба RBT проводится следующим образом:
a) сыворотку (20-30 μл) смешивают с аналогичным объемом антигена в белой или эмалированной чашке для создания зоны диаметром примерно в 2 см. Смесь немного встряхивают в течение четырех минут при комнатной температуре, затем рассматривается при соответствующем свете для наблюдения за агглютинацией;
b) автоматический метод разрешается, но должен иметь такую же степень чувствительности и аккуратности, что и ручной метод.
2.5.4. Интерпретация результатов
Любая видимая реакция считается положительной, за исключением случая пересушивания вокруг краев.
В каждую серию проб включаются положительные и отрицательные эталонные сыворотки.
2.6. Сероагглютинирующая проба (SAT)
2.6.1. Антиген представляет собой бактериальную эмульсию, приготовленную на фенольно-солевом растворе [NaCl 0,85 % (м/о) и феноле 0,5 % (о/о)].
Не используется формальдегид.
Антигены можно брать в концентрированном виде, при условии, чтобы используемый коэффициент разбавления был указан на этикетке флакона.
К эмульсии антигена можно добавлять EDTA до получения конечного разбавления 5 мM для сокращения ложноположительных результатов реакции сероагглютинации. Затем pH следует снова довести до 7,2 в эмульсии антигена.
2.6.2. Сыворотка OIEISS содержит 1 000 международных агглютинирующих единиц.
2.6.3. Антиген должен быть приготовлен без учета концентрации клеток, но чувствительность должна быть стандартизирована к сыворотке OIEISS, таким образом, чтобы антиген дал положительную реакцию сыворотки
50 % при конечном разбавлении сыворотки 1/600-1/1 000 или агглютинацию в 75 % при конечном разбавлении сыворотки 1/500-1/750.
Рекомендуется сравнить реактивность новых партий антигена и ранее стандартизированных партий с помощью определенной группы сывороток.
2.6.4. Проба проводится в пробирках или на микропластинах. Смесь антигени и разбавлений сыворотки инкубируется при 37 °C в течение 16-24 часов.
Следует приготовить как минимум три разбавления для каждой сыворотки. Разбавления подозрительной сыворотки следует сделать таким образом, чтобы читка реакции в пределе положительности проводилась в средней пробирке (или в промежуточных отсеках в случае метода микропластин).
2.6.5. Интерпретация результатов:
Степень агглютинации Brucella в сыворотке выражается в МЕ на мл.
Сыворотка, содержащая 30 и более МЕ на мл, считается положительной.
2.7. Тест на оценку флуоресценции в полярном свете (FPA)
2.7.1. Тест FPA можно проводить в стеклянных пробирках или на пластине с 96 отсеками. Используемая техника, ее стандартизация и интерпретация результатов должны соответствовать тем, которые указаны в главе 2.4.3 (бруцеллез крупного рогатого скота) Руководства диагностических тестов и вакцин для наземных животных. Международное эпизоотическое бюро, издание шестое, 2008 г.
2.7.2. Стандартизация теста.
Проба FPA стандартизируется таким образом, чтобы:
a) сыворотки OIEELISASPSS и OIEELISAWPSS постоянно давали положительные результаты;
b) предварительное разбавление 1/8 сыворотки OIEELISAWPSS или предварительное разбавление 1/64 сыворотки OIEELISASPSS, в отрицательной сыворотке (или в смеси отрицательных сывороток) всегда давали отрицательную реакцию;
c) сыворотка OIEELISANSS всегда давали отрицательную реакцию.
В каждую партию включается: сильноположительная эталонная сыворотка, слабоположительная, отрицательная (калиброванная, исходя из эталонной сыворотки ELISA Международного эпизоотического бюро).
3. Дополнительные пробы
3.1. Кожная проба на бруцеллез (BST)
3.1.1. Условия использования BST
a) Кожную пробу на бруцеллез нельзя использовать для сертификации в целях международной торговли.
b) Кожная проба на бруцеллез – один из самых специфических тестов по выявлению бруцеллеза у не вакцинированных животных; вместе с тем, диагноз не следует ставить исключительно на основе положительных внутрикожных реакций.
c) Крупный рогатый скот, который получил отрицательный результат по одной из серологических проб, указанных в настоящем приложении, но положительную реакцию на BST, будет считаться инфицированным или с подозрением на инфекцию.
d) Крупный рогатый скот, который получил положительный результат по одной из серологических проб, указанных в настоящем приложении, может быть подвергнут тесту BST для подтверждения интерпретации результатов серологических проб; в частности, в случаях, когда нельзя исключить перекрестную реакцию с антителами против других бактерий в поголовьях крупного рогатого скота, свободных или официально свободных от бруцеллеза.
3.1.2. Пробу следует проводить используя стандартизированный и определенный аллергенный препарат, не содержащий плоский липополисахаридный антиген (LPS), поскольку он может вызвать неспецифические воспалительные реакции или интерферировать с дальнейшими серологическими пробами.
Требования к приготовлению бруцеллина должны соответствовать разделу C1 главы 2.4.3 Руководства по диагностическим тестам и вакцинам для наземных животных. Международное эпизоотическое бюро, издание шестое, 2008 г.
3.1.3. Процедура тестирования
3.1.3.1. Внутрикожно вводят 0,1 мл аллергена бруцеллеза в хвостовую складку, кожу крупа или в боковую часть шеи.
3.1.3.2. Пробу читают через 48-72 часа.
3.1.3.3. Толщину кожи в месте введения измеряют кутиметром, до введения и в момент повторного осмотра.
3.1.3.4. Интерпретация результатов:
Сильные реакции легко заметить по воспалению и уплотнению кожи на местном уровне.
Утолщение кожи на 1,5-2 мм считается показателем положительной реакции на BST.
3.2. Сравнительные иммуноферментные тесты (cELISA)
3.2.1. Условия использования cELISA-теста
cELISA-тест нельзя использовать для сертификации в целях торговли.
Крупный рогатый скот, у которого был положительный результат по одной из серологических проб, указанных в настоящем приложении, может быть подвергнут cELISA-тесту для подтверждения интерпретации остальных результатов серологических проб, в частности, в случаях, когда в поголовьях крупного рогатого скота, свободных или официально свободных от бруцеллеза, нельзя исключить перекрестную реакцию с антителами против других бактерий, или для устранения реакций, вызванных остаточными антителами, выработанными в результате вакцинации S19.
3.2.2. Процедура тестирования
Тест проводится в соответствии с предписанием, изложенным в пункте 2 раздела B главы 2.4.3 Руководства по диагностическим тестам и вакцинам для наземных животных. Международное эпизоотическое бюро, издание шестое, 2008 г.
4. Национальная базовая лаборатория
4.1. Обязанности и ответственность
Базовые национальные лаборатории отвечают за:
a) утверждение результатов подтверждающих исследований, показывающих надежность используемого в стране метода тестирования;
b) определение максимального количества проб, которые могут быть смешаны в используемых наборах ELISA;
c) калибровку эталонных сывороток, указанных в пункте 2.1.6;
d) качественные проверки всех антигенов и партий наборов ELISA, используемых в стране;
e) соблюдением рекомендаций базовых лабораторий Сообщества по бруцеллезу и сотрудничество с ними.
Приложение № 4
к Ветеринарно-санитарной норме о
требованиях к здоровью и сертифи-
кации животных при торговле (импорте
и экспорте) крупным рогатым скотом и
свиньями
к Ветеринарно-санитарной норме о
требованиях к здоровью и сертифи-
кации животных при торговле (импорте
и экспорте) крупным рогатым скотом и
свиньями
ЭНЗООТИЧЕСКИЙ ЛЕЙКОЗ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Глава I
ПОГОЛОВЬЯ, СТРАНЫ И ЗЕГИОНЫ,
ОФИЦИАЛЬНО СВОБОДНЫЕ ОТ
ЭНЗООТИЧЕСКОГО ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО
РОГАТОГО СКОТА
1. Поголовье считается официально свободным от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, если:Глава I
ПОГОЛОВЬЯ, СТРАНЫ И ЗЕГИОНЫ,
ОФИЦИАЛЬНО СВОБОДНЫЕ ОТ
ЭНЗООТИЧЕСКОГО ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО
РОГАТОГО СКОТА
1) не существует подтверждений, клинических или полученных в результате лабораторных исследований, ни одного случая энзоотического лейкоза крупного рогатого скота в поголовье и такие случаи не подтвердились в течение последних двух лет; и
2) в течение последних 12 месяцев, все животные в возрасте более 24 месяцев отрицательно реагировали на два исследования, проведенные в соответствии с настоящим приложением, с промежутком не менее четырех месяцев; или
3) соответствует требованиям, предусмотренным в пункте 1), и расположено в стране или в регионе, официально свободных от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота.
2. Статус поголовья, официально свободного от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, сохраняется, если:
продолжают выполняться условия, предусмотренные в подпункте 1) пункта 1;
1) животные, вводимые в поголовье, происходят из поголовья, официально свободного энзоотического лейкоза крупного рогатого скота;
2) все животные в возрасте более 24 месяцев продолжают отрицательно реагировать на пробы, проведенные, в соответствии с главой II, с промежутками в три года;
3) животные для репродукции, введенные в поголовье, которые происходят из другой страны, завезены в соответствии с положениями Постановления Правительства № 189/2014 об утверждении Ветеринарно-санитарной нормы о состоянии здоровья животных при импорте и транзите определенных живых копытных животных.
3. Статус официально свободного от лейкоза поголовья приостанавливается при невыполнении условий, указанных в пункте 2, или в случае, когда на основании результатов лабораторных исследований или из клинических соображений одно или более животных подозрительны на энзоотический лейкоз крупного рогатого скота и немедленно забиты.
4. Статус остается приостановленным до выполнения следующих требований:
1) если только одно животное из поголовья, официально свободного от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, положительно реагировало на одну из проб, предусмотренных в настоящей Норме, или в случае, когда есть одно животное с подозрением на инфекцию в поголовье:
a) животное, положительно реагирующее, а в случае коровы все полученные от нее телята исключены из поголовья только путем убоя под надзором ветеринарного органа;
b) все животные поголовья в возрасте более 12 месяцев отрицательно реагировали на два серологических исследования (с промежутком не менее 4 и не более 12 месяцев), проведенные, согласно главе II, не ранее чем через три месяца после выведения из поголовья положительно реагирующего животного и полученного от него потомства;
c) проведена эпидемиологическая анкета с отрицательным результатом, и все поголовье, эпидемически связанное с зараженным поголовьем, было подвергнуто мерам, предусмотренным в подпункте b).
Вместе с тем компетентный орган может предоставить отступление от обязательного убоя теленка, полученного от зараженной коровы, если он сразу после рождения был отделен от матери. В таком случае применяются требования, предусмотренные в литере с) подпункта 2);
2) в случае если более чем одно животное из поголовья, официально свободного от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, отреагировало положительно на один из тестов, предусмотренных в главе II, или когда инфекция подозревается более чем у одного животного из поголовья:
а) все положительно реагирующие животные, а для коров – и полученные от них телята должны быть исключены из поголовья и забиты под надзором ветеринарных органов;
b) все животные из поголовья в возрасте более 12 месяцев должны отрицательно реагировать на две пробы, проведенные, в соответствии с положениями настоящей Нормы, с промежутком не менее 4 и не более 12 месяцев;
c) после идентификации все остальные животные поголовья должны оставаться в поголовье до возраста более 24 месяцев и до исследования в соответствии с положениями настоящей Нормы, а после достижения данного возраста компетентный орган может разрешить отправку животных прямо на убой под официальным надзором;
d) проведено эпидемиологическое исследование с отрицательным результатом, и все поголовье, подозреваемое в связи с зараженным поголовьем, было подвергнуто мерам, предусмотренным в литере b).
Вместе с тем компетентный орган может сделать отступление от обязательного убоя теленка, полученного от зараженной коровы, если он сразу после рождения был отделен от матери. В таком случае применяются требования, предусмотренные в литере с) подпункта 2.
5. Страна или регион считается свободным от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота на основе информации, предоставленной в соответствии с пунктом 16 настоящей Нормы, в случае если:
1) выполнены все условия, предусмотренные в пункте 1, и не менее 99,8 % поголовий крупного рогатого скота официально свободны от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота; или
2) в течение последних трех лет не были подтверждены случаи энзоотического лейкоза крупного рогатого скота в стране или на части ее территории, а уведомление о подозрительных опухолях ЭЛКРС является обязательным, c последующим проведением исследований на предмет причин данных опухолей, и:
а) в случае страны, все животные в возрасте более 24 месяцев не менее чем из 10 % случайно выбранных поголовий отрицательно реагировали на пробы, проведенные, в соответствии с положениями настоящей Нормы, в течение последних 24 месяцев, или
b) в случае части территории государства-участника, все животные в возрасте более 24 месяцев отрицательно реагировали на пробы, проведенные, в соответствии с положениями настоящей Нормы, в течение последних
24 месяцев; или
3) любой другой метод показывает, с долей вероятности 99 %, инфицирование менее 0,2 % поголовий.
6. Страна или ее часть сохраняет статус официально свободной от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, если:
1) все животные, забитые на территории страны или в регионе данной страны, подвергаются официальному послеубойному исследованию, и все опухоли, которые могли быть вызваны вирусом ЭЛКРС, отправляются в лабораторию для исследования;
2) компетентный орган информирует международные организации, стороной которых является, о случаях энзоотического лейкоза крупного рогатого скота;
3) все животные, положительно реагирующие на любой из тестов, предусмотренных в настоящей Норме, забиты, а поголовья, откуда они происходят, по-прежнему находятся под запретом до пересмотра их статуса в соответствии с пунктом 4;
4) все животные в возрасте более двух лет были исследованы в первые пять лет после получения статуса в соответствии с положениями настоящей Нормы или в течение первых пяти лет после получения статуса были исследованы на основе процедуры, доказывающей с точностью до 99%, что менее 0,2% поголовий заражено. При этом, если в течение, по меньшей мере, трех лет в стране или в регионе страны не был зарегистрирован ни один случай энзоотического лейкоза крупного рогатого скота в 10-тысячном поголовье, можно принять решение о сокращении обычных серологических исследований при условии, что все животные в возрасте более 12 месяцев из не менее 1% поголовий, отбирающихся ежегодно случайным методом, подвергались исследованию в соответствии с положениями настоящей Нормы.
7. Статус официально свободной от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота страны или части ее территории приостанавливается, если в результате исследований, проведенных в соответствии с пунктом 6, имеются доказательства существенного изменения ситуации по энзоотическому лейкозу крупного рогатого скота в стране или на части ее территории, которые признаны официально свободными от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота.
Статус официально свободного от энзоотического лейкоза крупного рогатого скота может быть пересмотрен при соблюдении критериев, предусмотренных той же процедурой.
Глава II
ИССЛЕДОВАНИЯ НА ЭНЗООТИЧЕСКИЙ ЛЕЙКОЗ
КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Исследования на энзоотический лейкоз крупного рогатого скота проводятся путем реакции иммунодиффузии в агаровом геле (AGID) согласно условиям, изложенным в пунктах 1 и 2, или иммуноферментным методом (ELISA), согласно условиям, изложенным в пункте 3. Реакции иммунодиффузии в агаровом геле предназначены только для индивидуального исследования. Если результаты исследований представляют предмет исследования на подтверждение, должна проводиться дополнительная проверка методом иммунодиффузии в агаровом геле.ИССЛЕДОВАНИЯ НА ЭНЗООТИЧЕСКИЙ ЛЕЙКОЗ
КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Пробы AGID и ELISA стандартизируются по отношению к сыворотке E05, официальной стандартной сыворотке ЕС, которая поставляется: Friedrich-Loeffler-Institut, Federal Research Institute for Animal Health, базовой лабораторией МЭБ по энзоотическому лейкозу крупного рогатого скота (ЭЛКРС), Südufer 10, 17493 Greifswald – Insel Riems, Германия.
1. Иммунодиффузное исследование в агаровом геле на энзоотический лейкоз крупного рогатого скота
1) Антиген, используемый для данного исследования, должен содержать гликопротеин вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота. Антиген стандартизируется к стандартной сыворотке E05.
2) Государственные институты, базовые национальные лаборатории или официально назначенные институты, в соответствии с положениями пункта 14 настоящей Нормы, для координации стандартов и методов диагностики в отношении исследований на выявление энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, несут ответственность за калибровку рабочего стандартного антигена лаборатории в сравнении с сывороткой E05.
3) Стандартные антигены, используемые в лаборатории, должны быть отправлены не реже одного раза в государственные институты, базовые национальные лаборатории или официально назначенные институты, в соответствии с положениями пункта 16 настоящей Нормы, для исследования в сравнении с сывороткой E05. Помимо такой стандартизации, антиген для исследования может быть калиброван в соответствии с методом, изложенным в пункте 2.
4) При исследовании используются следующие реактивы:
a) антиген: гликопротеин вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, стандартизированный к сыворотке E05;
b) исследуемая сыворотка;
c) известная положительная контрольная сыворотка;
d) агаровый гель:
- 0,8 % агара;
- 8,5 % NaCl;
- буфер Tris 0,05 M, pH 7,2;
- 15 мл такого геля должен быть разлит в чашки Петри диаметром 85 мм, чтобы толщина агара составила 2,6 мм.
5) Создается конфигурация для исследования в виде семи лунок путем врезания в толщу агара до дна чашки; одна центральная лунка и шесть лунок, расположенных по кругу вокруг нее.
Диаметр центральной лунки – 4 мм, диаметр периферических лунок – 6 мм, расстояние между центральной и периферическими лунками – 3 мм.
6) Центральная лунка наполняется стандартным антигеном. Периферические лунки 1 и 4, указанные в подпункте 3) пункта 2, наполняются известной положительной сывороткой; лунки 2, 3, 5 и 6 наполняются исследуемой сывороткой. Лунки заполняются до исчезновения мениски (верхнего края).
7) Получаются следующие объемы:
- антиген: 32 μл;
- контрольная сыворотка: 73 μл;
- исследуемая сыворотка: 73 μл.
8) Инкубация длится 72 часа при температуре воздуха (20-27 °C) в закрытом влажном помещении.
9) Реакция читается через 24 часа, затем через 48 часов, но нельзя получить ни одного конечного результата раньше чем через 72 часа:
a) исследуемая сыворотка является положительной, если образуется специфическая линия преципитации с антигеном вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота (ЭЛКРС) и формируется линия, совпадающая с линией контрольной сыворотки;
b) исследуемая сыворотка является отрицательной, если не образуется специфической линии преципитации с антигеном вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота и не изменяется кривая линия контрольной сыворотки;
c) реакцию нельзя считать убедительной, если:
- линия контрольной сыворотки в сторону луночки с антигеном вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота изгибается и не образуется линия видимой преципитации с антигеном; или
- невозможна положительная или отрицательная интерпретация.
В случае сомнительных реакций исследование можно повторить и использовать концентрированную сыворотку.
10) Можно использовать любой другой штамп или любое другое расположение луночек, при условии, чтобы сыворотка E05, разбавленная 1:10 с отрицательной сывороткой, могла идентифицироваться как положительная.
2. Метод стандартизации антигена
1. Необходимые растворы и материалы:
a) 40 мл 1,6 % агара на буфере Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 и NaCl 85 %;
b) 15 мл положительной сыворотки крупного рогатого скота с энзоотическим лейкозом, содержащей антитела лишь к гликопротеинам вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, разбавленной в соотношении 1:10 с буфером Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 и NaCl 8,5 %;
c) 15 мл положительной сыворотки к лейкозу крупного рогатого скота с энзоотическим лейкозом, содержащей антитела лишь к гликопротеинами вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота, разбавленной в соотношении 1:5 с буфером Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 и NaCl 8,5 %;
b) четыре пластмассовых чашки Петри диаметром 85 мм;
c) перфоратор диаметром 4-6 мм;
d) антиген-эталон;
e) антиген, который должен быть стандартизирован;
f) водяная баня (56 °C).
2) Процедура:
Агар (1,6 %) растворяется в буферном растворе Tris/HCl, осторожно подогревая до 100 °C. Используется водяная баня при 56 °C в течение примерно одного часа. Добавляются растворы положительной сыворотки к лейкозу крупного рогатого скота в водяную баню при 56 °C.
Затем смешиваются 15 мл агарного раствора при 56 °C с 15 мл положительной сыворотки к лейкозу крупного рогатого скота (1:10), быстро встряхивается и выливается в две чашки Петри, по 15 мл в каждую. Вышеперечисленные операции снова начинаются с сывороткой лейкоза крупного рогатого скота, разбавленной 1:5.
После затвердения агара лунки готовятся следующим образом
3. Добавление антигена:
a) чашки Петри № 1 и 3:
- лунка A – неразбавленный антиген, эталон;
- лунка B – разбавленный 1:2 антиген - эталон;
- лунки C и E – антигены-эталоны;
- лунка D – неразбавленный исследуемый антиген;
b) чашки Петри № 2 и 4:
- лунка A – неразбавленный исследуемый антиген;
- лунка B – разбавленный 1:2 исследуемый антиген;
- лунка C – разбавленный 1:4 исследуемый антиген;
- лунка D – разбавленный 1:8 исследуемый антиген.
4) Дополнительные указания:
a) в целях получения оптимальной преципитации опыт должен проводиться с сывороткой в 2 разбавлениях (1:5 и 1:10);
b) если диаметр преципитации слишком маленький в обоих разбавлениях сыворотку следует разбавить дополнительно;
c) Если диаметр преципитации слишком большой или невыраженный, в обоих разбавлениях должны выбрать меньшую степень разбавления сыворотки;
d) конечная концентрация агара должна быть 0,8%, сывороток - 5% и соответственно 10%;
e) записываются диаметры, определенные по следующей системе координат. Рабочее разбавление - то, которое показало одинаковый диаметр исследуемого антигенов и антигена-эталона.
3. Иммуноферментный тест (ELISA) для выявления энзоотического лейкоза крупного рогатого скота
1) Используются следующие материалы и реактивы:
a) твердофазные микропластинки, кюветки или другая любая твердая основа;
b) антиген, фиксируемый в твердой фазе с или без помощи фиксирующих моноклональных или поликлональных антител. Если антиген прикреплен прямо к твердой фазе, все исследуемые пробы, дающие положительную реакцию, должны быть исследованы против контрольного антигена. Контрольный антиген должен быть идентичным с исследуемым антигеном, исключая антигены вируса энзоотического лейкоза крупного рогатого скота. Если фиксирующие антитела ассоциированы с твердой фазой, то антитела не должны вступать в реакцию с другими антителами, кроме антител к ЭЛКРС;
c) исследуемая биологическая жидкость;
d) соответствующий положительный и отрицательный контроль;
e) конъюгат;
f) субстрат, приспособленный к используемому ферменту;
g) ингибирующий раствор, при необходимости;
h) растворы для разбавления исследуемых проб, для приготовления реактивов и для мытья;
i) система читки, соответствующая используемому субстрату.
2) Стандартизация и чувствительность теста
Чувствительность ELISA-теста должна быть на таком уровне, чтобы сыворотка Е05, будучи оценена при 10-кратном разбавлении, показала положительную реакцию (для проб сыворотки) или в 250 раз больше в сравнении с полученными разбавлениями, начиная со сборных проб (для проб молока). В исследованиях, в которых пробы (сыворотка и молоко) исследуются отдельно, сыворотка Е05 при разбавлении 1:10 (для отрицательной сыворотки) или 1:250 (для отрицательного молока) должна показать положительную реакцию, когда исследуется при том же рабочем разбавлении, что и при индивидуальном исследовании. Институты, указанные в подпункте 2 пункта 1, отвечают за проверку качества ELISA-метода, в частности, для определения в каждой партии продукции количества проб, взятых вместе, в зависимости от титра, полученного для сыворотки Е05.
3) Условия использования ELISA-теста для выявления энзоотического лейкоза крупного рогатого скота:
a) ELISA –тесты могут использоваться на пробах сыворотки или молока;
b) если ELISA-тесты используются в целях сертификации в соответствии с положениями подпункта 3) пункта 14 настоящей Нормы или для присвоения и сохранения статуса поголовья в соответствии с частью I настоящего приложения, смесь проб сыворотки или молока выполняется таким образом, чтобы взятые для исследования пробы можно было однозначно отнести к отдельным животным, от которых происходит включенная в смесь сыворотка или молоко. Любое подтверждающее исследование проводится на пробах, взятых от отдельных животных;
c) при использовании ELISA-тестов на пробе разливного молока, эта проба берется из молока, которое происходит из поголовий, в которых не менее 30 % молочных коров находятся в лактационном периоде. Любое подтверждающее исследование проводится на пробах сыворотки или молока, взятых от отдельных животных.
приложение № 5